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AULA 14: AULA PRÁTICA - ESTUDO DAS ALTERAÇÕES LABORATORIAIS DOS LEUCÓCITOS E DIAGNÓSTICO LABORATORIAL DAS NEOPLASIAS HEMATOLÓGICAS Hematologia clínica HEMATOLOGIA CLÍNICA Aula 14: Aula Prática - Estudo das alterações laboratoriais dos leucócitos e diagnóstico laboratorial das neoplasias hematológicas AULA 14: AULA PRÁTICA - ESTUDO DAS ALTERAÇÕES LABORATORIAIS DOS LEUCÓCITOS E DIAGNÓSTICO LABORATORIAL DAS NEOPLASIAS HEMATOLÓGICAS Hematologia clínica Objetivos desta aula • Explicar a classificação morfológica dos leucócitos; • Descrever a análise laboratorial das alterações leucocitárias e neoplasias hematológicas. AULA 14: AULA PRÁTICA - ESTUDO DAS ALTERAÇÕES LABORATORIAIS DOS LEUCÓCITOS E DIAGNÓSTICO LABORATORIAL DAS NEOPLASIAS HEMATOLÓGICAS Hematologia clínica Classificação e alterações de leucócitos Leucograma O Leucograma é a contagem do número total de glóbulos brancos e sua contagem diferencial no sangue periférico. Características: • Depende de interpretação criteriosa; • Apresenta baixa sensibilidade e especificidade; • Deve-se considerar o contexto clínico; • Depende da variação de idade, raça, sexo, temperatura, uso de medicamentos e doenças subjacentes. AULA 14: AULA PRÁTICA - ESTUDO DAS ALTERAÇÕES LABORATORIAIS DOS LEUCÓCITOS E DIAGNÓSTICO LABORATORIAL DAS NEOPLASIAS HEMATOLÓGICAS Hematologia clínica Classificação e alterações de leucócitos Leucograma Idade cordão 10 dias 2 anos % /µl % /µl % /µl Leucócitos 6000 a 24000 6000 a 16000 5000 a 14000 Neutrófilos 40 a 70 4000 a 14000 20 a 50 2000 a 6000 20 a 40 1000 a 4000 Linfócitos 20 a 40 3000 a 6000 40 a 70 3000 a 10000 50 a 80 3000 a 10000 Monócitos 2 a 8 400 a 1500 2 a 8 200 a 1200 2 a 10 100 a 1000 Eosinófilos 1 a 6 100 a 1200 0 a 7 0 a 800 0 a 7 0 a 700 Basófilos 0 a 2 0 a 400 0 a 3 0 a 300 0 a 3 0 a 300 Idade 5 anos 10 anos Adultos caucasóides % /µl % /µl % /µl Leucócitos 4000 a 14000 4000 a 12000 3600 a 11000 Neutrófilos 20 a 60 1000 a 6000 30 a 60 1400 a 6000 45 a 70 1500 a 7000 Linfócitos 40 a 70 2000 a 8000 30 a 60 1600 a 6000 20 a 50 1000 a 4500 Monócitos 2 a 10 100 a 1000 2 a 10 100 a 1000 2 a 10 100 a 1000 Eosinófilos 0 a 7 0 a 700 0 a 7 0 a 700 0 a 7 0 a 700 Basófilos 0 a 3 0 a 300 0 a 3 0 a 300 0 a 3 0 a 200 AULA 14: AULA PRÁTICA - ESTUDO DAS ALTERAÇÕES LABORATORIAIS DOS LEUCÓCITOS E DIAGNÓSTICO LABORATORIAL DAS NEOPLASIAS HEMATOLÓGICAS Hematologia clínica Classificação e alterações de leucócitos Leucograma O leucograma consiste na: Contagem dos leucócitos totais; Contagem diferencial relativa: Contagem de no mínimo 100 leucócitos diferenciando pelo tipo de leucócito (um a um); Contagem diferencial absoluta: Com o número de leucócitos totais e as porcentagens de cada célula obtidas na contagem diferencial é possível calcular o número absoluto de cada um dos leucócitos. AULA 14: AULA PRÁTICA - ESTUDO DAS ALTERAÇÕES LABORATORIAIS DOS LEUCÓCITOS E DIAGNÓSTICO LABORATORIAL DAS NEOPLASIAS HEMATOLÓGICAS Hematologia clínica Classificação e alterações de leucócitos Leucograma Critérios morfológicos para identificação de leucócitos Tamanho da célula; Razão núcleo/citoplasma; Características do citoplasma; Características do núcleo. AULA 14: AULA PRÁTICA - ESTUDO DAS ALTERAÇÕES LABORATORIAIS DOS LEUCÓCITOS E DIAGNÓSTICO