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PARASITOLOGIA – CAFAR MÉTODOS QUALITATIVOS: · SEDIMENTAÇÃO ESPONTÂNEA (MÉTODO DE HOFFMAN, PONS E JANER ou LUTZ) – Em água. · SEDIMENTAÇÃO POR CENTRIFUGAÇÃO (MÉTODO DE MIFC ou DE BLAGG) – Em éter-sulfúrico Agitar vigorosamente, para desengordurar o material Centrifugação 1500 rpm/min Para análise de Cryptospopridium o tempo de dentrifugação deve ser aumentado para 10 min. *MÉTODO DE RITCHIE ou “Formol-éter” tem o mesmo princípio, sendo a técnica basicamente a mesma. A principl diferença é que neste as fezes são colhidas em formol 10% · CENTRIFUGO-FLUTUAÇÃO (MÉTODO DE FAUST) – Em sulfato de zinco 33% Tubo de Wasserman (tubo de hemólise) Centrifugação 2500 rpm/min. Examinado imediatamente, pois o sulfato de zinco pode deformar as formas parasitárias Ovos leves · FLUTUAÇÃO ESPONTÂNEA (MÉTODO DE WILLIS) Diluir as fezes em solução saturada de açúcar ou sal Indicado principalmente para Ancilostomídeos (ovos leves) · CONCENTRAÇÃO DE LARVAS DE HELMINTOS POR MIGRAÇÃO ATIVA, DEVIDO A HIDROTROPISMO E TERMOTROPISMO POSITIVOS (MÉTODO DE BAERMANM-MORAIS E MÉTODO DE RUGAI) Indicados para pesquisa de Strongyloides stercoralis Água aquecida a 45ºC – Centrifugar 1000 rpm/min A refrigeração diminui a viabilidade das larvas MÉTODOS QUANTITATIVOS · MÉTODO STOLL-HAUSHEER – Em solução de NaOH 0,1N Pérolas de vidro para obter suspensão homogênea · MÉTODO DE KATO-KATZ – Papel celofane e Verde malaquita 3% Indicado para S.mansoni, A.lumbricoides, T.trichura e ancylostomideo Não é possível a execução com fezes diarréicas OUTROS MÉTODOS · FLUTUAÇÃO NO AÇUCAR (MÉTODO DE SHEATHER) · FITA DUREX (MÉTODO DE GRAHAM ) Essa técnica deve ser feita ao amanhecer, antes do paciente fazer a higiene e repetida, em dias sucessivos, caso negativo. Caso a lâmina não possa ser examinada no mesmo dia, deve ser embalada em papel alumínio e conservada em geladeira. COLORAÇÃO PARASITOLÓGICO · COLORAÇÃO POR HEMATOXILINA FÉRRICA – LÍQUIDO DE SCHAUDINN Essa técnica é utilizada para coloração de trofozoítos e cistos de amebas e Giardia · MÉTODO DE HENRIKSEN E POHLENZ (DERIVADO DE ZIEHL-NEELSEN)¹ Coloração de oocistos de coccídeos intestinais como Cryptosporidium parvum, Isospora belli e Cyclospora cayetanensis. As fezes (frescas, preservadas em formol 10% ou em SAF) deverão ser previamente concentradas pelo método de MIFC, aumentando o tempo de centrifugação ou pelo método de Sheather. Fezes preservadas em álcool polivinilico (PVA) não apresentam bons resultados. *Segundo De Carli, os oocistos de Cryptosporidium parvum se apresentam com coloração vermelha intensa e brilhante ou rosa, sobre um fundo azul-esverdeado. A parede e o citoplasma é finamente granulado, com sua zona central clara. Os corpos residuais e os esporozoítos são castanhos. Leveduras e bactérias se apresentam uniformente coradas em azul-esverdeado. · MÉTODO DA SAFRANINA MODIFICADA¹ · COLORAÇÃO PELA AURANINA¹ · COLORAÇÃO PELA FUCSINA CARBOLICA ¹ Métodos para coloração de oocistos Cryptosporidium parvum, Isospora belli e Cyclospora cayetanensis. MEIOS DE CULTURA · MEIO DE DIAMOND (TYM – Trypticase-Yeast-Maltose) para cultura exênica de tricomonadídeos. · MEIO DE STUART para TRANSPORTE (conservação temporária) de tricomonadideos · MEIO NNN isolamento e manutenção de espécies do gênero Leishmania e Trypanosoma cruzi – Ágar, NaCl e H²O destilada · MEIO DE LIT (LIVER INFUSINON TRIPTOSE) - NNN isolamento e manutenção de espécies do gênero Leishmania e Trypanosoma cruzi COPROCULTURA · MÉTODO DE LOOS · MÉTODO DE BRUMPT · MÉTODO DE HARADA E MORI *Métodos utilizados para realizar cultura de fezes para pesquisa de larvas de helmintos, principamente Ancylostomatidae ou S. stercoralis. EXAME DE VETORES · MOLUSCOS (Biophalaria) – S.mansoni · FLEBÓTOMOS (Lutzomyia) – Leishimaniose · MOSQUITOS (Anopheles) – Malária (Culex quinquefasciatus) – Wuchereria bancrofti (Culex e Aedes) – Dirofilaria immites (Aede aegypti ou albopictus) – Vírus do Dengue ou da Febre Amarela (Sabethini) – Arbovírus · PULGAS (Xenopsylla ou Polygenis) – Peste Bubônica (Yersinia) · BARBEIRO (T.cruzi) – Triatomideos · MOSCAS (Musca domestica – Chrysomya) – Diversos patógenos
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