atividade complementar bioquimica 1 aula pratica 1

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RELATÓRIO DE AULAS PRÁTICAS: BIOQUIMICA HUMANA – Aula 1
	NOME: MAYANÍ KAROLINA RODRIGUES DE ARAÚJO OLIVEIRA
	MATRÍCULA:01447054
	CURSO: FARMÁCIA
	POLO: UNINASSAU CAPIM MACIO
PROTEINAS
Responsáveis pelo desempenho de diversas funções no organismos as proteínas são macromoléculas de extrema importância para o organismo humano uma vez que desempenham funções de contração muscular, estrutural, defesa, enzimática, transporte e armazenamento. (Marques, 2014) essas proteínas podem ser consideradas anfifílicas ou anfipáticas, isso significa dizer que essas proteínas podem ser solúveis ou não em água respectivamente, essa caracterisca pode variar de acordo com a estutura da proteína sendo elas variáveis entre estrutura primaria, secundária, terciária (NELSON, D. L.; COX, M. M., 2002) a primeira estrutura é linear com ligações químicas não tão fortes entre elas permitindo o contato com a água e por isso é um estrutura polar, enquanto a segunda é uma estrutura levemente entrelaçada entre si pois conseguimos verificar uma quantidade maior de ligações entre si além de ligações mais fortes mas ainda sim é uma estrutura polar já a terceira é enovelada entre si com ligações peptídicas mais fortes e permite um contato menor com a água e por fim a quarta estrutura é bem mais compacta que não permitem o contato direto cm a água uma vez que suas interações peptídicas não permitem que as pontes de hidrogênio se formem entre a proteína e a água. (Marques, 2014) cada conformação da proteína configura sua função e sempre que a sua conformação altera dizemos que essa proteína sofreu desnaturação devido a quebra das ligações das pontes de hidrogênio essas ligações são muito fracas e por isso podem facilmente se quebrar por fatores externos como força iônica, temperatura, ph e detergente. (Sandro Nascimento Silva; Carlos Roberto Rosa, 2010)
PRECIPITAÇÃO FRACIONADA POR SOLUÇÕES SALINAS CONCENTRADAS
Materiais utilizados
· 1 micropipeta de vidro de 5 ml
· 1 tubo de ensaio
· Reagentes ( Solução de ovoalbumina 10% + Solução concentrada de sulfato de amônio (NH4)2SO4))
A) Sauting in é o aumento da solubilidade quando a amostra esposta em meio aquoso enquanto Salting out é a redução da solubilidade no meio aquoso devido o aumento das interações proteína-proteína. Camada de solvatação é quando os íons se distribuem uniformemente no meio aquoso. (NELSON, D. L.; COX, M. M., 2002)
B) o princípio Bioquímico da precipitação de proteínas por adição de soluções salinas.
A proteína é desnaturada através das forças iônicas, Ao adicionarmos sais ao tubo contendo ovoalbumina aumentamos a força iônica através do aumento de íons que passam a interagir com as moléculas de proteínas e reduz a interação entre as ligações peptídicas aumentando assim a solubilidade da molécula proteica. (UFPB , 2017) 
C) ao adicionarmos água ao experimento aumentamos a solubilidade das proteínas.em água uma vez que o sulfato de amônio diminuiu as ligações peptídicas entre as proteínas obtivemos uma estrutura que possibilita o melhor contato com água. 
4- Podemos observar após acrescentar o sal neutro a presença de um meio leitoso no tubo, esse meio leitoso indica a precipitação da proteina quando exposto ao sal, desse modo concluímos que a presença de proteínas na amostra (ovoalbumina 10%) é positiva. 
 PRECIPITAÇÃO POR ÁCIDOS FORTES E METAIS PESADOS
Materias utilizados. 
· Reagentes (ácido tricloroacético 3%, acetato de chumbo)
· Amostra (Ovoalbumina 10%)
· Pipeta 2 ml
· 2 tubos de ensaio
A) Comente os resultados obtidos no procedimento da precipitação da ovoalbumina com ácido forte e metal pesado. O precipitado de proteina na presença de metais pesados e ácidos fortes torna a proteina insolúvel pois apesar de quebrar ligações peptídicas favorecem a ligação da proteina com as substâncias presentes no meio aquoso.
