teste de chikungunya-igg-igm-1

Prévia do material em texto

Amostra Anticoagulante Armazenamento Observação
Sangue Total
Plasma
Soro
- Heparina
- EDTA
- Citrato de Sódio
- Heparina
- EDTA
- Citrato de Sódio
Sem
anticoagulante
Recomenda-se usar amostras 
frescas. Se isto não for 
poss íve l , conservar as 
amostras em geladeira (2-8 ºC) 
por até 1 semana. Não 
congelar amostras de sangue 
total.
É importante verificar a 
proporção correta de amostra 
e anticoagulante líquido para 
evitar diluição excessiva da 
amostra, o que pode ocasionar 
resultados falsos negativos.
Recomenda-se usar amostras 
frescas. Se isto não for 
poss íve l , conservar as 
amostras em geladeira (2-8 ºC) 
por até 1 semana. Para longos 
períodos de armazenamento, 
as amostras devem ser 
mantidas no freezer (–20 ºC).
Recomenda-se usar amostras 
frescas. Se isto não for 
poss íve l , conservar as 
amostras em geladeira (2-8 ºC) 
por até 1 semana. Para longos 
períodos de armazenamento, 
as amostras devem ser 
mantidas no freezer (–20 ºC).
É importante verificar a 
proporção correta de amostra 
e anticoagulante líquido para 
evitar diluição excessiva da 
amostra, o que pode ocasionar 
resultados falsos negativos.
660010-R: 10 determinações
660020-R: 20 determinações
660025-R: 25 determinações
660040-R: 40 determinações
660080-R: 80 determinações 
Kit para a determinação qualitativa de anticorpos IgG e IgM contra o vírus 
Chikungunya no soro, plasma e sangue total humano, por método 
imunocromatográfico.
Uso profissional. Não automatizado.
Somente para uso diagnóstico in vitro.
WAMA Diagnóstica
Rua Aldo Germano Klein, 100 - CEAT
CEP: 13573-470 - São Carlos - SP - Brasil
Fone: +55 16 3377.9977
SAC: 0800 772 9977
www.wamadiagnostica.com.br
 CHIKUNGUNYA IgG/IgM 
MS 10310030182 Imuno-Rápido
O diagnóstico baseia-se na detecção do vírus por métodos moleculares ou por cultura 
de vírus nos primeiros dias de infecção, antes que uma resposta imunológica, com a 
presença de anticorpos seja evidente. O anticorpo IgM anti-CHIKV é detectável de dois 
a três dias após o início dos sintomas e persiste durante várias semanas até três meses, 
enquanto os anticorpos IgG anti-CHIKV aparecem logo após os anticorpos IgM e 
Embora se acreditasse que as formas graves fossem raras e inferiores a Dengue, vêm 
se confirmando que a febre Chikungunya pode levar a formas atípicas e graves, 
podendo, assim como a Dengue, levar ao óbito, com manifestações no sistema nervoso, 
cardiovascular, rins e outros. É uma doença tipicamente tropical, ocorrendo com alta 
frequência em estações chuvosas nas regiões tropicais do mundo, sendo 
primariamente encontrada na África, no sudeste da Ásia e no sul da Índia. Atualmente 
têm se espalhado por todas as regiões do mundo com climas tropicais. 
O nome da doença deriva do dialeto makonde e significa "aquele que se dobra", em 
referência a postura curvada que muitos pacientes assumem devido às fortes dores nas 
articulações causadas pela doença. Os sintomas são muitas vezes confundidos com os 
observados em pacientes infectados com o vírus da Dengue. Ela se caracteriza por um 
quadro súbito de febre alta associada a prurido cutâneo, cefaleia, dor retro-orbitária, 
astenia, mialgia e dor intensa nas articulações (artralgia). Os sintomas podem durar, em 
média, 7 dias após a incubação do vírus. Na fase subaguda, que dura em média 3 
meses, há o desaparecimento da febre e da maioria dos outros sintomas, mas com 
permanência ou exacerbação da artralgia, podendo surgir doença vascular periférica, 
fadiga e depressão. Após esta fase, inicia-se a fase crônica, com permanência da 
artralgia, a qual pode durar até três anos, principalmente nos pacientes com idade acima 
de 45 anos. 
IMPORTÂNCIA CLÍNICA
A febre pelo vírus Chikungunya (CHIKV) é uma arbovirose transmitida pela fêmea do 
mosquito Aedes aegypti e Aedes albopictus. 
