Amostragem_Análise de Sementes

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UNIVERSIDADE FEDERAL DA PARAÍBA
CENTRO DE CIÊNCIAS AGRÁRIAS
PROGRAMA DE PÓS-GRADUAÇÃO EM AGRONOMIA
DEPARTAMENTO DE FITOTECNIA E CIÊNCIAS AMBIENTAIS
DISCIPLINA: ANÁLISE DE SEMENTES
AMOSTRAGEM
Discente: Angelita Lima da Silva
Docentes: Profª Edna Ursulino Alves
 Profª Riselane de Lucena A. Bruno
Areia/PB-2020
Obter uma amostra de tamanho adequado para os testes, na qual estejam presentes os mesmos componentes do lote de sementes e em proporções semelhantes.
OBJETIVO
Fonte: ufla.br
Fonte: embrapa.br
OBJETIVO
A quantidade de sementes analisadas é, em geral, muito pequena em relação ao tamanho do lote que representa;
É essencial que as amostras sejam tomadas com todo cuidado e em conformidade com os métodos estabelecidos nas presentes Regras para Análise de Sementes – RAS;
Fonte: pt.dreamstime.com
Fonte: pt.dreamstime.com
Fonte: udesc.br
DEFINIÇÕES
Fonte: pressworks.com.br
Lote
É uma quantidade definida de sementes;
Identificada por letra, número ou combinação dos dois.
Nele, cada porção é, dentro de tolerâncias permitidas, homogênea e uniforme para as informações contidas na identificação.
AMOSTRAS
Amostra Simples: É uma pequena porção de sementes retirada de um ponto do lote;
Amostra Composta: É a amostra formada pela combinação e mistura de todas as amostras simples retiradas do lote. 
Fonte: diariodebalsas.com.br
Fonte: embrapa.br
DEFINIÇÕES
Amostras
Amostra Média: É a própria amostra composta ou subamostra desta, com tamanho mínimo especificado nestas Regras para Análise de Sementes. É a recebida pelo laboratório para ser submetida à análise. 
Amostra Duplicata: É a amostra obtida da amostra composta e nas mesmas condições da amostra média e identificada como “Amostra Duplicata”. 
DEFINIÇÕES
Amostra de Trabalho: É a amostra obtida no laboratório, por homogeneização e redução da amostra média até os pesos mínimos requeridos e nunca inferiores aos estabelecidos na RAS. 
Subamostra: É a porção de uma amostra obtida pela redução da amostra de trabalho.
Amostras
PREPARAÇÃO DO LOTE DE SEMENTES E CONDIÇÕES PARA AMOSTRAGEM
Os pesos mínimos das amostras médias estão especificados na RAS.
O tamanho da amostra de trabalho deverá seguir o estabelecido na RAS, e para espécies não contempladas, a amostra deve conter no mínimo 25.000 sementes.
No caso da amostra ser menor do que a prescrita, o amostrador deve ser notificado e a análise suspensa até que sementes suficientes sejam recebidas em uma nova amostra média.
Exceção para o caso de sementes muito caras, cuja análise pode ser completada tanto quanto possível e a seguinte declaração deve ser inserida no certificado: A amostra média pesou apenas... gramas e não está de acordo com a RAS.
O peso máximo do lote não deve exceder ao indicado na RAS. 
PREPARAÇÃO DO LOTE DE SEMENTES E CONDIÇÕES PARA AMOSTRAGEM
	Espécie	Peso máximo do lote	Amostra média	Amostra de trabalho para análise de pureza	Amostra de trabalho para determinação do número de outras sementes
		kg	g	g	g
	Allium cepa L.	10.000	80	8	80
	Avena sativa L.	30.000	1.000	120	1.000
	Brachiaria decumbens Stapf	10.000	200	10	100
	Phaseolus vulgaris L.	30.000	1.000	700	1.000
	Zea mays L.	40.000	1.000	900	1.000
QUADRO 1 – Pesos máximos dos lotes, pesos mínimos das amostras médias, das amostras de trabalho para análise de pureza e determinação do número de outras sementes. 
