PLATAFORMAS MOLECULARES PARA AS ATIV BIOLÓGICAS

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de ​Northern blot ​corresponde​ ​a uma técnica de hibridização de 
moléculas de RNA com sondas de oligonucleotídeos marcadas. 
Trata-se de uma metodologia útil, portanto, na detecção de RNA 
mensageiro (RNAm), nos estudos de expressão gênica, na avaliação 
da degradação de RNA e ​splicing​, por exemplo. 
 
 
 
 
6​a 
 ​Questão 
Acerto:​ ​1,0​ / ​1,0 
 
 
Uma técnica de grande utilidade e resolução utilizada em laboratórios de bioquímica e biologia 
molecular é a eletroforese bidimensional. Sobre essa técnica, assinale V para verdadeiro e F 
para falso nas afirmativas a seguir: 
( ) Em uma das dimensões da eletroforese bidimensional, as moléculas são separadas em 
função de seus pontos isoelétricos. 
( ) Em uma das dimensões da eletroforese bidimensional, as moléculas são separadas de 
acordo com sua massa molecular. 
( ) Proteínas isoladas por essa técnica podem ser, a seguir, analisadas por espectrofotometria 
de massas, permitindo que sejam calculadas as massas moleculares de peptídeos derivados. 
( ) Não é possível realizar western blotting a partir de um gel bidimensional. 
Assinale a alternativa que apresenta a sequência CORRETA de V e F de cima para baixo: 
 
 
 
 
 V-V-V-V 
 
V-V-F-V 
 
F-V-V-F 
 ​​​​​V-V-V-F 
 
F-V-F-V 
Respondido em 28/09/2020 10:27:37 
 
 
Explicação: 
A eletroforese 2D também pode ser utilizada para separação de proteinas que precede o Western Blot 
 
 
 
 
7​a 
 ​Questão 
Acerto:​ ​1,0​ / ​1,0 
 
 
(INSTITUTO AOCP, 2018): Considerando as técnicas de sequenciamento do DNA, a respeito 
das características desse tipo de procedimento, assinale a alternativa ​correta: 
 
 
 
 
O método de dideoxinucleotídeos utiliza o grupo 3-hidroxila; 
 
A utilização de vetores plasmidiais, em técnicas de subclonagem de fragmentos de 
DNA, é denominada "pirossequenciamento". 
 
O método Sanger também é conhecido como sequenciamento de nova geração; 
 
Os fragmentos resultantes são separados eletroforeticamente e submetidos à 
autorradiografia; 
 
A presença de ddNTPs na reação dispensa a adição de desoxinucleotídeos trifosfato 
normais; 
Respondido em 28/09/2020 10:46:30 
 
 
Explicação: 
Devido à ausência do grupamento hidroxila no carbono 3´ da pentose, os nucleotídeos modificados não 
possuem capacidade de fazer ligação química com um próximo nucleotídeo. O sequenciamento de nova 
geração corresponde a uma metodologia mais moderna de sequenciamento genômico, de alta vazão, 
ao contrário do método de Sanger. A presença de ddNTPs não dispensa a necessidade de dNTPs, uma 
vez que, é necessário produzir moléculas de DNA com diferentes extensões para se elucidar a ordem 
das bases nitrogenadas. Se apenas ddNTPs estivessem presentes, as moléculas seriam abortadas 
precocemente, tão logo um ddNTP fosse incorporado. As reações de pirosequenciamento dispensam a 
necessidade de clonagem molecular. 
 
