Prática 1

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EXTRAÇÃO DE DNA DE MORANGO
É octaplóide: possui 8 cópias do genoma.
Apresenta pectinases e celulases: enzimas
que degradam os reforços celulares de
pectina e a celulose.
Fácil de macerar.
Célula Vegetal
Extração do DNA 
requer: 
a) quebra da parede celular (celulose)
b) Ruptura da membrana plasmática 
(lipídios + proteínas)
c) Ruptura da Carioteca (lipídios + 
proteínas)
Ruptura das membranas celulares:
Detergente, sabão, shampoo.....
As moléculas de sabão e lipídeos são feitas de
duas partes:
De um lado apresentam afinidade com a água
(“Cabeças”), e do outro repelem a água
(“Caudas”).
Quando em contato com a água (sabão +
lipídeos), se organizam em bolhas (esferas) com
as cabeças para fora para enfrentar a água e as
caudas dentro para se esconderem da água.
Quando o sabão se aproxima dos lipídeos
(graxas/gorduras), suas estruturas semelhantes
fazem com que se combinem, formando uma
bola de sabão gordurosa.
Quando o detergente se aproxima da
célula, ele captura os lipídios e as
proteínas, formando bolhas e libertando
o conteúdo intracelular.
DNA + RNA + DNAses (degradam o DNA)
Solução de lise
O DNA de uma célula é moldado,
dobrado e protegido por proteínas
(Histonas).
Para desmontar/desorganizar esta
estrutura podemos utilizar Suco de
Abacaxi ou ainda Suco de
Mamão (duas a três gotas).
Estes sucos contém enzimas (Bromelina
e Papaína) que removem as proteínas
do DNA. São proteases, o que significa
que separam as proteínas.
A água salgada ajuda o DNA a precipitar
(solidificar e aparecer) quando o álcool é
adicionado.
O sal dissolvido em água se dissocia
liberando íons + que neutralizam a carga
negativa do DNA. Assim, não repelem-se
mais, permitindo a aglomeração de várias
fitas e a precipitação quando se adiciona
álcool. O sal ajuda a manter o conjunto.
Aumenta também a densidade do meio, o
que facilita a migração do DNA para o
álcool.
SAL
Álcool
O DNA é menos denso que a água e a mistura
aquosa dos restos celulares, ficando
geralmente dissolvido próximo à superfície do
macerado.
Com a presença do álcool e do sal ocorre a
precipitação do DNA, que sai de solução,
depositando-se na interface entre a mistura
aquosa e o álcool.
Usar água e álcool gelados aumentarão o
rendimento de DNA, pois retardam a ação de
enzimas presentes no citoplasma celular
que podem degradá-lo. O álcool frio também
ajuda o DNA a precipitar (solidificar e aparecer)
mais rapidamente.