Fonte: Regras para Análise de Sementes, 2009.
OBTENÇÃO DE AMOSTRAS REPRESENTATIVAS
A amostragem para um certificado internacional deve ser executada por pessoas treinadas, reconhecidas individualmente pelo LAS. 
Durante a amostragem, o proprietário do lote de sementes deve fornecer todos os dados para complementar a identificação do mesmo e dispô-lo de modo que cada recipiente ou local do lote possa ser amostrado. 
No caso do proprietário solicitar amostras extras para guardar, as mesmas serão retiradas por ocasião da amostragem oficial, sendo lacradas e assinaladas com a palavra Duplicata.
As amostras simples devem ser retiradas do lote por meio de amostradores, que são instrumentos apropriados.
OBTENÇÃO DE AMOSTRAS REPRESENTATIVAS
No caso de sementes que não deslizam facilmente, como certas gramíneas palhentas, a amostragem deve ser preferivelmente, feita à mão. À exceção deste caso, devem ser usados instrumentos apropriados de amostragem.
Quando o lote está em recipientes (incluindo sacos), esses ao serem amostrados, devem ser selecionados ao acaso e amostras simples devem ser retiradas da parte superior, mediana e inferior dos recipientes, mas não necessariamente de mais de uma posição do mesmo recipiente.
Em lotes de sementes a serem embalados em recipientes pequenos (sacos de papel, polietileno, latas), é preferível que a amostragem seja realizada antes da embalagem das sementes.
Para sementes já acondicionadas, um número suficiente de recipientes deve ser aberto, amostrado e novamente fechado.
INSTRUMENTOS DE AMOSTRAGEM E MÉTODOS PARA AMOSTRAGEM DOS LOTES
Caladores ou Amostradores do Tipo Duplo
Caladores do Tipo Simples – Amostrador Nobbe
Fonte: SOUZA, G. F. M. V. 2017.
Fonte: eagri.com.br
INSTRUMENTOS DE AMOSTRAGEM E MÉTODOS PARA AMOSTRAGEM DOS LOTES
Caladores ou Amostradores do Tipo Duplo
Consiste em dois cilindros ocos de metal que se ajustam perfeitamente um dentro do outro, com uma extremidade sólida e afiada, providos de aberturas ou janelas iguais que podem ser justapostas, por meio da rotação do cilindro interno;
Possuem de 5 a 9 aberturas;
O amostrador deve ser inserido diagonalmente na massa de sementes, num ângulo de 30° na posição fechada, isto é, com as aberturas dos cilindros desencontradas e, uma vez aberto, deve ser girado algumas vezes até que fique completamente cheio de sementes;
Em seguida, deve ser fechado e retirado do saco, despejando-se as sementes em recipiente apropriado. 
INSTRUMENTOS DE AMOSTRAGEM E MÉTODOS PARA AMOSTRAGEM DOS LOTES
Caladores ou Amostradores do Tipo Simples – Amostrador Nobbe
Consiste em um cilindro afilado, suficiente longo para alcançar o centro da embalagem, com uma abertura oval próxima à extremidade afilada e com um cabo perfurado por onde as sementes são descarregadas;
O calador deve ser cuidadosamente inserido até o centro do saco com a abertura voltada para baixo e a ponta para cima, formando com a horizontal um ângulo de 30°. Gira-se o calador em 180°, ficando a abertura voltada para cima; retira-se o calador com velocidade cada vez menor a fim de que a quantidade de sementes coletadas durante seu percurso aumente progressivamente do centro para a periferia do saco. Quando o calador atingir toda a extensão do saco, deverá ser retirado com velocidade relativamente constante e agitado suavemente para que seja mantida uma corrente uniforme de sementes
INSTRUMENTOS DE AMOSTRAGEM E MÉTODOS PARA AMOSTRAGEM DOS LOTES
Amostragem durante o beneficiamento
Amostragem manual
Durante o beneficiamento de um lote, as amostras deverão ser coletadas em intervalos regulares durante todo o processo. Quando for usado um recipiente que intercepte o fluxo da semente, toda a seção transversal da corrente de sementes deve ser uniformemente amostrada. O recipiente pode ser movimentado manual ou mecanicamente através da corrente de sementes
Fonte: ufla,br
As espécies de sementes que não deslizam com facilidade, como as gramíneas palhentas, algodão com linter, amendoim com casca, lomentos de Stylozanthes e algumas sementes de espécies arbóreas, devem ser amostradas manualmente.