 
 
 
8​a 
 ​Questão 
Acerto:​ ​1,0​ / ​1,0 
 
 
(FIOCRUZ, 2010): São características de um bom vetor de clonagem, um plasmídeo que 
contém as seguintes características, ​exceto​: 
 
 
 
 
presença de uma origem de replicação, ou seja, uma 
seqüência de DNA que permita que o vetor seja replicado 
na célula hospedeira; 
 
presença dos mesmos sinais de início de transcrição e de 
tradução entre procariotos e eucariotos; 
 
possuir replicação independente do DNA genômico da 
célula. Alem disso, eles devem ser facilmente introduzidos 
em bactérias que não os contenham por meio de métodos 
químicos ou métodos físicos de transformação. 
 
presença de um gene que codifica um produto que permita 
a distinção entre a célula com plasmídio de uma célula sem 
plasmídio, como por exemplo, um gene para resistência a 
antibióticos; 
 
presença de sítios únicos de clivagem para enzimas de 
restrição. O conjunto destes sítios é denominado de Sítio 
Múltiplo de Clonagem (SMC) e é o local onde o inserto é 
incorporado ao vetor de clonagem; 
Respondido em 28/09/2020 10:47:45 
 
 
Explicação: 
Os sinais de início de transcrição e tradução são diferentes entre procariotos e eucariotos. 
 
 
 
 
9​a 
 ​Questão 
Acerto:​ ​1,0​ / ​1,0 
 
 
(FMTM, MG): Dois homens, P-I e P-II, disputam a paternidade de 
uma criança C, filha da mulher M. Diante disso, foi pedido o 
exame de DNA dos envolvidos. O resultado do teste revelou os 
seguintes padrões: 
 
 
Acerca dos resultados obtidos foram feitas as seguintes afirmações: 
I. P-II pode ser o pai da criança, pois há maior quantidade de faixas coincidentes com o 
padrão da criança; 
II. as faixas de números 3, 9, 10, 14, e 17 correspondem ao DNA que a criança recebeu da 
mãe; 
III. não é possível excluir a possibilidade de P-I ser o pai da criança. 
Está ​correto​ o contido apenas em: 
 
 
 
 
II e III. 
 
I e II; 
 
I e III; 
 
I; 
 
II; 
Respondido em 28/09/2020 10:46:15 
 
 
Explicação: 
É possível excluir a paternidade de P-I à medida em que, após excluir as bandas que têm 
correspondência com a mãe, P-I e a criança não possuem bandas compatíveis. 
 
 
 
 
10​a 
 ​Questão 
Acerto:​ ​1,0​ / ​1,0 
 
 
(UNIFESP, 2017): Por que a alteração na sequência de DNA 
provocada pelo CRISPR-Cas9 pode inativar um gene? 
 
 
 
 
 
Porque o RNA transcrito tem uma meia vida menor do que o RNA original; 
 
Porque o RNA transcrito a partir dessa sequência também será alterado; 
 
CRISPR-Cas9 é incapaz de inativar um gene. 
 
Porque o RNA transcrito não será traduzido; 
 
Porque o DNA alterado não será transcrito; 
Respondido em 28/09/2020 10:47:20 
 
 
Explicação: 
De acordo com o dogma da biologia molecular, a alteração na 
sequência de DNA implicará na alteração do RNA transcrito. 
Consequentemente, a proteína traduzida a partir desse RNAm 
pode não ser funcional, ou seja, o gene pode ser inativado. 
 
 
 
1​a 
 ​Questão 
Acerto:​ ​1,0​ / ​1,0 
 
 
A respeito da quantificação de DNA utilizando espectofotometria, marque a alternativa 
INCORRETA. 
 
 
 
 
Quando a razão das leituras no comprimento 260nm/280nm estão baixas (abaixo 
de 1,4 aproximadamente) podemos sugerir uma boa qualidade da extração ácido 
nucleico (alta pureza). 
 
Na espectrofotometria quanto maior for a absorção de luz pela amostra, maior a 
concentração de DNA na amostra. 
 
 A técnica é capaz de determinar as concentrações médias dos ácidos nucléicos DNA 
ou RNA presentes em uma amostra, bem como sua pureza. 
 
O benefício da utilização de análise por espectrofotometria é a capacidade de 
determinar a pureza da amostra usando o cálculo de razão das leituras no 260 nm/ 
280 nm. 
 
