Aula 5- Enterobactérias

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Família 
Enterobacteriaceae
Profª. Drª. Helena Diniz
helenadiniz76@gmail.com
Bactérias Gram -
Cocos Cocobacilos
Vibrios
BacilosNeisseria
meningitidis,
N. gonorrhoeae
Haemophylus
influenza , Pasteurella,
Brucella, Bordetella
pertussis
Campylobacter jejuni,
Vibrio cholerae
Lactose + Lactose -
Oxidase - Oxidase -
Enterobactérias
Fermentam lactose 
RÁPIDO
Klebsiella, E. coli,
Enterobacter
Fermentam lactose
LENTO
Citrobacter, Serratia,
outros
Shigella, Salmonella,
Proteus, Yersinia e
outros
Pseudomonas,
Acinetobacter.
Oxidase +
Enterobacteriaceae
Características gerais:
• Bacilos Gram-negativos
• Flagelo (antígeno H)
• Cápsula (antígeno K), LPS (antígeno O)
• Anaeróbios facultativos
• Fermentam glicose
• Reduzem nitrato - nitrito
• Catalase +
• Oxidase -
Critérios de 
classificação e 
identificação
Enterobacteriaceae
Características gerais:
• Principais agentes de infecção hospitalar
• Principal causa de infecção intestinal em muitos países
• Ubiquitários
• Membros da microbiota intestinal do homem e animais
• Coliformes
• Diferenciados por: 
- Propriedades bioquímicas, 
- Estruturas antigênicas e hibridização 
- Sequenciamento de ácidos nucléicos
Enterobacteriaceae
D = diferentes reações em 
diferentes espécies de um 
gênero
d = diferentes reações em 
diferentes isolados
(d) = diferentes reações 
em diferentes isolados 
tardiamente
X = reações tardias e 
irregularmente positivas 
(mutantes)
(+) = reações tardias, mas 
sempre positivas
((+)) = liquefação muito 
lenta
Diferenciação bioquímica das enterobactérias
Enterobacteriaceae
Origem das doenças por Enterobactérias
• Reservatório animal (Salmonella, Yersinia)
• Carreador humano (Shigella, Salmonella Typhi)
• Transmissão endógena (E. coli) (ou veiculada)
Principais agentes
Infecções hospitalares: 
• E. coli, Salmonella spp., Klebsiella spp., Enterobacter spp., Serratia marcescens, 
Proteus spp., Morganella morgannii, Citrobacter spp., e Providencia spp.
Infecções na comunidade:
• DTAs
• Urinárias: E. coli, Klebsiella spp. e Proteus spp.
Enterobacteriaceae
Manifestações clínicas
Infecções intestinais Infecções 
extraintestinais
Doenças diarreicas • Infecções em feridas e queimaduras,
• Infecção no trato urinário
• Respiratório, 
• Sepce
• Meningite
Sorotipos de Salmonella,
Shigella spp.,
Categorias de E. coli e Yersinia
enterocolitica
Enterobacteriaceae
Estrutura antigênica das enterobactérias
Exame macroscópico
- Consistência, cor, odor, presença ou ausência de muco e/ou sangue.
Exame microscópico (Investigação de leucócitos fecais)
- Presença de numerosos leucócitos polimorfonucleares (PMN) sugere um 
processo inflamatório invasivo.
- Direciona o que será encontrado na coprocultura.
Enterobacteriaceae
Identificação: deve permitir discriminar com ≥80% de acerto:
As metodologias devem:
- Fácil execução 
- Fácil interpretação
- Custo acessível
- Rapidez para leitura
Enterobacteriaceae
Principais provas bioquímicas para identificação de enterobactérias
Enterobacteriaceae
Identificação
• Crescimento e isolamento
• Sorológico (patogênicos)
- antígenos somático (O), 
- flagelar (H)
- envoltório ou capsula (K).