Fonte: icofort.com.br
INTENSIDADE DA AMOSTRAGEM
QUADRO 2: Lotes de sementes acondicionadas em recipientes com capacidade de até 100kg.
	Nº de recipientes do lote	Número de amostras simples
	1 – 4	3 amostras simples de cada recipiente
	5 – 8	2 amostras simples de cada recipiente
	9 – 15	1 amostra simples de cada recipiente
	16 – 30	15 amostras simples no total
	31 – 59	20 amostras simples no total
	60 ou mais	30 amostras simples no total
Fonte: Regras para Análise de Sementes, 2009.
INTENSIDADE DA AMOSTRAGEM
QUADRO 3: Lotes de sementes acondicionadasem recipientes com capacidade de mais de 100kg ou amostragem durante o beneficiamento.
	Tamanho do lote	Número de amostras simples
	Até 500kg	Pelo menos 5 amostras simples
	501 – 3.000kg	1 amostra simples para cada 300kg, mas não menos do que 5
	3.001 – 20.000kg	1 amostra simples para cada 500kg, mas não menos do que 10
	Acima de 20.000kg	1 amostra simples para cada 700kg, mas não menos do que 40
Fonte: Regras para Análise de Sementes, 2009.
INTENSIDADE DA AMOSTRAGEM
Um peso de 100 quilos de sementes é tomado como unidade básica e os pequenos recipientes são combinados, de maneira a formar essas unidades de amostragem e não excedendo este peso.
A amostragem realizada nas unidades básicas deve ser feita tomando-se recipientes inteiros e fechados.
Em pequenos recipientes
Fonte: gruposentax.com.br
Fonte: sementescaicara.com
OBTENÇÃO DAS AMOSTRAS DE TRABALHO
A amostra média, ao chegar ao LAS, deve ser protocolada e homogeneizada, pois durante o transporte poderá sofrer uma estratificação. Deve ser reduzida a uma ou mais amostras de trabalho (de acordo com os testes a serem realizados), de peso igual ou ligeiramente maior que os estipulados nas RAS;
Quando for requerida uma duplicata da amostra, essa deve ser retirada independentemente, isto é, depois de retiradas as amostras de trabalho;
As sementes restantes da amostra média constituirão a amostra de arquivo e devem ser armazenadas prontamente em locais apropriados, à prova de umidade e calor;
Na redução da amostra média, são utilizados métodos mecânicos e manuais.
Método mecânico
 Divisor cônico (Boemer)
 Divisor centrífugo (Gamet)
 Divisor de solo
Método manual
 Método modificado da separação ao meio
 Método da colher
 Método manual da separação ao meio
OBTENÇÃO DAS AMOSTRAS DE TRABALHO
Equipamentos e métodos de divisão e seu uso
Método mecânico
Adequado para todas as sementes que deslizam com facilidade.
Independente do equipamento utilizado, o cuidado com sua limpeza interna é fundamental antes de cada operação;
O uso de divisores mecânicos elimina o efeito da ação do analista no resultado da homogeneização e redução;
A amostra média deve ser passada no mínimo duas vezes pelo divisor para ser homogeneizada e recomposta antes da divisão propriamente dita, que é realizada por meio de repetidas passagens das sementes pelo divisor, removendo-se a cada vez metade da porção;
O processo de divisões sucessivas é repetido até que se obtenha a amostra de trabalho de peso aproximado, mas nunca inferior ao exigido para a espécie.
