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CENTRO UNIVERSITÁRIO REGIONAL DO BRASIL CURSO: Biomedicina DISCIPLINA: Análises de Líquidos Corporais ALUNO (A): Lydia Alves Lima Santos DATA: 12/07/2020 SEMESTRE: 8º AVALIAÇÃO AV2 Resumo sobre o artigo Assessment of cytological and biochemical parameters stability in cerebrospinal fluid – Avaliação da estabilidade de parâmetros citológicos e bioquímicos do liquor. Erros na fase pré-analítica podem explicar os resultados que levam a testes clinicolaboratoriais desnecessários, induzindo decisões clínicas inadequadas, trazendo danos aos pacientes e aumentando os custos. Isso justifica uma maior conscientização sobre a importância e a necessidade de um gerenciamento mais preciso nesta etapa do ciclo de testes laboratoriais. A sistematização e o monitoramento dessas variáveis caracterizam laboratórios organizados e eficientes, que primam pela qualidade dos serviços e se esforçam por melhorar a segurança dos seus pacientes. Na prática, o uso de laboratórios de referência tornou-se rotina para exames especializados e de baixa demanda, realizados em diversos materiais, como o líquido cefalorraquidiano (LCR). O transporte para essa finalidade depende de vários tipos de logística e segue parâmetros bem definidos para acondicionamento das amostras. Esse cuidado visa assegurar que os resultados obtidos nessas amostras sejam comparáveis com aqueles resultantes de dosagens efetuadas imediatamente após a coleta, sem que haja comprometimento de sua qualidade. O líquido cefalorraquidiano (LCR) é um fluido corporal dinâmico que é amplamente utilizado no diagnóstico de muitas doenças tumorais ou inflamatórias, infecciosas, vasculares e degenerativas. Vários parâmetros do LCR, como proteínas, glicose, lactato, glóbulos brancos e vermelhos, entre outros, são medidos rotineiramente e seus padrões podem sugerir a presença de um processo patológico específico. O objetivo deste estúdio é avaliar a estabilidade, em 12 horas, dos parâmetros citológicos e bioquímicos do líquido cefalorraquídeo (LCR). O LCR é geralmente obtido por punção lombar (LP), coletada em tubos apropriados. Após a coleta do LCR, os tubos são transportados para o laboratório e há um período de tempo variável para a análise do LCR. Esse período de tempo é determinado por fatores, como a distância entre o hospital e o laboratório de análise. Também é possível que as amostras sejam coletadas em locais onde não há laboratório especializado, e as amostras precisam ser enviadas para um laboratório. Considerando o período de tempo entre a coleta e a análise do LCR, é importante conhecer a estabilidade dos componentes do LCR para entender como isso afeta a interpretação clínica dos resultados do LCR. MÉTODOS Foi realizada buscas referente no artigo disponibilizado para discente para fins de busca sobre os principais pontos abordados dentro dele. Foi vista também e citado no texto que todas as amostras de LCR incluídas no presente estudo foram obtidas para fins clínicos. Os médicos do Senne Liquor Diagnóstico realizaram as punções lombares. O tempo entre a retirada do LCR e a análise inicial levou até 2 horas. As amostras de LCR foram armazenadas em temperatura ambiente a 17ºC durante as análises. Realiza a análise de variância (ANOVA) dos resultados e a comparação da interpretação clínica nos diferentes tempos. Análises de glóbulos brancos e vermelhos Quinze amostras de LCR coletadas submetidos à LP foram utilizadas para análise de estabilidade de glóbulos brancos e vermelhos. Todas essas amostras de LCR foram enviadas para a unidade principal do Laboratório Senne Liquor Diagnóstico. Essas amostras foram divididas em alíquotas em cinco tubos diferentes que foram analisados em cinco tempos de espera diferentes: T0, T1 (2 horas), T2 (4 horas), T3 (6 horas) e T4 (12 horas). Todos os tubos foram armazenados à temperatura ambiente. Todas essas amostras apresentaram inicialmente, no mínimo, 20 leucócitos / mm 3. O total de leucócitos e glóbulos vermelhos foi contado em uma câmara de contagem de Fuchs- Rosenthal e a contagem diferencial de células foi realizada após sedimentação e coloração( 7 ) . As amostras de menos do que 100 leucócitos / mm 3 foram centrifugados a 1000 rpm durante 5 minutos. O mesmo procedimento foi realizado em todas as cinco alíquotas. Analisamos a variação do total de leucócitos, neutrófilos, linfócitos e contagem de glóbulos vermelhos, bem como a proporção de neutrófilos / linfócitos. A pleocitose no LCR foi classificada como leve (20-50 células / mm 3 ), moderada (50-200 / mm 3 ) ou marcada (> 200 / mm 3 ). O padrão de pleocitose, bem como a predominância de polimorfonucleares (PMN) ou linfomononucleares (LMN) foi registrado e uma comparação entre os cinco períodos de tempo de cada amostra de LCR. Análises de glicose, proteína e lactato Para análise bioquímica da estabilidade, avaliamos 20 amostras de LCR coletadas submetidos à LP. Essas amostras do LCR foram enviadas à unidade principal do Laboratório Senne Liquor Diagnóstico, de acordo com a RDC 20/2014 da Anvisa. As concentrações de glicose, proteína e lactato foram determinadas por colorimetia. Todas as amostras do LCR foram divididas em alíquotas em cinco tubos diferentes. Cada uma dessas alíquotas