RESUMO ELETROFORESE

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ELETROFORESE 
A eletroforese é uma técnica baseada na 
separação de moléculas/partículas de uma 
amostra, a qual são dissolvidas ou suspensa 
em um eletrólito sob uma malha, através do 
qual uma corrente elétrica é aplicada. 
Esta técnica consiste na migração de 
moléculas ionizadas, em solução, de acordo 
com suas cargas elétricas e pesos 
moleculares em campo elétrico. 
Moléculas com CARGA NEGATIVA (-) migram 
para o POLO POSITIVO (+) – ÂNODO 
Moléculas com CARGA POSITIVA (+) migram 
para o POLO NEGATIVO (-) – CÁTODO 
GEL DE AGAROSE 
Feito de polímeros de polipeptídios, a agarose 
é composta por ágar e pectina, que juntas 
conseguem fazer uma malha do tipo peneira. 
Após preparo do gel, adiciona-se brometo de 
etídio (corante fluorófilo com alta afinidade 
por DNA, porém de alto risco à vida por ser 
carcinógeno) que se intercala na dupla hélice 
de DNA possibilitando a visualização dos 
fragmentos quando em exposição a luz UV. 
 
 
PONTOS IMPORTANTES QUE INFLUENCIAM 
NA EFICÁCIA EM GEL DE AGAROSE 
 O tamanho do fragmento de DNA, 
pois quanto maior for, mais retida 
ficará; 
 A concentração do gel de agarose, 
pois quanto mais concentrado 
estiver, mais moléculas irá reter; 
 A corrente elétrica aplicada, pois 
quanto mais corrente for aplicada, 
mais rápido será a separação das 
moléculas; 
 O tipo de tampão, pois o tipo do 
tampão utilizado pode afetar ou 
beneficiar a velocidade da partícula 
no gel. 
Separar as moléculas de proteínas ou ácidos 
nucleicos (DNA e RNA possuem carga elétrica 
negativa, logo, migram para o polo positivo e 
quanto menores forem as moléculas, mais 
migrarão) de acordo com o seu peso 
molecular.
 
 
 
 
 
 
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GEL DE POLIACRILAMIDA 
Feito de uma mistura de dois polímeros, 
acrilamida e bisacrilamida, o gel de 
poliacrilamida possui a capacidade de separar 
fragmentos muito pequenos de DNA e 
também separar proteínas. Porém, o gel de 
agarose é o mais utilizado pois, o gel de 
poliacrilamida é neurotóxico e cancerígeno. A 
eletroforese em gel de poliacrilamida é 
geralmente feita em cubas verticais. 
 
 
 Visualizador de fragmentos; 
 Marcador de peso molecular.