A quantificação de DNA por espectrofotometria é realizada por medição da 
quantidade de luz absorvida pelo DNA em solução no comprimento de onda de 260 
nm. 
Respondido em 17/10/2020 13:55:22 
 
 
Explicação: 
Quando a razão das leituras no 260 nm/ 280 nm é abaixo de 1,4 podemos sugerir a presença de 
proteínas ou outros contaminantes na amostra de ácido nucleico. 
 
 
 
 
2​a 
 ​Questão 
Acerto:​ ​1,0​ / ​1,0 
 
 
(Fiocruz, 2010): Sobre a utilização da técnica de PCR com a finalidade de diagnóstico 
molecular, analise as afirmativas a seguir. 
I. Uma vez que na reação de PCR se utiliza uma DNA Polimerase dependente de DNA, 
somente os vírus cujo genoma é constituído por DNA podem ser detectados pela técnica de 
PCR. 
II. É possível detectar microorganismos diferentes em uma mesma reação de PCR, desde que 
se utilize na reação pares de iniciadores específicos para cada microorganismo que se queira 
detectar. 
III. A utilização da técnica de PCR para diagnósticomolecular terá sempre e somente caráter 
qualitativo. 
Assinale: 
 
 
 
 
se somente a afirmativa III estiver correta; 
 
se somente a afirmativa I estiver correta; 
 
se somente a afirmativa II estiver correta; 
 
se somente as afirmativas I e II estiverem corretas; 
 
se todas as afirmativas estiverem corretas. 
Respondido em 17/10/2020 13:56:56 
 
 
Explicação: 
É possível detectarmos patógenos cujo genoma seja RNA através de RT-PCR, ou seja, transcrição 
reversa acoplada à PCR. Também podemos quantificar o nosso alvo através da PCR em tempo real ou, 
indiretamente, mensurar aproximadamente a sua quantidade através de gel de agarose, reagente Low 
mass e sistema de coloração adequado para análise dos amplicons. 
 
 
 
 
3​a 
 ​Questão 
Acerto:​ ​1,0​ / ​1,0 
 
 
(SESAU, RO, 2017) - Técnica baseada na separação de partículas em um determinado gel de 
acordo com sua massa e carga. Pode ser utilizada para separação de diversas moléculas 
orgânicas, como lipoproteínas, proteínas, RNA e DNA. A técnica de separação descrita no 
texto é denominada: 
 
 
 
 
eletroforese; 
 
floculação; 
 
cromatografia. 
 
filtração; 
 
centrifugação; 
Respondido em 17/10/2020 14:01:43 
 
 
Explicação: 
As demais técnicas citadas não envolvem a utilização de campo elétrico para a separação das partículas 
em função de seus respectivos pesos moleculares. 
 
 
 
 
4​a 
 ​Questão 
Acerto:​ ​1,0​ / ​1,0 
 
 
(INCA, 2014): Um oligonucleotídeo de DNA curto utilizado para amplificação por PCR é 
adequadamente chamado de: 
 
 
 
 
primer; 
 
inserto; 
 
sonda; 
 
polimerase; 
 
vetor. 
Respondido em 17/10/2020 14:02:17 
 
 
Explicação: 
As sondas são utilizadas para a detecção de ácidos nucleicos. Insertos correspondem a pequenos 
fragmentos de DNA os quais são clonados em plasmídeos ou vetores, utilizados para a transferência de 
material genético. A polimerase é a enzima responsável pela amplificação do ácido nucleico. 
 