B) Qual a fundamentação teórica que explica o processo de precipitação das proteínas com ácidos fortes e metais pesados? O metais pesados formas proteínas insolúveis quando o ph esta acima do ponto isoelétrico e isso ocorre porque a carga liquida da proteina se torna negativa e favorece a interação com cátions advindos do sal enquanto que na presença de ácidos fortes o ponto isoelétrico diminui tornando a proteina positiva e aumentando a interação com os ânions presentes no meio. 
C) O que ocorreu com a ovoalbumina para que ela formasse um precipitado insolúvel neste experimento? Houve quebra das ligações peptídicas das proteínas para que a proteína se conecte com os íons presentes no meio aquoso.
4. Conclusão sobre a precipitação de proteínas por ácidos fortes e metais pesados.
 Ao serem expostas a metais pesados e ácidos fortes as proteínas tiveram ligações peptídicas quebradas com isso houve redução da sua solubilidade e consequente desnaturação proteica que culminam na perda de função, essa desnaturação pode sofrer reestruturação quando alterado o ph do meio para corrigir o ponto isoelétrico. Podemos perceber esse resultado através da formação de um liquido branco e leitoso.
TEMA DE AULA: REAÇÃO DE BENEDICT (IDENTIFICAÇÃO DE AÇÚCARES REDUTORES)
2. Materiais utilizados.
· Sacarose 1%
· Glicose 1%
· Agua destilada
· 3 tubos de ensaio
· Pipeta 5 ml
· Reagente de benedict
3. Responda as Perguntas:
A) Qual a composição do Reativo de Benedict? Ácidos cúpricos que são capazes de reduzir a ácido cuproso.
B) O que são açúcares redutores? São açucares com uma hidroxila livre em sua composição, essas hidroxilas são capazes de reagir com qualquer cátion presente no meio e capaz de realizar redução de compostos com ions positivos livres.
C) Explique a fundamentação teórica do Teste de identificação de açúcares redutores com o Reativo de Benedict. Conforme já mencionado anteriormente os açucares redutores possuem a hidroxila em sua composição e essa hidroxila é capaz de se ligar com o ácido cúprico presente no reativo de Benedict e o resultado dessa reação é a formação do ácido cuproso observada pela coloração vermelho tijolo, consideramos a amostra positiva para açucares redutores. 
D) Comente os resultados observados no experimento relacionando com a identificação de açúcares redutores. Foram utilizados 3 tipos de amostra(agua destilada, sacarose e glicose ) cada tubo com uma amostra no qual a água atuou como controle negativo e nenhuma reação pode ser observada enquanto que no tubo contendo sacarose também não houve reação com isso entendemos que a amostra não reagiu com o ácido cúprico presente no reagente, já a glicose apresentou uma coloração avermelhada com isso entendemos que a glicose foi capaz de reagir com o ácido cúprico resultando em ácido cuproso.
E) Exemplifique algumas aplicações deste teste na área clínica. É um teste qualitativo ou quantitativo? O teste é qualitativo pois determina a amostra como positiva ou negativa para a presença de açucares, o teste foi realizado por muito tempo para a determinação de glicose no sangue do paciente diabético até experimentos mais quantitativos serem difundidos.
4. Conclusão sobre a identificação de açúcares redutores utilizando o Teste de Benedict.
Conforme já relatado no ítem “D” da questão 3 apenas a glicose das amostras utilizadas possuem hidroxilas redutoras presente em sua composição.
ENZIMAS
São moléculas proteicas com função enzimática, as enzimas atuam como catalisadores biológicos afim de acelerar as reações metabólicas que ocorrem em uma temperatura de até 37º e em ph neutro. Catalisadores são capazes de acelerar reações muito superiores a reação que ocorreria em reações não catalisadas. Esses catalisadores são altamente específicos e se ligam apenas a substratos destinado a ele, desse modo o rendimento das reações é quase que 100% (Dau, 2015) Uma enzima muito importante para fins biológicos é a enzima salivar que é produzida em sua maior parte por pâncreas e glândulas parótidas, essa enzima é responsável pela degradação de carboidratos ocorre na boca e degrada o amido na porção (14) o resultado dessa reação é glicose, maltose e oligossacarídeos. (UNESP, 2019)
Materiais utilizados.· HCL
· 6 tubos de ensaio
· Amido 1%
· Pipeta + pêra 
· Solução de amilase salivar
· Lugol
· Agua destilada
A) Qual a composição do amido? O amido é um polissacarídeo composto por diversas moléculas de glicose (amilose e amilopectina)
B) Comente os resultados obtidos nos tubos 1, 2 e 3 no procedimento da hidrólise química do amido.
