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ROTEIRO DE QUESTÕES SOBRE AS PRÁTICAS 1) Quais as funções dos seguintes aparelhos utilizados na rotina de laboratório de bioquímica: phmetro, espectrofotômetro e capela. RESPOSTA: PHMETRO: É um aparelho usado para medição de PH. O aparelho é calibrado (ajustado) de acordo com os valore s referenciados em todas as soluções de calibração. Uma vez calibrado estará pronto para uso. A leitura do aparelho é feita em função da leitura da tensão (usualmente em milivolts) que o eletrodo gera quando submerso na amostra. A intensidade da tensão medida é convertida para uma escala de PH. O aparelho faz essa conversão, tendo como uma escala usual de 0 a 14 PH. ESPECTROFOTÔMETRO: É um aparelho amplamente utilizado em laboratórios, cuja função é a de medir e comparar a quantidade de luz (energia radiante) absorvida por uma determinada solução. Ou seja, ele é usado para medir (identificar e determinar) a concentração de substâncias, que absorvem energia radiante, em um solvente. Muitas reações químicas e enzimáticas mudam de cor ao longo do tempo, e os espectrofotômetros são muito úteis para medir essas mudanças. CAPELA: É uma construção dentro do laboratório onde são processadas análises com substâncias tóxicas ou substâncias que por intermédio de reação química, a principal função Exaurir vapores, gases e fumos, mas serve também, como uma barreira física entre as reações químicas e o ambiente de laboratório, oferecendo assim uma proteção aos usuários e ao ambiente contra a exposição de gases nocivos, tóxicos, derramamento de produtos químicos e fogo. 2) A reação da ninidrina é a uma reação de identificação de grupos funcionais de aminoácidos. Explique por que houve a formação da “Púrpura de Rühemann” na solução de triptofano e não na solução de prolina. RESPOSTA: A ninidrina reage com os grupos amina livres dos aminoácidos. Essa reação forma um composto de coloração roxa-azulada, a "púrpura de Rüehemann". Isso acontece com a maioria dos aminoácidos, como o tritofano, que possuem aminas livres em sua cadeia. No entanto, a prolina não possui nenhum grupo amina livre: o nitrogênio, neste caso, faz parte de um anel na molécula, e a ninidrina não consegue reagir com ele. 3) A reação de Molisch é utilizada para pesquisa de carboidratos em geral. Explique por que há a formação de um anel roxo (lilás) no tubo de ensaio contendo glicose. RESPOSTA: Este experimento é realizado a partir da exposição de uma solução de glicose (carboidrato simples) a um processo de desidratação por ácido forte, neste caso ácido sulfúrico apart ir dessa reação obtem- se uma substância chamada de hidroximetilfurfura l, porém o produto desta reação é transparente, portanto a olho nu, não é possível identificar se a reação de fato ocorreu não sendo possível identificar a presença do carboidrato. Para que haja uma coloração na solução o hidroximetilfurfura l formado, é submetido a uma solução de alfa – naftol (reagente de Molisch) dessa forma ocorre a formação do complexo violeta, que é um anel de coloração roxa que se forma indicando a presença de carboidrato. 4) Na aula prática sobre fermentação notou-se que no kitassato que continha glicose misturada à solução de fermento houve produção de algum gás. A formação desse gás resultou na alteração de cor da solução do erlemeyer. Justifique o porquê dessa alteração de cor considerando os produtos formados durante a fermentação. RESPOSTA: Na solução utilizada onde houve esta reação de alteração de cor, a mesma foi formada por água, fermento e açúcar, dessa forma, o açúcar agiu como substrato para a levedura (fermento) no outro erlemeyer não ocorreu reação, pois em sua solução foi utilizado somente agua e fermento. A diferença na coloração das soluções ocorreu, pois, o azul de bromotimol utilizado em ambas tem a capacidade de indicar se uma solução é neutra (ficando com a coloração verde) e quando a solução é ácida (coloração amarela). Portanto através da solução de fermento com açúcar a levedura realizou o processo de fermentação, produzindo dessa forma etanol e dióxido de carbono, o CO2 passou pela mangueira e realizou uma reação formando bolhas na solução que se encontrava no erlemeyer baixando dessa forma na solução. A junção do CO2 com a água forma o ácido carbônico, esse ácido realiza a diminuição do pH, ficando a solução com coloração amarelada, desta forma através deste experimento conseguimos ver o processo de fermentação alcoólica acontecendo.
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