LABORATORIAL DAS NEOPLASIAS HEMATOLÓGICAS Hematologia clínica Classificação e alterações de leucócitos Leucograma AULA 14: AULA PRÁTICA - ESTUDO DAS ALTERAÇÕES LABORATORIAIS DOS LEUCÓCITOS E DIAGNÓSTICO LABORATORIAL DAS NEOPLASIAS HEMATOLÓGICAS Hematologia clínica Classificação e alterações de leucócitos Leucograma Neutrófilos: • Granulócitos mais abundantes (55-70% dos leucócitos); • Apresentam núcleo segmentado (tipicamente com 2 a 5 lobos conectados entre si através de finas fitas de cromatina). Neutrofilia: > 7700/mm3 de sangue Causas: • Patológicas: infecções agudas, neoplasias, intoxicações e envenenamentos, hemólises agudas, uso de medicamentos corticoides, doenças proliferativas; • Fisiológicas: recém-natos, exercícios intensos, gravidez e parto, febre ou frio, calor, anestesia. AULA 14: AULA PRÁTICA - ESTUDO DAS ALTERAÇÕES LABORATORIAIS DOS LEUCÓCITOS E DIAGNÓSTICO LABORATORIAL DAS NEOPLASIAS HEMATOLÓGICAS Hematologia clínica Classificação e alterações de leucócitos Leucograma Neutrófilos: Neutropenia: < 2000/mm3 de sangue Causas: • Diminuição da produção medular: anemias, lesão tóxica; • Bloqueio na liberação medular por desordens como neutropenia cíclica e agranulocitose; • Aumento da destruição na circulação periférica: o Esplenomegalia; o Neutropenia neonatal; o Isoimune infecções (febre tifoide, brucelose e malária). AULA 14: AULA PRÁTICA - ESTUDO DAS ALTERAÇÕES LABORATORIAIS DOS LEUCÓCITOS E DIAGNÓSTICO LABORATORIAL DAS NEOPLASIAS HEMATOLÓGICAS Hematologia clínica Classificação e alterações de leucócitos Leucograma Neutrófilos: Alterações morfológicas adquiridas: • Granulações tóxicas; • Granulação azurófila citoplasmática intensa, com presença de grânulos imaturos. Mieloperoxidase (MPO+) Granulação normal Granulações tóxicas AULA 14: AULA PRÁTICA - ESTUDO DAS ALTERAÇÕES LABORATORIAIS DOS LEUCÓCITOS E DIAGNÓSTICO LABORATORIAL DAS NEOPLASIAS HEMATOLÓGICAS Hematologia clínica Classificação e alterações de leucócitos Leucograma Neutrófilos: Alterações morfológicas adquiridas: Corpúsculos de Döhle - Corpúsculos azuis na periferia do citoplasma. Presente em neutrófilos segmentados ou jovens. AULA 14: AULA PRÁTICA - ESTUDO DAS ALTERAÇÕES LABORATORIAIS DOS LEUCÓCITOS E DIAGNÓSTICO LABORATORIAL DAS NEOPLASIAS HEMATOLÓGICAS Hematologia clínica Classificação e alterações de leucócitos Leucograma Neutrófilos: Alterações morfológicas adquiridas: Vacuolizações citoplasmáticas • Áreas claras e não coradas no citoplasma, principalmente dos neutrófilos; • Indicação: inflamação, ingestão moderada de bebida alcoólica, septicemia. Neutrófilo com vacúolos plasmáticos AULA 14: AULA PRÁTICA - ESTUDO DAS ALTERAÇÕES LABORATORIAIS DOS LEUCÓCITOS E DIAGNÓSTICO LABORATORIAL DAS NEOPLASIAS HEMATOLÓGICAS Hematologia clínica Classificação e alterações de leucócitos Leucograma Neutrófilos: Alterações morfológicas adquiridas: Desvio à direita • Elevação das formas polisegmentadas no sangue periférico; • Causas: Deficiência de vitamina B12 e ácido fólico, doenças renais e hepáticas crônicas, uremia, drogas citotóxicas. Desvio à esquerda • Elevação de formas jovens no sangue periférico; • Causas: infecções agudas e subagudas, hemorragias. AULA 14: AULA PRÁTICA - ESTUDO DAS ALTERAÇÕES LABORATORIAIS DOS LEUCÓCITOS E DIAGNÓSTICO LABORATORIAL DAS NEOPLASIAS