Fonte: humidimetros.com
Fonte: comagequipamentos.com
Fonte: dicalab.com.br
Divisor de solo
Método mecânico
Divisor cônico (Boemer)
Divisor centrífugo (Gamet)
MÉTODO MANUAL
A amostra do lote de verá ser colocada sobre uma superfície limpa e lisa, manualmente homogeneizada, amontoada e dividida ao meio com o auxílio de uma régua ou objeto semelhante.
Desprezando-se uma das metades, repete-se com a outra metade as mesmas operações anteriores, até que seja obtida uma amostra de trabalho com peso igual ou ligeiramente superior ao prescrito como mínimo.
Ao separar as duas porções resultantes de cada divisão, é imprescindível que todo material presente, inclusive o constituído de pequenas partículas como terra e pedra, que normalmente se acumulam na parte inferior da amostra, seja também dividido e incluído em cada metade.
Método das divisões sucessivas
EMBALAGEM, IDENTIFICAÇÃO, SELAGEM E REMESSA DA AMOSTRA
O tipo de embalagem para a remessa das amostras médias ao LAS deve ser de material resistente, pra que não se rompa durante o transporte e deve proteger as sementes contra o calor, umidade ou contaminação por doenças e pragas;
Cada amostra deve ser identificada de maneira que se possa estabelecer sua conexão com o respectivo lote;
Amostras destinadas ao teste de germinação devem estar acondicionadas em embalagens permeáveis;
EMBALAGEM, IDENTIFICAÇÃO, SELAGEM E REMESSA DA AMOSTRA
No caso de ser solicitada a determinação do grau de umidade, as amostras devem ser remetidas separadamente, em embalagens impermeáveis e hermeticamente fechadas;
O órgão responsável pela coleta das amostras deve enviá-las sem demora ao LAS e, no caso de amostras oficiais, essas não devem ser deixadas aos cuidados de pessoas não autorizadas;
Se as sementes forem tratadas quimicamente, devem ser fornecidos junto com a amostra, o nome do produto, do ingrediente ativo e a dosagem utilizada.
MÉTODO MANUAL
É um método restrito às sementes palhentas, com ganchos, espinhos ou alas, exceto se essas estruturas também tenham sido removidas durante o beneficiamento.
Método das divisões constantes
Procedimento: 
1- A amostra média do lote é colocada sobre uma superfície limpa e lisa; 
2- A seguir, homogeneizar com as mãos ou com o auxílio de uma espátula, formando um amontoado. 
3- O amontoado é dividido ao meio, sendo cada metade novamente dividida, resultando em quatro porções aproximadamente iguais. Cada uma destas é dividida, resultando em oito porções, as quais devem ser dispostas em duas fileiras de quatro; 
4- A primeira e a terceira porção da primeira fileira são combinadas com a segunda e quarta da segunda fileira, sendo as demais removidas; 
5- Os itens 2, 3 e 4 são repetidos utilizando as porções retidas do item 4, tantas vezes quantas forem necessárias, até que seja obtida a amostra de trabalho com peso igual ou ligeiramente superior ao prescrito para a espécie.
MÉTODO MANUAL
É recomendado para redução de amostras de sementes para teste de sanidade.
Para outros testes, é restrito apenas para amostras de sementes menores do que as de trigo.
Método da colher
Procedimento:
Utiliza-se uma bandeja, uma espátula e uma colher com uma borda reta;
Após uma mistura preliminar, as sementes deverão ser despejadas uniformemente sobre a bandeja;
Com o uso da espátula e da colher, deverão ser removidas pequenas porções da semente de pelo menos cinco lugares escolhidos aleatoriamente na bandeja;
Porções suficientes da semente serão tomadas para comporem a amostra de trabalho.
