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PROCEDIMENTO OPERACIONAL PRÁTICO Número: LAB - POP- 18 CURSO: BIOMEDICINA Aprovação: DISCIPLINA: HEMATOLOGIA CLÍNICA Coordenação de Laboratórios ELABORADO POR: LEANDRO DOBRACHINSKI DATA: 02/05/2017 Revisão: 00 1 1. AULA PRÁTICA • Contagem de Reticulócitos 2. OBJETIVO • Determinar a quantidade de Reticulócitos em % e por mm³ no sangue periférico 3. DISCIPLINA • Hematologia Clínica 4. MÉTODO EXPERIMENTAL/PROCEDIMENTO 4.1. Amostra • Sangue Venoso 4.2. Materiais Utilizados QUANTIDADE DESCRIÇÃO DA VIDRARIAS E EQUIPAMENTOS 5 • Tubo de ensaio para coleta à vácuo (EDTA) 5 • Seringas com agulha (5 mL) 5 • Tubo de Ensaio 12 x 75mm 1 • Garrote para coleta 1 • Algodão (pacote) 5 pares • Luvas 5 • Bandagem de Proteção pós Coleta 10 • Lâminas para distensão sanguínea 1 • Pipeta de variável até 200 µL 20 • Ponteiras para pipetas de 200 µL 1 • Banho Maria a 37°C 5 • Microscópio 1 • Óleo de Imersão QUANTIDADE REAGENTES/INSUMOS 1 • Frasco de Álcool 70% 1 • Azul de Cresil Brilante PROCEDIMENTO OPERACIONAL PRÁTICO Número: LAB - POP- 18 CURSO: BIOMEDICINA Aprovação: DISCIPLINA: HEMATOLOGIA CLÍNICA Coordenação de Laboratórios ELABORADO POR: LEANDRO DOBRACHINSKI DATA: 02/05/2017 Revisão: 00 2 OBS: A quantidade material listada abaixo é estimada para apenas um grupo de alunos. A quantidade de grupos, por aula, deve ser definida pelo professor no momento do agendamento da aula prática. Sugerido 03 - 06 alunos por grupo 4.3. Procedimento Técnico • Colher 3 mL de sangue por punção venosa (Tubo com EDTA); • Realizar a homogeneização por inversão lentamente para não ocorrer hemólise; • Adicionar 300µL do sangue em um tubo de vidro 12 x 75mm, juntamente com 200µL do Reagente Azul Cresil Brilhante; • Homogeneizar com a Pipeta e colocar em banho Maria a 37° C por 20 minutos; • Secar e observar em microscópio utilizando óleo de imersão; • Realizar a contagem de 1.000 hemácias, anotando simultaneamente o número de reticulócitos encontrados; 4.4. Valores de Referência • Adulto: 0,5 a 2% • Gestantes: ≥ 4 % • Recém - Nascido até 10% • 25.000 - 75.000mm³ 5. EQUIPAMENTOS DE PROTEÇÃO/ PARAMENTOS • Luva de Procedimento • Jaleco • Calçado fechado 6. REFERÊNCIAS • CARVALHO, William de Freitas. Técnicas Médicas de Hematologia e Imuno- Hematologia. 8ª Edição, Belo Horizonte: Coopmed Editora, 2008. • MOURA, Roberto de Almeita, et al. Técnicas de Labortório. 3ª Edição, São Paulo: Editora Atheneu, 2008. 7. OBSERVAÇÕES • Cálculo para Determinação do Resultado: PROCEDIMENTO OPERACIONAL PRÁTICO Número: LAB - POP- 18 CURSO: BIOMEDICINA Aprovação: DISCIPLINA: HEMATOLOGIA CLÍNICA Coordenação de Laboratórios ELABORADO POR: LEANDRO DOBRACHINSKI DATA: 02/05/2017 Revisão: 00 3 nº de Reticulócitos/1.000 Hemácias = % Reticulócitos 10 • Para expressar o resultado por milímetro cúbico (valor absoluto), realizar a contagem global eritrocitária e aplicar a fórmula: % de reticulócitos x n° de eritrócitos/mm³ = Reticolócitos/mm³ 100
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