O CHIKV tem um período de incubação no ser humano, em média, de 3 a 7 dias, 
podendo variar de 1 a 12 dias. O período de viremia inicia-se dois dias antes dos 
sintomas e dura por até oito dias após seu aparecimento. Ao contrário da maioria das 
arboviroses, nas quais a maior parte dos indivíduos desenvolve infecções 
assintomáticas, o CHIKV leva a formas sintomáticas em até 70% dos infectados. 
O Imuno-Rápido CHIKUNGUNYA IgG/ IgM da WAMA é um ensa io 
imunocromatográfico rápido, que utiliza antígenos virais recombinantes do vírus CHIKV, 
para a detecção simultânea de anticorpos IgG e IgM contra o vírus Chikungunya, em 
amostras de sangue total, soro ou plasma humano. O ensaio é usado como um teste de 
triagem para a infecção viral por Chikungunya.
PRINCÍPIO DO MÉTODO
persistem por anos. 
Anticorpos monoclonais de camundongo anti-IgM e anti-IgG humano são imobilizados 
individualmente na membrana de nitrocelulose nas áreas teste G e M, respectivamente. 
CHIKV inativado e anticorpos monoclonais anti-CHIKV E1 conjugado com ouro coloidal 
são liberados na membrana após a adição do tampão diluente. Se anticorpos 
específicos anti-Chikungunya(classe IgM e/ou IgG) estão presentes na amostra, eles se 
ligarão ao CHIKV inativado, o qual formará um complexo com o anticorpo anti-CHIKV E1 
marcado. Este complexo se move pela membrana em direção a área teste, onde serão 
capturados pelo anti-IgM e/ou anti-IgG humanos imobilizados na membrana, levando à 
formação de uma banda colorida, o que indica um resultado positivo. A ausência desta 
banda colorida na janela de leitura indica um resultado negativo. A banda controle 
sempre aparecerá na janela de leitura quando o teste for realizado corretamente, 
independentemente da presença ou ausência de anticorpos anti-CHIKV na amostra. 
APRESENTAÇÃO DO KIT
- Cronômetro - Pipeta automática.
MATERIAIS NECESSÁRIOS, MAS NÃO FORNECIDOS.
AMOSTRAS
- Recipiente para descarte de material.
Usar amostras recém-colhidas de soro, plasma ou sangue total livres de hemólise, 
lipemia e contaminação.
PREPARAÇÃO E ESTABILIDADE DOS REAGENTES 
2. Diluente: 3 x 3ml
 660080-R (80 determinações)
1. Placa-teste: 80 unidades
3. Instruções de uso
2. Diluente: 2 x 3ml
3. Instruções de uso
O kit não é afetado pelo transporte desde que seja entregue ao destinatário no período 
máximo de 144 horas.
2. SOLUÇÃO DILUENTE: Tampão Tris contém azida sódica 0,095% como 
conservante. Pronto para uso. Estável até seu vencimento quando conservado entre 2-
30 ºC.
1. PLACA TESTE: Pronta para uso. Estável até seu vencimento quando conservado 
entre 2-30 ºC.
TRANSPORTE 
Obs.: O Kit mantém o mesmo desempenho após a primeira utilização e é estável até a 
data de validade descrita no rótulo, desde que seja mantido na temperatura indicada (2-
30 ºC).
1. Placa-teste: 10 unidades
 660020-R (20 determinações)
1. Placa-teste: 20 unidades
2. Diluente: 1 x 3ml
 660010-R (10 determinações)
3. Instruções de uso
2. Diluente: 1 x 1,5ml
 660040-R (40 determinações)
1. Placa-teste: 40 unidades
3. Instruções de uso
1. Placa-teste: 25 unidades
 660025-R (25 determinações)
2. Diluente: 1 x 3ml
3. Instruções de uso
INTERPRETAÇÃO DOS RESULTADOS
POSITIVO para IgG e IgM (infecção primária tardia ou infecção secundária 
precoce): Surgimento de três bandas coloridas, uma na área teste (G), outra na área 
teste (M) e outra na área controle (C).
NEGATIVO: surgimento de somente uma banda colorida na área controle (C).
2. Retirar a placa-teste (1) do envelope laminado imediatamente antes do uso.
1. Deixar os reagentes adquirirem a temperatura ambiente antes do uso, caso tenham 
sido armazenados em geladeira.
 
5. Dispensar 3 gotas da solução diluente (2) na cavidade destinada ao mesmo, 
conforme figura acima.
6. Fazer a leitura dos resultados entre 15 e 20 minutos. Não considerar resultados lidos 
após esse tempo.
PROCEDIMENTO
3. Colocar a placa-teste em uma superfície plana e seca.
4. