RELATÓRIO - Mecanismo agressão e defesa I

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INTRODUÇÃO
	No dia 08 de abril de 2019, ocorreu uma aula prática com os alunos do 3° período de Enfermagem, na Universidade Potiguar (UNP - 	Campus Mossoró), da disciplina de mecanismo de agressão e defesa I ministrada pela professora Fernanda Antonely, sobre bactérias, onde foi utilizado o método de coloração de gram para identificar a morfologia e características tintoriais das bactérias. 
	O método de coloração de gram é utilizado para diferenciar espécies bacterianas em dois grupos, as bactérias gram – positivas e as gram – negativas. Para diferenciá-las vários fatores são levados em consideração como, a coloração delas, a sua composição e as propriedades química e físicas das paredes celulares. 
É considerado um dos mais importantes dentro dos laboratórios de análises clínicas e microbiologia. Em laboratórios de análises clínicas, por exemplo, a técnica é essencial para obtenção de resultados. As bactérias são caracterizadas como gram-positivas ou gram-negativas em esfregaços de pus ou fluídos orgânicos, permitindo que o profissional do laboratório possa monitorar as infecções. A técnica de coloração Gram em análises clínicas é usada principalmente para identificar preliminarmente a morfologia das bactérias ou para estabelecer se há um número significativo de bactérias nas amostras clínicas.
Apesar da resposta positiva obtida com os resultados das técnicas de coloração de Gram, outros métodos de identificação bacteriana devem ser utilizados para que o resultado seja o menos controverso possível. Vale ressaltar que algumas bactérias não se coram ou coram-se fracamente.
OBJETIVO
	Avaliar as características tintoriais, morfológicas das bactérias, pela técnica de coloração de Gram possibilitando a diferenciação em grupos, com o uso da microscopia óptica. Observar bactérias vivas, móveis de produtos probiótico. 
MATERIAIS E MÉTODOS
· Microscópio óptico;
· Lâmina;
· Esfregaço; 
· Material biológico (Saliva coleta na hora do procedimento);
· Bico de Bunsen; 
· Pinça de madeira;
· Papel toalha;
· Swab estéril;
· Soluções liquidas: água corrente, álcool – acetona, lugol e coloração cristal violeta. 
Primeiramente o grupo acendeu o bico de Bunsen depois preparou o esfregaço utilizando o swab estéril, logo após pegou o material biológico (saliva) e espalhou na lâmina de vidro. Esperou um tempo até q a lâmina secasse em temperatura ambiente, depois o esfregaço foi fixado e foi passado a lâmina de vidro preparada na chama por 3 ou 5 vezes, foi utilizado a pinça de madeira para segura a lâmina. Depois desse procedimento a lâmina foi colocada no suporte de coloração, onde o esfregaço foi coberto por cristal violeta com duração de 1 minuto, depois foi lavado o esfregaço em água corrente e coberto durante 1 minuto com lugol, depois desse tempo o esfregaço novamente foi lavado e descorado com álcool – acetona por 3 a 5 segundos depois foi lavado novamente em água corrente, logo após o esfregaço foi coberto por fucsina por 30 segundos e lavado novamente em água corrente. Depois o esfregaço foi seco com um papel toalha, e foi levado para o microscópico e observado os resultados apresentados. 
RESULTADOS E CONCLUSÕES
Mediante a realização do procedimento foi possível identificar as bactérias Gram positivas e as Gram negativas diante das cores apresentadas. As bactérias Gram negativas apresentaram uma coloração rosa e as Gram positivas apresentaram uma coloração roxa.
Foi possível obter um maior conhecimento com a realização da aula prática, podendo ser essencial e de total importância para capacitarmo-nos para tal procedimento. 
REFERÊNCIAS BIBLIOGRAFICAS
KALID, Guilherme. COLARAÇÃO DE GRAM. < https://www.infoescola.com/bioquimica/coloracao-de-gram/ > Acesso em 12 de Abril de 2019.
ANEXOS
QUESTÕES
1 – Por que as bactérias gram positivas se coram-se em roxo, enquanto as gram negativas coram-se em rosa? Justifique com base na composição da parede celular.
RESPOSTA- A coloração das bactérias gram positivas é roxa devido a capacidade de suas paredes celulares de referência o corante cristal violeta no citoplasma durante o tratamento com etanol- acetona, já a gram negativa é rosa devido suas paredes celulares não reterem o cristal violeta.
2 – Após visualizar as lâminas permanentes e a fresco com bactérias, diferencie através das características morfológicas e tintoriais as bactérias Staphylococcus aureus, Streptococcus pyogenes, E. coli e Lactobacillus casei shirota.
RESPOSTA - Staphlococcus aureus são do grupo estafilococos, são gram positivas, pertencem a família micrococcaceae e é uma das 37 espécies de Staphlococcus. Sua coloração é amarelada e formação de Halo ágar sangue, já o Streptococcus pyogenes é uma espécie de bactérias gram positivas com morfologia de coco, pertencentes ao gênero Streptococcus beta-hemolítico do grupo A de Lancefield. Sua coloração é roxa.