Procedimento Operacional para Espermograma

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Pop (espermograma)
PROCEDIMENTO OPERACIONAL PADRÃO
4. Princípio do Teste : Aspectos Físico-Químico :
1. Deixar amostra liquefazer por 60 minutos em temperatura ambiente.
2. Verificar o pH, com a fita especifica:
Pingar uma ou duas gotas na fita reagente, aguarde alguns segundos e compare a coloração obtida com o valor da escala, disponível na caixa das fitinhas.
Valores normais: 7,2 a 8,0
3. Transferir o sêmen para um tudo de cônico.
4. verificar o aspecto se a amostra esta homogênea.
5. Verificar o volume:
Valores normais: 2,0 a 5,0 mL
Valores menores que 1 mL são insuficientes para análise.
6. verificar a viscosidade, se está em forma de “gotejamento”.
7. Verificar a cor:
Cinza claro à branco opalescente, transformando em translucido após liquefação.
8. Verificar odor.
5. Amostra : Para realizar o exame a pessoa deve estar de Abstinência sexual de no mínimo 5 dias, podendo variar de 2 a 7dias.
Coleta deve ocorrer de preferência no laboratório.
Antes da coleta, higienizar as mãos e pênis.
Amostra deve ser coletada por masturbação, em frasco limpo de vidro ou plástico e de boca larga.
Precisa ejacular o total dentro do pote, pois será levado em consideração de toda coleta da amostra.
Após identificar a amostra e informar o horário da coleta.
7. Procedimentos / Técnica : 
Aspectos Microscópicos
Teste hiposmotico (verifica a integridade celular da membrana da cauda do espermatozoide).
a)pipetar 0,5 mL de solução hipoosmotica em um eppendorff, acrescentar 1 gota de sêmen e incubar a 37°C por 15 minutos.
Após passar os 15 minutos, pipetar 10 µL da solução, colocar em uma lamina e cobrir com uma lamínula e contar 100 espermatozoides, anotando a proporção de caudas retas e enroladas.
Teste de vitalidade (espermatozoides vivos não coram e mortos por terem sua membrana lesada coram-se de rosa).
b)Pipetar 0,5mL de eosina em um enppendorff, acrescentar uma gota de sêmen e incubar a 37ºC por 15 minutos. Após os 15 minutos, pipetar 10 µL da solução, colocar em uma lâmina e cobrir com uma lamínula e contar 100 espermatozóides na objetiva 40x e verificar quantas estão coradas de rosa e quantas não estão coradas( utilizar o contador de células).