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Ana Paula Puppo 2° semestre Medicina Veterinária Professora: Vanessa Mecanismos de Agressão e Defesa Estudo dirigido 1- Bacteriologia 1) O que é microbiota normal? R: Uma microbiota normal, é uma população de microrganismos que habita a pele e as membranas mucosas de um individuo saudável, por exemplo. 2) Explique a diferença de bactérias patogênicas de virulentas. Quais são os fatores (estruturas) de virulência das bactérias e suas funções? Identifique 3 R: As bactérias patogênicas causam infecções e doenças em indivíduos saudáveis. Já as bactérias virulentas são consideradas oportunistas, ou seja, aproveitam de uma infecção para se instalarem no hospedeiro. 3) Como as bactérias realizam a transferência de material genético e a resistência às antibióticos? R: Existem duas formas pelas quais as bactérias podem transferir seus materiais genéticos. ● Na transferência genica vertical: os agentes são passados de um micro-organismo para seus descendentes. ● Transferência gênica horizontal: os genes podem ser adquiridos de outros micro-organismos da mesma geração. Esse fenômeno envolve uma célula doadora que contribui parte de seu genoma para uma célula receptora, que pode ser de uma espécie ou até mesmo de um gênero diferente. Existem três mecanismos pelos quais é possível ser realizada a transferência gênica horizontal: transdução, transformação e conjugação. A resistência à antibiótico é a capacidade de resistir à sua destruição por um antibiótico. Ou seja, as bactérias não morrer durante o tratamento com antibióticos e se multiplicam cada vez mais, gerando outras bactérias que também são resistentes, enquanto as bactérias sensíveis são eliminadas. Existem duas formas de uma bactéria se tornar resistente: ● De forma aleatória por alterações no material genético bacteriano; ● Adquirindo um material genético externo, ou seja, de outras bactérias ou até vírus. 4) Como os antibióticos funcionam nos microrganismos? R: Os antibióticos são substâncias capazes de destruir bactérias ou inibir seu crescimento. Sua função é controlar as doenças causadas por micro-organismos, sem causas prejuízos ao paciente. 5) O que são e como agem os probióticos? Os probióticos são micro-organismos vivos benéficos para a saúde do corpo. Quando estão em equilíbrio, ajudam a manter a microbiota intestinal saudável e, assim, colaboram para o bom funcionamento do corpo. Essa microbiota do intestino é importante para o funcionamento do corpo como um todo, mas em especial, ela reforça e fortalece o sistema imunológico, por exemplo. Estudo dirigido 2- Bacteriologia Observe a figura abaixo e identifique as estruturas: 1- Flagelo; 2- Fimbrias ou Pili; 3- Cápsula; 4- Parede celular; 5- Membrana plasmática; 6- DNA cromossomial; 7- Ribossomos; 8- Citoplasma; Estudo dirigido 3- Bacteriologia Roteiro de Aula Prática: Cultivo e Isolamento de bactérias Objetivo: Conhecer e aplicar técnicas de cultivo e isolamento bacteriano. Exercício 1 – TÉCNICA DE SEMEADURA – ESTRIAS DE DILUIÇÃO O Diagnóstico laboratorial bacteriano é um processo caracterizado por uma sucessão de etapas, dentre elas o cultivo e isolamento do agente infeccioso, a identificação e por fim o antibiograma. O cultivo e isolamento é de fundamental importância visto que permite a obtenção de culturas puras, ou seja, nas quais se encontram presentes apenas um tipo de microrganismo. A cultura pura é necessária para a realização das demais etapas do diagnóstico bacteriano visto que a amostra clínica, obtida de um animal com suspeita de infecção bacteriano, é usualmente composta por uma mistura de microrganismos. 1. Com o objetivo de se obter colônias isoladas, será realizada a semeadura da amostra em Placas de Petri, por meio da Técnica das estrias de diluição, conforme ilustrado abaixo: As equipes de estudantes utilizarão dois tipos de amostras, representadas por culturas puras de Staphylococcus aureus e de Escherichia coli, identificadas por S.A e E.C, respectivamente. Tendo em vista os resultados do cultivo e isolamento das amostras identificadas como S.A e E.C, semeadas nos meios de Cultura identificados com BHI, Manitol e Mac Conkey: 1. Responda as seguintes perguntas: 1. O BHI é um meio rico ou seletivo? RICO. Seletivo, para quem? Seletivo para o isolamento de fungos e leveduras, pneumococos, meningococo e endo bactérias. 2. OManitol - meio rico ou seletivo? SELETIVO. Seletivo, para quem? Para isolar amostras biológicas de urna, secreções, produtos lácteos, feridas, carne e derivados. 3. OMac Conkey - rico ou seletivo? SELETIVO. Seletivo, para quem? Para bactérias gram-negativas. 4. Quais são as sequências tintoriais para identificação das bactérias? Explique cada uma. 1) Violeta genciana: corante roxo absorvido pela bactéria, seja ela gram-positiva ou gram-negativa. 2) Lugol: reage com a violeta formando iodo-violeta, fazendo a coloração mais uma vez, caso a bactéria seja gram-negativa. 3) Álcool absoluto: caso a bactéria seja gram-positiva, ela não irá se descolorar neste momento. Mas, se a bactéria for gram-negativa ela fica descolorida.] 4) Fucsina: um corante secundário, na cor rosa para colorir as bactérias que foram descoloridas, que no caso são as gram-negativa. 5. Qual característica principal das bactérias Gram negativas e Gram positivas? R: A parede celular da bactéria Gram-positiva é única e consiste em uma camada espessa, composta quase que completamente por peptídioglicano, responsável pela manutenção da célula e sua rigidez. Nas bactérias Gram-negativas, a parede celular está composta por uma camada de peptidioglicano e três outros componentes que a envolvem externamente; lipoproteína, membrana externa e lipopolissacarídeo. 6. As bactérias produtoras de beta lactamases possuem certa resistência aos antibióticos que possuem o anel beta lactâmico em sua estrutura. Por quê? R: As bactérias produtoras de β-lactamases possuem certa resistência aos antibióticos que possuem o anel β lactâmico em sua estrutura. Bactérias que produzem essa enzima, quebram a ligação amida de antibióticos da classe das penicilinas, por isso são resistentes a antibióticos beta-lactâmicos como as penicilinas, cefalosporinas, cefamicinas e carbapenemas.
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