 
 
 
5​a 
 ​Questão 
Acerto:​ ​1,0​ / ​1,0 
 
 
(Unesp, 2012): Um clone de cDNA para um gene humano que codifica uma proteína amilase 
foi marcado com radioatividade e utilizado em um experimento de ​Southern blotting​. Nesse 
experimento, o DNA genômico de Ratos Wistar foi digerido com a enzima de restrição Eco RI 
e três fragmentos de DNA foram observados na análise de ​Southern blotting​. Quando os 
pesquisadores realizaram os mesmos experimentos com outra linhagem de ratos, foi 
observada a ausência de fragmentos na análise de ​Western blotting​, mesmo após estes 
experimentos terem sido repetidos três vezes. Podemos concluir ​corretamente​ que: 
 
 
 
 
na linhagem de ratos Wistar a região do DNA que codifica a proteína amilase 
contém dois sítios de restrição para a enzima Eco RI e, após a digestão com essa 
enzima, são gerados três fragmentos que sofreram hibridação com o clone de 
cDNA. Na outra linhagem de ratos, a ausência de fragmentos sugere que esses 
animais não têm a capacidade de produzir essa enzima amilase, pois essa 
sequência de DNA pode ter sido perdida ou deletada; 
 
os resultados da análise de ​Southern blotting​ com os ratos Wistar demonstram que 
há o reconhecimento de sítios de restrição pela enzima Eco RI na sequência de DNA 
do gene que codifica a proteína amilase. Entretanto, a ausência de fragmentos na 
outra linhagem de camundongo analisada é certamente resultado de erros 
metodológicos na aplicação dessas análises, pois este seria um resultado 
improvável; 
 
esses resultados mostram que existem três sítios de restrição para a enzima Eco RI 
no DNA genômico dos ratos Wistar, gerando, portanto, três fragmentos de 
tamanhos diferentes na análise de ​Southern blotting​. Na outra linhagem de ratos, a 
presença de apenas um sítio de restrição para essa enzima (Eco RI) gera um 
fragmento muito grande, o qual não é capaz de se hibridizar com o clone de cDNA 
e, portanto, não é possível ser detectado pela análise de ​Southern blotting​; 
 
esses resultados demonstram que o DNA dos ratos Wistar contém dois ou mais 
sítios de restrição para a enzima Eco RI e, após a digestão com essa enzima, são 
gerados três fragmentos de tamanhos diferentes. Na outra linhagem de ratos, a 
ausência de fragmentos fornece prova de que esses animais sofreram mutações na 
sequência de DNA que codifica a proteína amilase e essa sequência não é mais 
reconhecida pela enzima de restrição Eco RI, portanto não são observados 
fragmentos na análise de ​Southern blotting​; 
 
esses resultados demonstram que, na linhagem de ratos Wistar, existe um sítio de 
restrição para a enzima Eco RI na sequência da proteína amilase e, portanto, são 
observados três fragmentos com tamanhos diferentes que sofreram hibridação com 
o clone de cDNA. Na outra linhagem de ratos, a ausência de fragmentos demonstra 
a falta de sítios de restrição para a enzima Eco RI na proteína amilase desses 
animais, indicando, portanto, que o gene da amilase está deletado por mutação no 
DNA desses animais. 
Respondido em 17/10/2020 14:00:51 
 
 
Explicação: 
O número de sítios de restrição cliváveis pela enzima Eco RI para o gene analisado irá implicar na 
quantidade de fragmentos encontrados. Um sítio de restrição gera dois fragmentos, dois sítios de 
restrição gera três fragmentos e, assim sucessivamente. Na outra linhagem de ratos, a ausência de 
bandas no ​Western Blot​ sinaliza a ausência da proteína (amilase) que seria codificada pelo seu 
respectivo gene codificante. 
 
 
 
 
6​a 
 ​Questão 
Acerto:​ ​1,0​ / ​1,0 
 
 
(Policia Cientifica, PR, 2017): A espectrometria de massa é uma técnica utilizada para o 
estudo de massas de átomos, moléculas ou fragmentos de moléculas, desde que estes 
estejam eletricamente carregados. A respeito desse assunto, julgue as afirmações. 
 
I. Um espectrômetro de massas determina a massa de uma molécula ou átomo medindo a 
razão massa/carga dos íons gerados; 
II. Os íons são gerados pela indução, perda ou ganho de carga por uma espécie eletricamente 
neutra; 
III. Uma vez formados, os íons são direcionados, por forças eletrostáticas, para dentro do 
analisador de massas, separados de acordo com suas razões massa/carga e finalmente 
detectados. 
 