Enterobacteriaceae
Isolamento e identificação:
1- Crescimento em meio rico e seletivo
2- Identificação de Gram
3- Prova da oxidase
4- Prova do metabolismo fermentador
5- Série bioquímica suplementar
API 32E
oxidase
Gram
Enterobacteriaceae
Meios seletivos e diferenciais
• Agar Eosina Azul de Metileno 
(EMB)
• Agar MacConkey
• Agar Salmonella-Shigella (SS)
• Agar Xilose Lisina Desoxicolato
(XLD)
• Agar Hektoen Entérico (HE)
Meios ricos
• Agar Sangue
• Agar Chocolate
• Agar CLED
Enterobacteriaceae
Escherichia
Klebsiella
Enterobacter
Serratia
Shigella
Salmonella
Proteus
Citrobacter
Yersinia
Ágar Mac Conkey
Enterobacteriaceae
Meios presuntivos de identificação mais utilizados
• Meio de Rugai, modificado por Pessoa e Silva (Meio de IAL),
• EPM MILI 
• TSI
• MIO
• Citrato de Simmons
• Ureia de Christensen
Enterobacteriaceae
Meios Bioquímicos de rotina (Presuntivos)
• Meio de Rugai, modificado por Pessoa e Silva 
(Meio de IAL)
- Prático
- Permite 9 reações 
- Inoculação por picada profunda e estria na 
superfície
• EPM - MILI
- Fermentação da glicose, produção de gas, H2S, 
ureia, fenilalanina.
- Motilidade, descarboxilação, lisina e indol.
Enterobacteriaceae
Fase superior
Fase inferior
- Prova de indol
- Triptofano desaminase
- Fermentação da sacarose 
- Produção de H2S 
- Produção de gás 
- Fermentação da glicose
- Produção de urease
- Descarboxilação da lisina 
- Motilidade
Enterobacteriaceae
• Kit para identificação de enterobactérias
• Conjunto EPM/MiLi/Citrato
• Tubo 1 – meio de Rugai sem sacarose 
provas: fenilalanina, fermentação da 
glicose, gás, H S, ureia
• Tubo 2 – MIO (Motilidade Indol Ornitina)
• Tubo 3 – lisina
• Tubo 4 – citrato
• Tubo 5 – rhamnose
Enterobacteriaceae
Meios Bioquímicos de rotina (Presuntivos)
• TSI (Agar Ferro Triplo Açúcar).
- Fermentação da glicose,
- Produção de gás, 
- Fermentação de lactose e/ou sacarose e produção de H₂S.
Meio TSI inoculado com diferentes bactérias: 
1– Klebsiella sp. (E. coli apresenta comportamento 
semelhante) 
2– Shigella; 
3– Salmonella (produção de H₂S;
4– Pseudomonas (bastonete não fermentador). 
Enterobacteriaceae
Enterobacteriaceae
Meios Bioquímicos de rotina (Presuntivos)
• MIO
- Mobilidade: turvação completa do meio a partir da 
linha de inoculação.
- Ornitina: a descarboxilação desse aa alcaliniza o 
meio, tornando-o púrpura. Na ausência da 
descarboxilação o meio apresenta coloração 
amarela, pois a glicose será fermentada 
obrigatoriamente.
- Indol: produção de indol quando se coloca gotas 
de reativo de Kovacs. Quando positivo, o meio 
muda para rosa-avermelhado.
E. coli: positiva em todas as 
reações
Klebisella pneumoniae: 
negativo em todas as reações
Enterobacteriaceae
Meios Bioquímicos de rotina (Presuntivos)
• Citrato de Simmons
- Citrato = fonte de carbono
- Quebra de sais de amônio – indicador 
azul de bromotimol
Enterobacteriaceae
Meios Bioquímicos de rotina (Presuntivos)
• Ureia de Christensen
- Ação da urease
- Indicador de pH:
- Quando a ureia é degradada pela urease, 
acumula-se amônia no meio, elevando o pH.
- Amarelo para rosa. 
Enterobacteriaceae
1. Quais critérios são aplicados para agrupamento dos membros 
da família Enterobacteriaceae?
2. Cite e explique as principais formas de isolamento e 
identificação das enterobactérias.
3. Cite os principais meios de cultura aplicados no isolamente
das enterobactérias.
4. Cite os principais meios utilizados para isolamento de 
Salmonella sp.?
Atividade de fixação