Tubo 1: Banho de gelo: não houve hidrolise
Tubo 2: Aquecimento 10 min + banho de gelo: houve hidrolise de amido
Tubo 3: Aquecimento 20 min + banho de gelo: houve hidrolise de amido
C) Qual o objetivo do uso de HCl, aquecimento e resfriamento no procedimento da hidrólise química do amido? HCL é utilizado para obtenção de um meio ácido afim de degradar as ligações glicosídica presente no amido e favorecer a quebra que é realizada pela enzima em sua temperatura conhecida como temperatura ótima. 
a altrações de temperatura são utilizadas para análise de como ocorre a quebra do amido em diferentes tempertaturas no qual a enzima amilase salivar funciona em sua temperat 
D) Descreva a sequência de transformações operadas pela amilase na molécula da amilose. 
E) Comente os resultados obtidos nos tubos 1, 2 e 3 no procedimento da hidrólise enzimática do amido.
Tubo 1: Banho de gelo: Não houve hidrolise
Tubo 2: Aquecimento 10 min + banho de gelo: houve hidrolise de amido
Tubo 3: Aquecimento 20 min + banho de gelo: houve hidrolise de amido
F) Explique a relação entre a atividade da amilase salivar, o tempo de incubação da enzima com o amido e a variedade de cores observada no procedimento da hidrólise enzimática do amido. A variação de cores que ocorre durante o processo indica atividade enzimática de acordo com a tempertatura e o tempo de a amostra foi exposta em amostras que permaneceram na cor azul indica que a atividade enzimática não ocorreu conforme desejado uma vez que estavam fora da temperatura ideal (0º e 80º) enquanto que nos tubos submetidos há 37ºc houve alteração de coloração tanto no tempo de 10’ e 20’ uma vez que a temperatura foi ideal para funcionamento das enzimas; temperaturas muito superiores podem causar desnaturação proteica e temperaturas muito inferiores não ativam a atividade enzimática.
4. Conclusão sobre a atividade catalítica da amilase salivar. Após a realização do experimento entendemos que para que sua atividade seja desempenhada com sucesso faz-se necessário que o procedimento seja submetido a temperatura ideal de 37ºc uma vez que não observamos atividade enzimática em temperaturas muito divergentes como 0º e 80ºc.
CARBOIDRATOS
São moléculas que favorecem energia para o organismo humano e normalmente reconhecidas por sua estrutura contendo carbono, hidrogênios e oxigênio (CH2O) ou conhecidos como carbonos hidratados esses carboidratos são classificados como monossacarídeos, dissacarídeos e oligossacarídeos vai depender da quantidade de açucares contidos na cadeia, é uma molécula de extrema importância para a célula pois a sua função principal é fornecer energia para as diversas funções principalmente para a respiração celular (Motta) comumente chamados por açucares em termos gerais podem ser classificados como redutores ou não redutores, isso significa dizer que os açucares redutores possuem em sua cadeia a presença de uma hidroxila negativa que é capaz de reagir com o polo positivo de ion livre de ácido cúprico (CU2+) e o resultado dessa reação será a redução para ácido cuproso enquanto que o açúcar não redutor não possui hidroxila livre e por isso não realiza redução de outras substancias que realizem contato (NELSON, D. L.; COX, M. M., 2002) naturalmente os carboidratos monossacarídeos são encontrados com maior frequência no meio estando presente em grande parte dos alimentos dispostos a mesa, podendo estar presente principalmente nas frutas pois são açucares simples, mas ainda assim podem ser divididos em aldoses ou cetoses a depender do grupamento junto ao átomo de carbono que pode ser um aldeído ou cetona presente em sua estrutura para realizar a identificação de quem é a cetose é necessário atuar com o teste de seliwanoff uma vez que a cetose é capaz produzir fufural que em contato com ressorcinol apresenta uma coloração avermelhada. (Junior, 2008)
TEMA DE AULA: REAÇÃO DE SELIWANOFF (REAÇÃO PARA DISTINÇÃO ENTRE ALDOSES E CETOSES)
. Materiais utilizados.
