RESUMO MICROBIOLOGIA

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PRIMEIRO PASSO 
ANÁLISE DA UROCULTURA: 
Urina será semeada em: 
● ágar CLED: não é seletivo e utilizado apenas para diferenciação (fermentação da 
lactose positiva ou negativa) e quantificação; 
● ágar MacConkey: seletivo para bactérias Gram negativas (enterobactérias e não 
fermentadores) e também diferencial (fermentação da lactose positiva ou negativa). 
 
MÉTODO 
1. Identificar a placa 
2. urina deve ser homogeneizada em forma de infinito. 
3. Com uma alça de inoculação (descartável ou flambada), geralmente de 1μL, a amostra 
é semeada por estriamento no meio CLED e por esgotamento no meio MacConkey 
 
 
4. meio devem ser incubados em estufa a 37ºC por 24 horas 
 
SEGUNDO PASSO 
Leitura bioquímica 
Fita reagente, fazendo a leitura dos parâmetros 
 
TERCEIRO PASSO 
TÉCNICA - O exame de sedimento é da seguinte forma: 
1. Colocar 5 a 10 mL da amostra de urina em tubo cônico. 
2. Centrifugar por 10 min (3000 rpm) 
3. Desprezar o sobrenadante, deixando apenas 0,5 mL a 1 mL no tubo. 
4. Ressuspender o sedimento. 
5. Depositar duas gotas do sedimento em uma lâmina (separadamente). 
6. Colocar, em seguida, uma lamínula sobre a primeira gota para observação do 
sedimento a fresco não-corado. 
7. Depositar uma gota do corante urinário (STERNHEIMER-MALBIN) sobre a outra 
gota do sedimento, homogeneizar e cobrir com lamínula para observação do 
sedimento urinário corado. 
8. A observação do sedimento é realizada ao microscópio, com baixa intensidade de luz, 
utilizando primeiramente um menor aumento (100x) e depois a um maior aumento 
(400x). 
 
No exame de sedimento são observados: 
● células de descamação (renais, pelve, vesicais, uretrais e vaginais), hemácias, 
leucócitos, cilindros (hialinos, leucocitários e granulosos), cristais, bactérias, muco e 
espermatozóides. 
● Os cristais e cilindros são identificados e quantificados por campo de menor aumento 
(100x). 
● A quantificação das células de descamação é feita por números por campo de maior 
aumento (400x) e o restante por cruzes (+,++,+++) por campo (400x). 
 
Termos importantes: 
➔ hematúria: presença de hemácias na urina é conhecida como 
➔ piúria: muito leucócito 
 
QUARTO PASSO 
Leitura das placas semeadas 
1. Após o período de incubação, as colônias devem ser analisadas quanto ao: tamanho, 
cor, brilho, pureza utilização da lactose. 
2. Se o resultado da cultura for negativo após as 24 horas e na sedimentoscopia foi 
observado a presença de bactérias ou número elevado de leucócitos, incubar por mais 
24 horas. 
3. Realizar a leitura de gram 
 
Na presença de cocos gram + 
➔ É recomendado a semeadura em ágar sangue para análise de S.agalactiae 
➔ Verificação de hemólise 
 
Alfa hemólise: quebra parcial das hemácias (fermenta pouco) 
Beta hemólise: quebra total das hemácias (fermentadora) 
Gama hemólise: não existe hemólise (não fermentadora) 
 
QUINTO PASSO 
ANTIBIOGRAMA 
Prova de sensibilidade aos antibióticos, utilizado para microrganismos cuja sensibilidade às 
drogas normalmente não seja previsível. (utilizar culturas recentes). 
MÉTODO 
1. Com a alça de semeadura, transferir 1 colônias com a mesma morfologia e inocular 
em 1 mL de solução fisiológica estéril de salina 
2. Observando a turbidez da solução (referência de turbidez o tubo 0,5 da escala de 
McFarland) 
 
Padrão de turvação utilizado para determinar a intensidade de multiplicação bacteriana em 
meios de culturas líquidos. O grau de turvação indica a [ ] das bactérias. 
 
1. Com um swab estéril, semear a solução no Ágar Mueller-Hinton já identificada nas 
bordas. 
2. Semear com estrias uma em cima da outra 
 
3. Aguardar 5 minutos à temperatura ambiente para que o inócuo seja completamente 
absorvido pelo ágar. 
4. Colocar o disco de antibiotico com o auxílio de uma pinça previamente flambada. 
5. Os discos devem ter uma distância de 2,5cm (Máximo de 12 discos em placas de 15 
cm e 5 discos em placas de 9 cm). 
6. Após 15 minutos da colocação dos discos, as placas são invertidas e incubadas 
7. Incubar de 18 a 24 horas à 35 +/- 1º C 
8. Medir o diâmetro dos halos. 
9. Classificá-los quanto a resistência, sensibilidade intermediária e sensibilidade. 
➔ Resistente: quando o antibiótico tem pouca eficácia ou não tem eficácia 
➔ Sensibilidade intermediária: quando o antibiótico tem uma eficácia intermediária 
➔ Sensibilidade: quando o antibiótico tem uma ótima eficácia 
ASSISTIR ​https://www.youtube.com/watch?v=kusZJqSaBzQ 
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