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8 Sumário Introdução 3 Objetivo Geral 5 Amostra, materiais e equipamentos 5 Procedimento 6 Resultados e discussões 7 Conclusão 8 Referências 8 1. Introdução A levedura são seres unicelulares, ou seja, possuem uma única célula. Isto faz com que sejam reproduzidas rapidamente. São bem maiores que a maioria das bactérias, porém não são visíveis a olho nu. As leveduras vivem em açucarados de plantas e no néctar das flores.1 Esta levedura tem morfologia redonda e sua reprodução é do tipo Gemação de Novas Células, neste processo de reprodução ocorre à formação de pequenas protuberâncias na superfície da célula que depois se desenvolvem, e se desprendem, passando a ter vida própria.1 Em nossa experiência em laboratório, utilizamos a levedura de gênero Saccharomyces. A Saccharomyces é utilizada na panificação, na cervejaria, na vinícola, na área farmacêutica como produção de vitaminas do complexo B, na fabricação do etanol, fabricação de ácido cítrico e em fermentação em geral.2 No caso dos fermentos, existem dois tipos: fermento fresco e o fermento liofilizado. O fermento fresco é úmido, e isso faz com que haja a reprodução das células. Para evitar que o fermento fresco comece as atividades antes do previsto é mantido em baixa temperatura. O fermento liofilizado possui baixa umidade e com isso pode ser mantido em temperatura ambiente que não perde suas propriedades.3 Na fermentação alcoólica, as leveduras fermentam açucares, produzindo álcool etílico e gás carbônico (CO2), no caso de bebidas alcoólicas, outros componentes também são acrescentados na formulação como por exemplo o malte.2 A destilação alcoólica é utilizada para efetuar a separação do álcool com a água. É utilizado um destilador que consiste em aquecer o liquido até a evaporação seguida pela condensação. Neste caso como o ponto de ebulição do álcool é menor que o da água, ele acaba sendo evaporado primeiramente. É muito importante que se mantenha a temperatura sempre à cerca de 78ºC, para que apenas o álcool seja destilado. 3 O Brix é uma escala numérica que mede a quantidade de sólidos solúveis em uma solução de sacarose. Ele mede a pureza do caldo extraído na moagem da cana-de-açúcar. A quantidade de compostos solúveis corresponde ao total de todos os compostos dissolvidos em água, começando com açúcar, sal, proteínas, ácidos e etc e os valores de leitura medido é a soma de todos eles. Um grau Brix (1°Bx) é igual a 1g de açúcar por 100 g de solução, ou 1% de açúcar. O instrumento usado para medir a concentração de soluções aquosas é o refratômetro.4 Este relatório relata as atividades desenvolvidas em laboratório nas práticas descritas abaixo. 2. Objetivo geral · Determinar o teor alcoólico em uma amostra de mosto de cana-de-açúcar e verificar a estrutura celular da saccharomyces cerevisiae 2.1. Objetivo específico · Destilar o mosto utilizando o equipamento de destilação simples. · Determinar o teor alcoólico do destilado utilizando o alcoômetro. · Observar a estrutura celular da saccharomyces cerevisiae via microscópio. 3. Amostra, materiais e equipamentos. 3.1. Amostra · Mosto de melaço de cana-de-açúcar entre 12 a 20 % Brix · Fermento biológico seco instantâneo · Fermento biológico fresco 3.2. Materiais e equipamentos · Balao de destilação · Béquer · Proveta · Destilador simples · Pérolas de vidro · Termômetro · Funil de vidro · Alcoômetro Gay Lussac · Suporte universal · Refratômetro portátil %Brix · Manta de aquecimento · Microscópio óptico · Lâmina e lamínula de vidro · Pipeta de pasteur 4. Procedimento 4.1. Procedimento da destilação do álcool através do mosto de cana-de-açúcar · Em um balão de destilação sobre uma manta de aquecimento, foi colocada uma pequena quantidade de pérolas de vidro. · Filtrar com algodão e transferir para o balão de destilação aproximadamente 250 mL de melaço de cana. · Instalar no balão de destilação o termômetro para o controle de temperatura, e o condensador com ajuda do suporte universal, para o início da destilação. · Em baixo do condensador, colocar um béquer para a coleta do álcool destilado. · Ligue a manta de aquecimento e controle a temperatura entre 70-80°C · Recolher aproximadamente 50 mL do destilado. · Depois de realizado a destilação, realizar a leitura no alcoômetro para medir o grau alcoólico. 4.2. Procedimento para observar a estrutura celular no microscópio Para a realização deste procedimento, foram utilizados dois tipos de fermento biológico o seco e fresco. · Pegar com o auxílio de uma espátula uma pequena quantidade de fermento e diluir completamente em água destilada. · Com uma pipeta de pasteur descartável , acrescentar na lâmina de vidro uma gota do fermento diluído em água. · Com cuidado cubra a lâmina com a lamínula e tire o excesso da solução com um lenço de papel. · Leve a lâmina ao microscópio e observe as leveduras em 40x no microscópio. 5. Resultados e discussões Os resultados de teor de álcool obtido na destilação alcoólica foi de 2 °GL. Para se medir este teor foram misturadas duas alíquotas de 50 mL de destilados diferentes, sendo uma de cada grupo. A amostra de 100 mL do destilado tem 2% em volume de álcool e 98% em volume de água. A observação microscopia foi realizada utilizando o fermento seco e o fresco e foi possível observar as células de saccharomyces cerevisiae, sendo que na cultura observada de fermento seco era notada visualmente pela lente do microscópio uma maior quantidade de células e mais próximas entre si. Figura 01: Foto retirada da observação microscópica do fermento fresco. 6. Conclusão Conclui-se que o melaço de cana adicionado da levedura sofreu fermentação pois foi possível obter álcool após a destilação do mesmo, o teor de álcool obtido foi de 2°GL ( graus Gay-Lussac) e poderia ter sido maior porém o volume de destilado recolhido foi pequeno devido ao tempo disponível da aula prática, considerando que este teor de 2°GL e referente a mistura de duas alíquotas diferentes de 50 mL cada e que um dessas alíquotas o teor de álcool antes de medido era de 0 °GL. Na observação das células de leveduras pode-se visualiza-las tanto no fermento seco quanto no fresco, lembrando que no fermento seco passa por um processo de liofilização que é uma desidratação do interior da célula. O fermento seco está em uma condição na qual a sua membrana celular é altamente permeável e não consegue ainda selecionar o que pode ou não entrar na célula antes de sua hidratação. 7. Referências 1Martinez, M. Levedura, disponível em: www.infoescola.com/reino-fungi/levedura, acesso em 07 junho 2015 2Alves, L. Destilação e fermentação na produção de bebidas, publicado disponível em: www.brasilescola.com/quimica/destilacao-fermentacao-na-producao-bebidas.htm, acesso em 07 junho 2015 3Fermento, disponível em www.zeelandia.com.br/ProdPanificacao.aspx acesso em 07 junho 2015 4 Brix, disponível em http://pt.wikipedia.org/wiki/Brix acesso em 07 junho 2015