Assinale a alternativa ​correta​: 
 
 
 
 
Estão corretas apenas as afirmativas I e II; 
 
Estão corretas todas as afirmativas; 
 
Estão corretas apenas as afirmativas I e III; 
 
Estão corretas apenas as afirmativas II e III; 
 
Está correta apenas a afirmativa I. 
Respondido em 17/10/2020 14:03:16 
 
 
Explicação: 
Todas as alternativas estão corretas. 
 
 
 
 
7​a 
 ​Questão 
Acerto:​ ​1,0​ / ​1,0 
 
 
(Adaptada de CESPE, 2018): ​Complete as lacunas do texto a seguir, a respeito do ​projeto 
genoma (humano e outros) e às estratégias de sequenciamento disponíveis: 
"As técnicas de sequenciamento genômico se baseiam na ​_______________ ​da dupla fita 
de ​_______________ ​em moléculas de fita simples." 
 
 
 
 
Tradução/RNA; 
 
Nenhuma das alternativas acima. 
 
Tradução/ DNA; 
 
Transcrição/ DNA; 
 
Transcrição/RNA; 
Respondido em 17/10/2020 14:06:37 
 
 
Explicação: 
As técnicas de sequenciamento visam elucidar a ordem das bases nitrogenadas que compõem as 
moléculas de DNA. 
 
 
 
 
8​a 
 ​Questão 
Acerto:​ ​0,0​ / ​1,0 
 
 
Uma das funções de um vetor (molécula de DNA, a qual pode ser um plasmídio) nos 
procedimentos de uma clonagem gênica é: 
 
 
 
 
Realizar atividade similar à das enzimas de restrição. 
 
Atuar como tamponante da PCR. 
 
Neutralizar as cargas dos nucleotídios do DNA. 
 
Atuar como veículo que transporta o gene para o interior de uma célula hospedeira. 
 
Deletar o gene que foi nele inserido dentro da célula hospedeira.Respondido em 17/10/2020 20:41:50 
 
 
Explicação: 
O vetor apresenta este nome justamente porque ele carreia o gene da molécula alvo. 
 
 
 
 
9​a 
 ​Questão 
Acerto:​ ​1,0​ / ​1,0 
 
 
(PUC-Rio, 2015): A figura abaixo representa o resultado de um teste de paternidade. Este 
teste baseia-se na identificação de marcadores genéticos compartilhados ou não por pai, mãe 
e filhos. 
 
Considerando a figura, ​não​ é correto afirmar que: 
 
 
 
 
IV e I são irmãos gêmeos monozigóticos. 
 
I é filho biológico do casal; 
 
II não é filho deste pai; 
 
III é irmão biológico de I; 
 
V não pode ser filho biológico deste casal; 
Respondido em 17/10/2020 20:43:11 
 
 
Explicação: 
V pode ser filho biológico do casal, dado que metade das suas bandas apresentam compatibilidade com 
a mãe e, a outra metade, compatibilidade com o pai. 
 
 
 
 
10​a 
 ​Questão 
Acerto:​ ​1,0​ / ​1,0 
 
 
(Adaptado de UNIFESP, 2017): Considere uma infecção hipotética 
de uma bactéria por um vírus patogênico. Supondo que no DNA 
viral exista a sequência de bases nitrogenadas CCCTATAGGG, qual 
será a sequência de bases no RNA-guia associado à Cas9 
bacteriana? 
 
 
 
 
 
 
CCCTCTCGGG. 
 
CCCTATAGGG; 
 
GGGATATCCC; 
 
GGGAUAUCCC; 
 
CCCUAUAGGG; 
Respondido em 17/10/2020 20:45:33 
 
 
Explicação: 
A sequência de bases do RNA-guia associado deve ser 
complementar ao DNA que será inativado.