HEMATOLÓGICAS Hematologia clínica Classificação e alterações de leucócitos Leucograma Neutrófilos: Alterações morfológicas Hereditárias: Anomalia de Pelger-Huët: • Autossômica dominante; • Não apresenta deficiência funcional celular; • Falha na segmentação nuclear dos granulócitos. Anomalia de Chediak-Higashi: • Autossômica recessiva; • Apresenta grânulos gigantes citoplasmático nos leucócitos; • Acomete plaquetas, neutrófilos e melanócitos. AULA 14: AULA PRÁTICA - ESTUDO DAS ALTERAÇÕES LABORATORIAIS DOS LEUCÓCITOS E DIAGNÓSTICO LABORATORIAL DAS NEOPLASIAS HEMATOLÓGICAS Hematologia clínica Classificação e alterações de leucócitos Leucograma Neutrófilos: Alterações morfológicas Hereditárias: Hipersegmentação hereditária: • Autossômica dominante; • Apresenta neutrófilos com quantidade de lóbulos superior a cinco; • Neutrófilo funcional. Anomalia de Alder-Reilly: • Presença de granulações citoplasmáticas gigantes nos leucócitos, sem alteração funcional das células. AULA14: AULA PRÁTICA - ESTUDO DAS ALTERAÇÕES LABORATORIAIS DOS LEUCÓCITOS E DIAGNÓSTICO LABORATORIAL DAS NEOPLASIAS HEMATOLÓGICAS Hematologia clínica Classificação e alterações morfológica dos leucócitos Leucograma Eosinófilos: Representam de 2-5% dos leucócitos totais e são facilmente identificados pelos grânulos acidófilos (vermelho/laranja), contendo o constituinte conhecido como proteína básica principal, tóxica para várias formas larvárias de parasitas. O núcleo apresenta de 2 a 3 núcleos e suas funções estão relacionadas à reposta alérgica e ao mecanismo de defesa contra infestação de parasitas. AULA 14: AULA PRÁTICA - ESTUDO DAS ALTERAÇÕES LABORATORIAIS DOS LEUCÓCITOS E DIAGNÓSTICO LABORATORIAL DAS NEOPLASIAS HEMATOLÓGICAS Hematologia clínica Leucograma Eosinófilos: Eosinofilia: 550/mm3 de sangue Causas: processos alérgicos, Síndrome de Leoffler, convalescência, dermatites, doenças hematológicas e parasitárias. Eosinopenia: 0/mm3 de sangue Causas: “stress”, infecções agudas, doenças endócrinas, anemias aplásicas e lúpus. Eosinofilia Classificação e alterações morfológica dos leucócitos AULA 14: AULA PRÁTICA - ESTUDO DAS ALTERAÇÕES LABORATORIAIS DOS LEUCÓCITOS E DIAGNÓSTICO LABORATORIAL DAS NEOPLASIAS HEMATOLÓGICAS Hematologia clínica Leucograma Basófilos: Representam menos do que 1% dos leucócitos totais e são identificados pela presença de grânulos azuis-escuros, contendo histamina, heparina entre outros constituintes. Estão relacionados à resposta imune inata a antígenos externos, bem como nos casos de asma e anafilaxia. Basofilia: 110/mm3 de sangue Causas: hipersensibilidade, Síndromes mieloproliferativas. Classificação e alterações morfológica dos leucócitos AULA 14: AULA PRÁTICA - ESTUDO DAS ALTERAÇÕES LABORATORIAIS DOS LEUCÓCITOS E DIAGNÓSTICO LABORATORIAL DAS NEOPLASIAS HEMATOLÓGICAS Hematologia clínica Leucograma Monócitos: Constituem de 5 a 8% dos leucócitos totais. O núcleo se apresenta na forma de “U”, com cromatina aparentemente reticular. Contam com a presença de grânulos lisossomais abundantes. O que confere aparência acinzentada. Os monócitos, quando atingem a corrente sanguínea, se tornam macrófagos teciduais com a função de remoção de “debris” e defesa contra determinados tipos de antígenos. Classificação e alterações morfológica dos leucócitos AULA 