ARMAZENAMENTO DAS SEMENTES
A análise da amostra deve ser iniciada no dia do seu recebimento ou reduzir ao máximo o tempo entre a amostragem e a análise;
A amostra média pode ser conservada, caso necessário, durante algum tempo antes da análise;
Deve ser armazenada em local preferencialmente climatizado, de tal maneira que as alterações na qualidade da semente, como dormência, grau de umidade e porcentagem de germinação sejam as mínimas possíveis.
Antes da análise
ARMAZENAMENTO DAS SEMENTES
Uma vez retiradas as amostras de trabalho para as diversas determinações, as sementes restantes da amostra média são colocadas em recipientes apropriados e irão constituir a amostra de arquivo;
A amostra de arquivo, juntamente com todas as sobras de sementes resultantes da análise de pureza ou de qualquer outra determinação, deverão ser armazenadas em separado, por um período equivalente ao da validade do teste de germinação.
As amostras devem ser armazenadas em locais adequados, de acordo com a espécie, com controle de temperatura e de umidade relativa.
Depois da análise
PESO DOS LOTES E DAS AMOSTRAS PARA ANÁLISES
	Espécie	Peso máximo do lote	Amostra média	Amostra de trabalho para análise de pureza	Amostra de trabalho para determinação do número de outras sementes
		kg	g	g	g
	Aeschynomene villosa Poir.	10.000	70	-	-
	Avena nuda L.	30.000	1.000	120	1.000
	Brassica napus L.	10.000	100	10	100
	Calendula officinalis L.	5.000	80	20	-
	Eucalyptus citriodora Hook.	1.000	40	15	-
QUADRO 4 – Pesos máximos dos lotes, pesos mínimos das amostras médias, das amostras de trabalho para análise de pureza e determinação do número de outras sementes. 
Fonte: Regras para Análise de Sementes, 2009.
TESTE DE HETEROGENEIDADE PARA LOTES DE SEMENTES ACONDICIONADAS EM RECIPIENTES
Tem o objetivo de determinar se a homogeneidade do lote é tecnicamente aceitável para a amostragemcom base em dois teste estatísticos:
Teste do valor H
Teste do valor R
TESTE DE HETEROGENEIDADE PARA LOTES DE SEMENTES ACONDICIONADAS EM RECIPIENTES
Heterogeneidade dentro da amplitude
Heterogeneidade fora da amplitude
Quando a heterogeneidade dentro de um lote de sementes ocorre devido a distribuição desigual, embora contínua, nas porcentagens dos componentes da análise de pureza, nas porcentagens dos testes de germinação, etc.
Quando a heterogeneidade dentro de um lote de sementes ocorre devido a uma distribuição descontínua do atributo avaliado, excedendo os limites razoáveis tolerados.
Avaliada pelo teste do valor H
Avaliada pelo teste do valor R
TESTE DE HETEROGENEIDADE PARA LOTES DE SEMENTES ACONDICIONADAS EM RECIPIENTES
Comparação entre a variância observada entre amostras independentes de tamanho similar, retiradas de diferentes recipientes e variância aceitável, calculada considerando a distribuição ao acaso dos componentes;
 
Comparação entre a diferença máxima encontrada entre essas mesmas amostras com um desvio padrão aceitável.
Teste do valor R
Teste do valor H
A heterogeneidade do lote pode ser avaliada pela: 
TESTE DE HETEROGENEIDADE PARA LOTES DE SEMENTES ACONDICIONADAS EM RECIPIENTES
Interpretação dos resultados
Se um dos dois testes indicar heterogeneidade significativa, o lote deve ser declarado heterogêneo.
Quando nenhum dos dois testes indicar heterogeneidade significativa, então o lote deve ser considerado como não heterogêneo, apresentando um nível não significativo de heterogeneidade.
OBRIGADA!
Fonte: aminoagro.agr.br