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UNIP INTERATIVA UNIVERSIDADE PAULISTA Curso Licenciatura Ciências Biológicas Heitor Carvalho Frederico RA:1713817 PRATICA COMO COMPONENTE CURRICULAR (PCC) Biologia Molecular Polo Artur Nogueira-SP 2019 Heitor Carvalho Frederico RA 1913817 PRATICA COMO COMPONENTE CURRICULAR (PCC) Biologia Molecular Trabalho apresentado à Universidade Paulista – UNIP INTERATIVA, referente ao curso de Licenciatura em ciências biológicas, como um dos requisitos para a avaliação na disciplina de cunho prático como componente curricular PCC: Biologia Molecular. POLO ARTUR NOGUEIRA 2019 Prática como Componente Curricular Biologia Molecular Enzimas de restrição sequência é fita simples e está representada seguindo a convenção, ou seja, de 5’ → 3’. GCCTTCAATGGCAAGCGGTCTGGAATCCTACTTCTTGAATCGGCACGGTGTCATT ACGGGCGGGGGCCAGAACAACGTCCCTGGACATCACACCTAGCCCGTGCGACGG CGGAAACCTTCGCCGGCGCAGGCTTCGACGTGACCCTCATCGCGGAACCCTCCCC CACCCCAGTGTTGGCGTGGCTGGTGCGCTCACGGCGAATGGACGTGGGCGTGCAG ATCACCGCCTCGCACAATCGAATTCAGGACAACGGCTACAAGCTGTACCTGGACG GCGGCTCTCAGCTGGTCTCCCCCGCCGACCGGCAGATCGAGGAGCACATTGCCGC CCAGCCAACTGACGCGGCGAAGATCCCCCGCTCCGAGGCGAAGTCTGTAGACCT GTCCGTAGTCTCCGGCTATGTCACCGAGCTAAGTACCCTGGTGGCCACCGGCCGC CAATCCGAGCTGGCGCCGCGGCGGAAGCTGAAGATCCTCTACACCCCCATGCACG GCGTGGGCGGCAATGCCCTGGAGTGGGCCTTACGTGAATTCGGCTTCGGCAACGT GCACGCGGTGGCCTCGCAGCGCTGGCCGGACCCGACCTTCCCGACTGTGGACTTC CCCAACCCTGAGGAGCCGGGTGCCACCGACGCGCTGCTGGAAGAAGCCCGCGCC ATCGATGCGGACCTGCTGATCGCC CTGGATCCGGATGCGGACC Sabe-se que a enzima de restrição BamHI corta um DNA fita dupla do seguinte modo e no seguinte sítio (veja figura). a) Quantos sítios de restrição existem nessa sequência? Cinco sítios de restrição b) Faça uma pesquisa sobre os tipos de cortes das enzimas de restrição. Descreva-os e classifique o corte da enzima BamHI. Enzimas são proteínas que tem atividade catalítica dentro destas enzimas encontram enzimas de restrição conhecida como endonuclease, são enzimas que cortam cadeias fosfodiéster, a partir de uma sequência de reconhecimento, este reconhecimento especifico de DNA nas quais são chamadas, região de restrição, as enzimas de restrição são produzidas através das bactérias, como mecanismo de defesa, contra infecção por fagos, as endonucleases tipo II são enzimas de restrição pode gerar dois tipos diferentes de cortes, dependendo se eles cortam ambas as cadeias no centro da sequência de reconhecimento, ou cada fio mais perto de uma das extremidades da sequência de reconhecimento. O primeiro corte vai gerar “termina sem corte” sem saliências nucleotídeos. Este último, gera “pegajoso” ou “coesa” termina, porque cada fragmento resultante de DNA tem uma saliência que complementa os outros fragmentos. Ambos são úteis em genética molecular para a tomada de ADN recombinante e proteínas. c) O gel abaixo apresenta, na canaleta 1, um padrão de peso molecular onde as bandas representam sequências com 50bp, 80bp, 200bp e 1000pb. Suponha que o DNA acima tenha sido clivado pela enzima PvuII e represente, na canaleta 2, os fragmentos resultantes do corte. 1 2
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