14: AULA PRÁTICA - ESTUDO DAS ALTERAÇÕES LABORATORIAIS DOS LEUCÓCITOS E DIAGNÓSTICO LABORATORIAL DAS NEOPLASIAS HEMATOLÓGICAS Hematologia clínica Classificação e alterações morfológica dos leucócitos Leucograma Monócitos: Monocitose: 1100/mm3 de sangue Causas: infecções virais, bacterianas, parasitárias e fúngicas; doenças granulomatosas e do colágeno; doenças neoplásicas. Monocitopenia: 160 /mm3 de sangue Tem significância clínica na aplasia, quando todos os elementos do sangue estão reduzidos. AULA 14: AULA PRÁTICA - ESTUDO DAS ALTERAÇÕES LABORATORIAIS DOS LEUCÓCITOS E DIAGNÓSTICO LABORATORIAL DAS NEOPLASIAS HEMATOLÓGICAS Hematologia clínica Classificação e alterações morfológica dos leucócitos Leucograma Linfócitos: É uma célula com formato ovalado ou arredondado, com núcleo em forma de rim ou arredondado bastante volumoso que ocupa quase toda célula. Os linfócitos são importantes na resposta imune adquirida. AULA 14: AULA PRÁTICA - ESTUDO DAS ALTERAÇÕES LABORATORIAIS DOS LEUCÓCITOS E DIAGNÓSTICO LABORATORIAL DAS NEOPLASIAS HEMATOLÓGICAS Hematologia clínica Classificação e alterações morfológica dos leucócitos Leucograma Linfócitos: É uma célula com formato ovalado ou arredondado, com núcleo em forma de rim ou arredondado bastante volumoso que ocupa quase toda a célula. Os linfócitos são importantes na resposta imune adquirida. Linfocitose: 3800/mm3 de sangue Causas: infecções agudas virais, convalescência de infecção bacteriana, processos infecciosos crônicos, toxoplasmose, leucemia linfocitária. Linfocitopenia: 1000 /mm3 de sangue Causas: infecção bacteriana aguda, uso de corticoides, neoplasias, uso de imunossupressores, imunodeficiência. AULA 14: AULA PRÁTICA - ESTUDO DAS ALTERAÇÕES LABORATORIAIS DOS LEUCÓCITOS E DIAGNÓSTICO LABORATORIAL DAS NEOPLASIAS HEMATOLÓGICAS Hematologia clínica Classificação e alterações morfológica dos leucócitos Leucograma Linfócitos: Atipia linfocitária Geralmente surgem pela interação de linfócitos T com células B portadoras de vírus. AULA 14: AULA PRÁTICA - ESTUDO DAS ALTERAÇÕES LABORATORIAIS DOS LEUCÓCITOS E DIAGNÓSTICO LABORATORIAL DAS NEOPLASIAS HEMATOLÓGICAS Hematologia clínica Avaliação laboratorial das leucemias Leucemias Agudas Diagnóstico Laboratorial geral Hemograma • Anemia, neutropenia e trombocitopenia; • Apresenta blastos em quantidade superior a 20% entre os leucócitos totais. Mielograma • Infiltração de blastos: superior a 30% (FAB) ou 20% (OMS). Citologia • Coloração citoquímica para identificação e diferenciação de mieloblastos e linfoblastos; • Provas citoquímicas: peroxidase, Sudan Black B, esterases inespecíficas, Ácido periódico de Schiff (PAS). AULA 14: AULA PRÁTICA - ESTUDO DAS ALTERAÇÕES LABORATORIAIS DOS LEUCÓCITOS E DIAGNÓSTICO LABORATORIAL DAS NEOPLASIAS HEMATOLÓGICAS Hematologia clínica Avaliação laboratorial das leucemias Leucemias Agudas Diagnóstico Laboratorial Geral Citologia COLORAÇÃO LMA LLA Ácido periódico de Schiff (PAS) - + Enzima nuclear (TdT) - + Peroxidase/mieloperoxi dade (MPO) + - Sudan Black B (SBB) + - Fosfatase alcalina dos neutrófilos (NAP) baixa normal AULA 14: AULA PRÁTICA - ESTUDO DAS ALTERAÇÕES LABORATORIAIS DOS LEUCÓCITOS E DIAGNÓSTICO LABORATORIAL DAS NEOPLASIAS HEMATOLÓGICAS Hematologia clínica Avaliação laboratorial das leucemias Leucemias Agudas