Enzima amilase salivar

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UNIVERSIDADE DO EXTREMO SUL CATARINENSE - UNESC
CURSO DE FARMÁCIA
ALINE JEREMIAS
AÇÃO DA ENZIMA AMILASE SALIVAR
CRICIÚMA
 2019
 ALINE JEREMIAS
AÇÃO DA ENZIMA AMILASE SALIVAR
Relatório apresentado à disciplina de Bioquímica I do curso de Farmácia - Unesc
Professora: Meline Oliveira dos Santos Morais 
CRICIÚMA
2019
SUMÁRIO
1	INTRODUÇÃO	3
2	OBJETIVO	5
3	MATERIAIS E MÉTODOS	6
3.1	MATERIAIS E REAGENTES	6
3.2	PROCEDIMENTO	6
4	RESULTADOS E DISCUSSÃO	7
5	CONCLUSÃO	8
REFERÊNCIAS	9
INTRODUÇÃO
As enzimas podem substituir muitos produtos químicos nocivos ou até perigosos a saúde e permitem uma produção segura e correta, são bastante solúveis em água e álcool diluído, podendo ser inativadas pelo calor ou precipitadas pelo pH, sendo as propriedades mais importantes destes compostos na tecnologia de alimentos. Devido ao seu grande poder de ativação específica e de conversão de substratos em produtos, ambos atuam acelerando ou aumentado a velocidade das reações químicas como forma de atividade catalítica de determinadas moléculas. O catalisador é um composto que acelera uma reação química, até torná-la instantânea ou quase instantânea, ao diminuir a energia de ativação. Além disso, as enzimas apresentam melhor desempenho entre 30 a 70 °C e em pH próximo a neutralidade, e são fundamentais para a manutenção e regulamentação de todo o metabolismo dos seres vivos (BOBBIO, 1996).
A amilase salivar trata-se de uma hidrólise, cuja sua função é degradar os carboidratos, produzida pelas glândulas parótidas e pâncreas. O amido começa a ser digerido na boca por ação da enzima -amilase salivar, que hidrolisa as ligações (14) das cadeias do amido, dando origem à glicose, maltose e oligossacarídeos (LEHNINGER, 1976). 
A -amilase salivar, em condições específicas de pH 6,8 e temperatura 37ºC, catalisa a hidrólise das ligações da cadeia glicosídica do polissacarídeo amido. A hidrólise do amido é considerada parcial, enquanto os produtos resultantes formam uma mistura de moléculas de glicose, maltose e dextrina limite. Esta hidrólise do amido evidencia-se na presença de iodo (LEHNINGER, 1976). 
As amilases estão entre as mais importantes enzimas industriais são de grande importância na biotecnologia atual. Além de serem usadas como aditivos em detergentes, elas podem ser empregadas na sacarificação do amido e nas indústrias de alimentos, fermentação, papel e têxtil. Com o advento de novas fronteiras biotecnológicas, o espectro de aplicação das amilases tem se expandido para muitas outras aéreas, incluindo clinicas, farmacêutica, médica e químico-analítica (OLIVEIRA, A O.; OLIVEIRA, L. A.; ANDRADE, J. S.; CHAGAS, A F. 2007).
As amilases ocorrem amplamente em animais, plantas e microrganismos. Entretanto, devido as vantagens que oferecem, como menos tempo de produção, as amilases microbianas tem a preferência do mercado de enzimas. O gênero Bacillus é um dos mais importantes e investigados grupos de bactérias produtoras de amilíase comercial. Porém, programas para selecionar novas fontes microbianas estão crescendo ao redor do mundo (OLIVEIRA, A O.; OLIVEIRA, L. A.; ANDRADE, J. S.; CHAGAS, A F. 2007). 
Entre os vários parâmetros que estimulam a produção de amilases, as condições de crescimento microbiano e os substratos de carbono usados no meio de cultivo tem recebido atenção especial. Fontes de carbono como dextrina, frutose, glicose, lactose, maltose, amido solúvel, além de outras, encarecem sua produção (OLIVEIRA, A O.; OLIVEIRA, L. A.; ANDRADE, J. S.; CHAGAS, A F. 2007).
OBJETIVO
Analisar a ação da enzima amilase salivar frente a diferentes substratos. 
MATERIAIS E MÉTODOS
MATERIAIS E REAGENTES 
	 MATERIAIS REAGENTES
	Tubos de ensaio Enzima amilase salivar
Estante para tubos de ensaio Amido 
Cronômetro Sacarose 
Caneta hidrográfica Reagente de Benedict 
Banho Maria 30°C 
Pipetador Pi-Pump 
Pipeta graduada 
Pipeta de Pasteur
PROCEDIMENTO
Para realizar esse experimento, utilizou a saliva de um dos componentes do grupo e após a coleta foram numerados dois tubos diferentes. 
Logo após, adicionou-se 0,5 mL da enzima em cada um dos tubos com auxílio da pipeta de pasteur, sendo que no primeiro tubo foi acrescentado 2 mL de amido e no segundo tubo, 2 mL de sacarore.
Em seguida, foram incubados os dois tubos a 30-37ºC durante 15 minutos e após a incubação, foram acrescentados 2 mL de reativo de Benedict cada tubo e aquecido diretamente na chama do bico de Bunsen. 
RESULTADOS E DISCUSSÃO
Ao analisarmos o tubo 1, conseguimos observar uma mudança de cor durante o aquecimento, de um azul claro para um marrom escuro, pois ao colocarmos a saliva em contato com o amido, inicia-se a hidrólise enzimática, por ação de alfa-amilase, onde o amido é convertido em seus produtos derivados, maltose e glicose. Esta reação de hidrolise parcial ou total, conseguimos provar através do teste de Benedict, na qual foi capaz de revelar a presença de açúcares redutores quando presentes em uma amostra, dando essa coloração esverdeada. No entanto, a alta temperatura, inativou a enzima alfa-amilase presente na saliva, assim, não haverá hidrólise do amido. 
Já no tubo 2, não houve mudança de cor, mantendo um produto com coloração azulada, tendo como resultado negativo, pois a amilase salivar não hidrolisa a sacarose, desta forma, não ocorreu a quebra da sacarose em açúcar redutor. 
5 CONCLUSÃO 
As observações feitas durante a prática foram concordantes com os objetivos aos quais queríamos atingir e a partir dos resultados observados, conclui-se que a -amilase salivar, em condições específicas de pH 6,8 e temperatura 37ºC, catalisa a hidrólise das ligações da cadeia glicosídica do polissacarídeo amido.
Para tanto, conclui-se que o teste do Benedict é uma ferramenta importante para identificação de açúcares redutoras, devido a capacidade desses açúcares de reduzir os íons de cobre advindos do Benedict e formar compostos com cores que são distintas do azul claro inicial do reagente. 
Quanto à execução dos procedimentos experimentais, pode-se concluir que os objetivos estabelecidos para a aula prática foram alcançados com sucesso e os conhecimentos adquiridos através dos processos observados na prática laboratorial são de grande relevância para a construção do entendimento. 
REFERÊNCIAS
OLIVEIRA, A O.; OLIVEIRA, L. A.; ANDRADE, J. S.; CHAGAS, A F. Produção de amilase por rizóbios, usando farinha de pupunha como substrato. Ciência e Tecnologia de Alimentos. Vol. 27, n. 1, Campinas Jan./Mar. 2007.
Lehninger, A; L. Bioquímica. 2°. ed. São Paulo: Editora Edgard Blucher, 1976.
Bobbio, F; P. Introdução a Química de Alimentos. 2° ed. São Paulo: Livraria Varela, 1996.