· Agua destilada
· Glicose
· Frutose
· Reagente de Seliwanoff
· HCL
· 3 tubos de ensaio 
· Pipeta 2 ml
3. Responda as Perguntas:
A) Explique o princípio bioquímico do teste de Seliwanoff.
O teste serve para diferenciar aldoses de cetoses uma vez que a cetose ao entrar em contato com hcl presente no estomago produz o composto fufural que reage diretamente com o resorcinol presente no reagente de sewanoff através de uma coloração vermelha.
B) Comente os resultados obtidos nos 3 tubos utilizados no procedimento, correlacionando com a presença ou não de aldoses e cetoses. O tubo contendo água e glicose não houve alteração quando expostos ao reagente enquanto que o tubo contendo frutose teve uma reação positiva devido a reação entre o fufural produzido após o contato com o hcl e posteriormente resultante do ressorcinol derivado da ureia presente no reagente de seliwanoff.
C) Explique qual o objetivo de utilizar um tubo apenas com água destilada. Realizar a obtenção de um resultado negativo uma vez que a água é composto apenas por oxigênio e hidrogênio.
D) Qual a função do ácido clorídrico (HCl) e da fervura aplicados no teste de Seliwanoff? O hcl atua como extrator de fufural simulando a chegada da amostra no estomago enquanto que o aumento da temperatura atua como um catalisador aumentando a velocidade da reação dentro dos tubos. No tubo contendo agua que atua como controle negativo não houve alteração de cor, contabilizando um resultado negativo, enquanto que o tubo contendo glicose também houve um resultado negativo assim entendemos que a glicose não é uma cetose uma vez que não produz fufural para reagir com o ressorcinol presente no reativo, mas a frutose apresentou uma coloração vermelha resultante da reação de fufural com ressorcinol.
4. Conclusão sobre a identificação de aldoses e cetoses utilizando o teste de Seliwanoff.
Verificamos que ; apenas a frutose apresentou presença de fufural ao ser colocada em contato com o Hcl, desse modo apenas a frutose é uma cetose.
Referências
Dau, A. P. (2015). Bioquimica Humana. São Paulo: Pearson Education Brasil.
Junior, W. E. (29 de Agosto de 2008). Carboidratos: estrutura propriedades e funções. Fonte: https://docente.ifsc.edu.br/lucia.martins/MaterialDidatico/Bioqu%C3%ADmica/Textos/CARBOIDRATOS.pdf
Marques, M. R. (2014). Bioquimica (1ª edição ed.). Santa Catarina: UFSC. Fonte: https://uab.ufsc.br/biologia/files/2020/08/Bioqu%C3%ADmica.pdf
Motta, W. T. (s.d.). Bioquimica básica. Carboidratos. Fonte: https://docente.ifsc.edu.br/lucia.martins/MaterialDidatico/Bioqu%C3%ADmica/Textos/CARBOIDRATOS1.pdf
NELSON, D. L.; COX, M. M. (2002). Lehninger Princípios de Bioquímica. São Paulo: Sarvier. Fonte: https://cesad.ufs.br/ORBI/public/uploadCatalago/11281716022012Bioquimica_aula_5.pdf
Sandro Nascimento Silva; Carlos Roberto Rosa. (2010). Bioquimica. Pernambuco: UFRPE. Fonte: https://docente.ifsc.edu.br/lucia.martins/MaterialDidatico/Bioqu%C3%ADmica/Textos/PROTE%c3%8dNA-lipidios-carboidratos.pdf
UFPB . (01 de 08 de 2017). Laboratório didático de bioquimica . Fonte: http://plone.ufpb.br/ldb/contents/paginas/precipitacao-de-proteinas-por-adicao-de-sais-neutros-efeito-da-forca-ionica
UNESP. (01 de 01 de 2019). DETERMINAÇÃO DA ATIVIDADE DA AMILASE SALIVAR. Fonte: UNESP: http://sgcd.foa.unesp.br/home/departamentos/ciencias_basicas/2019-determinacao-da-atividade-da-amilase-salivar.pdf