Diagnóstico Laboratorial geral Imunofenotipagem por citometria de fluxo Visa identificar os antígenos (superfície, intracitoplasmáticos e nucleares) e caracterizar a origem e o nível de diferenciação das células leucêmicas. LINHAGEM MARCADORES Precursores hematopoéticos CD 34, HLA-DR, TdT e CD45 Linhagem B CD 10, CD 19, CD 20, CD 22, CD 79a Linhagem T CD 2, CD 3, CD 4, CD 5, CD 7 Linhagem mieloide CD 13, CD 33, CD 15, MPO, CD 117 Linhagem monocítica CD 14, CD 11c, CD 64 Linhagem eritroide CD 71 e glicoforina A Linhagem megacarioblástica CD 41 e CD 42 AULA 14: AULA PRÁTICA - ESTUDO DAS ALTERAÇÕES LABORATORIAIS DOS LEUCÓCITOS E DIAGNÓSTICO LABORATORIAL DAS NEOPLASIAS HEMATOLÓGICAS Hematologia clínica Avaliação laboratorial das leucemias Leucemias Crônicas Diagnóstico Laboratorial LLC Hemograma • Leucócitos: 30 a 200.000/mm3; • Raros linfócitos imaturos (pró-linfócitos e linfoblastos); • Presença de anemia, trombocitopenia e granulocitopenia. Mielograma • Presença de infiltração medular de linfócitos (40% das células); • Edema intersticial, necrose e hemorragias. Dosagem de Imunoglobulinas • Imunoglobulinemia, com aumento na produção de cadeia leve. Marcadores imunológicos • Diferenciação de linhagens B (SIg, CD 19, CD 24) e T ( CD 2 e CD 5). AULA 14: AULA PRÁTICA - ESTUDO DAS ALTERAÇÕES LABORATORIAIS DOS LEUCÓCITOS E DIAGNÓSTICO LABORATORIAL DAS NEOPLASIAS HEMATOLÓGICAS Hematologia clínica Avaliação laboratorial das leucemias Leucemias Crônicas Diagnóstico Laboratorial LLC Aspecto citológico de outras LLC AULA 14: AULA PRÁTICA - ESTUDO DAS ALTERAÇÕES LABORATORIAIS DOS LEUCÓCITOS E DIAGNÓSTICO LABORATORIAL DAS NEOPLASIAS HEMATOLÓGICAS Hematologia clínica Avaliação laboratorial das leucemias Leucemias Crônicas Diagnóstico Laboratorial LMC Hemograma • Hiperleucocitose: 50.000 a 200.000/mm3; • Desvio à esquerda sem ordem na maturação (pseudodesvio à esquerda); • Presença de neutrófilos e mielócitos, anemia e trombocitose; • Ausência de metamielócitos. Mielograma• Hiperplasia granulocítica (80% a 95%); • Número de pró-mielócitos e mielócitos inferior a 20%. • Fosfatase alcalina dos neutrófilos reduzida ou inexistente; • Elevação da vitamina B12 sérica; • Presença do cromossomo Filadélfia. • Presença do gene híbrido (bcr/abl – tirosina quinase). Cromossomo Filadélfia t(9;22) AULA 14: AULA PRÁTICA - ESTUDO DAS ALTERAÇÕES LABORATORIAIS DOS LEUCÓCITOS E DIAGNÓSTICO LABORATORIAL DAS NEOPLASIAS HEMATOLÓGICAS Hematologia clínica Bibliografia BAIN, B. J. Células Sanguíneas: Um guia Prático. 4. ed. Porto Alegre: Artmed, 2007. LORENZI, T. F.; DANIEL, M. M.; SILVEIRA, P. A. A.; BUCCHERI, V. Manual de Hematologia Propedêutica e clínica. 3. ed. São Paulo: Editora Medsi, 2003. NAOUM P. C.; NAOUM F. A. Interpretação Laboratorial do Hemograma. Disponível em: http://www.ciencianews.com.br/arquivos/ACET/IMAGENS/Artigos_cientificos/Interphemo.pdf. Acesso em 27 jul. 2017. AVANCE PARA FINALIZAR A APRESENTAÇÃO. VAMOS AOS PRÓXIMOS PASSOS? Hemostasia e coagulação do sangue; Gênese e função das plaquetas; Classificação dos distúrbios da hemostasia; Manifestações clínicas e os mecanismos envolvidos nos distúrbios da hemostasia; Principais doenças plaquetárias; Principais causas de trombocitopenia e trombocitose.
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