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TRANSCRIÇÃO Transcrição é a primeira etapa da expressão do gene e envolve a cópia da sequência de DNA de um gene para produzir uma molécula de RNA (DNA → RNA). RNA polimerase: - A principal enzima envolvida na transcrição é a RNA polimerase, que separa as fitas de DNA e usa o molde de fita simples para sintetizar uma fita complementar de RNA. - A RNA polimerase constrói uma fita de RNA na direção de 5' para 3' , adicionando cada novo nucleotídeos à extremidade 3' do filamento. ETAPAS DA TRANSCRIÇÃO: - A transcrição tem três estágios: iniciação, alongamento e término. 1. INICIAÇÃO: - Para iniciar a transcrição de um gene, é necessário que haja o remodelamento da cromatina, que deve estar frouxa e com o DNA aparente, que é a região chamada ‘promotor’. - Esse promotor contém sequências de DNA (códon de iniciação: AUG) que permitem que a RNA polimerase ou as suas proteínas acessórias se liguem ao DNA. Depois que a bolha de transcrição ou complexo transcricional é formado, a polimerase pode iniciar a ação. 2. ALONGAMENTO: - Uma vez que a RNA polimerase está na posição do promotor, ela "caminha" ao longo do filamento de DNA, conhecido como fita molde, na direção 3' para 5'. - Durante o alongamento, para cada nucleotídeo no molde, a RNA polimerase adiciona um nucleotídeo de RNA correspondente (complementar) à extremidade 3' da fita do RNA. - O transcrito de RNA é quase idêntico à fita de DNA não-molde (codificador). Porém, as fitas de RNA têm a base uracila (U) em vez de timina (T) e um açúcar diferente no nucleotídeo. 3. TÉRMINO: - A RNA polimerase vai continuar transcrevendo até encontrar sinais para parar (códons de parada: UAA, UAG ou UGA). - Essas sequências chamadas finalizadores sinalizam que o transcrito de RNA está completo e então, o transcrito se libera da RNA polimerase. MODIFICAÇÕES NO RNA EUCARIOTA: Nos eucariontes, o transcrito de um gene codificador de proteínas é chamado um pré-RNAm e deve passar por um processamento extra antes de poder direcionar a tradução. - Os pré-RNAms têm suas pontas modificadas, pela adição de um cap 5' (no começo) e uma cauda poli A 3' (no final). A cap 5' é uma guanina (G) modificada adicionada no primeiro nucleotídeo. Ela protege o transcrito de ser quebrado e auxilia o ribossomo a se ligar ao RNAm e começar a leitura para fazer uma proteína. A cauda poli-A é adicionada no final 3' do RNA. Quando uma sequência chamada ‘sinal de poliadenilação’ aparece em uma molécula de RNA durante a transcrição, uma enzima corta o RNA em dois naquele ponto e outra enzima adiciona aproximadamente 100-200 nucleotídeos de adenina (A) para cortar o final, formando uma cauda poli-A. A cauda torna o transcrito mais estável e ajuda a exportá-lo do núcleo para o citosol. - Splicing: Neste processo, partes do pré-RNAm (chamadas íntrons) são cortadas fora e as peças remanescentes (chamadas éxons) são unidas novamente. O splicing dá ao RNAm sua sequência correta. (Se nos íntrons não forem removidos, eles serão traduzidos juntamente com os éxons, produzindo um polipeptídeo "sem nexo"). - Splicing alternativo: Através do splicing alternativo, os eucariontes podem codificar mais de um RNAm a partir do mesmo gene e proteínas diferentes do que temos de genes em nosso DNA.
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