foi analisada em cinco períodos diferentes: T0, T2-2 horas, T3-3 horas, T4-4 horas, T12-12 horas. Análise estatística A análise de variância do total de leucócitos, neutrófilos, linfócitos, proporção de neutrófilos / linfócitos e concentrações de glóbulos vermelhos, glicose, proteína e lactato nos diferentes períodos de tempo foi realizada com a análise de variância unidirecional (ANOVA). O teste de comparação múltipla de Tukey foi usado para determinar quais médias entre elas diferem das demais. O nível de significância foi estabelecido em p <0,05. O software GraphPad Prism 5.0 (GraphPad Software, San Diego, CA, EUA) foi utilizado para todas as análises estatísticas. RESULTADOS Glóbulos brancos e vermelhos A contagem total de leucócitos no LCR representa o mais sensível parâmetro para caracterização de uma doença inflamatória do sistema nervoso central (SNC). Identificar o tipo ou tipos de células presentes no LCR é uma ajuda valiosa de diagnóstico, pois, conforme a linhagem celular predominante nessa contagem, é possível se estabelecer uma conduta terapêutica adequada de acordo com o significado clínico desse resultado. Em um LCR de um adulto normal, há uma predominância de linfócitos (60%- 70%), seguido de monócitos (30%-50%), e, em menor quantidade, de neutrófilos (1%- 3%). Em crianças há uma maior proporção de monócitos, nos quais até 80% podem ser observados em um LCR normal. Ocasionalmente, pode-se observar isoladamente eosinófilo ou neutrófilo no LCR normal. Os valores totais médios de leucócitos, neutrófilos, linfócitos, razão neutrófilos- tolinócitos e glóbulos vermelhos são apresentados no artigo na tabela 2. Não foi encontrada variância significativa para leucócitos totais ( p = 0,15), neutrófilos ( p = 0,27), linfócitos ( p = 0,15), razão neutrófilos / linfócitos ( p = 0,11) e glóbulos vermelhos ( p = 0,39). O teste de comparação múltipla de Tukey não mostrou diferenças significativas entre T0, T1, T2, T3 e T4 para nenhuma dessas variáveis. Não houve redução significativa no número de leucócitos e eritrócitos pela análise de variância (ANOVA). A interpretação clínica da citologia não resultou em resultados diferentes em nenhum dos tempos avaliados. Não houve variação significativa nos parâmetros bioquímicos. DISCUSSÃO Não encontramos uma diminuição estatística significante na contagem de leucócitos e glóbulos vermelhos por análise de variância ao longo de 12 horas em amostras de LCR armazenadas à temperatura ambiente. Além disso, nenhuma das análises citológicas resultou em diferentes interpretaçõesclínicas durante 12 horas de armazenamento do LCR à temperatura ambiente. Até onde sabemos, nenhum estudo anterior avaliou a variação citológica ao longo de 12 horas em amostras de LCR armazenadas à temperatura ambiente. Uma recomendação da Classe IV para avaliação citológica em duas horas foi dada devido ao potencial lise nos glóbulos brancos e vermelhos. Os achados sugerem que a diminuição na contagem de leucócitos não afeta significativamente a interpretação clínica de amostras de LCR de pelo menos 20 leucócitos / mm 3 armazenados à temperatura ambiente. Na prática clínica, muitas vezes é difícil realizar análises do LCR logo após a coleta do LCR. Muitos hospitais e clínicas não têm serviço de LCR e precisam enviar as amostras de LCR. Nossos resultados sugerem que isso pode não interferir significativamente no resultado final da análise do LCR. Mais pesquisas são necessárias para avaliar a estabilidade de proteínas específicas, como albumina e imunoglobulina. O exame do LCR fornece informações importantes em relação ao diagnóstico etiológico e acompanhamento de processos inflamatórios, infecciosos ou neoplásicos dos órgãos que são envolvidos por esse líquido. Esse exame compreende a análise dos aspectos físicos, bioquímicos e citológicos do LCR. A definição dos intervalos de valores de referência é uma tarefa desafiadora para todos os laboratórios clínicos, sendo fundamental para que os laboratórios forneçam informações fidedignas e que os clínicos possam interpretar corretamente os resultados e optar pelas melhores condutas diante da população assistida. CONCLUSÃO Em conclusão, mostramos que os parâmetros do LCR permanecem relativamente estáveis, não afetando significativamente a interpretação clínica nas primeiras 12 horas de armazenamento à temperatura ambiente, sugerindo que as amostras de LCR podem ser submetidas com segurança a um serviço especializado de LCR dentro desse período. Os estudos abordados nesta revisão mostraram que ainda não existe uma padronização dos valores de referência para o exame de LCR. Apesar disso, os trabalhos não apresentaram uma ampla variância nesses valores. Apesar da escassez de trabalhos sobre o assunto, esta revisão contribui para a ampliação dos conhecimentos no exame do LCR. A escassez de estudos no LCR se deve à carência de profissionais especializados nesse tipo de análise e a menor demanda do exame em relação a outros fluidos, o que acarreta maior custo na implantação de procedimentos de qualidade. Estudos futuros ainda são necessários para avaliar o comportamento desses parâmetros em amostras de contagens de células mais próximas dos valores limite.
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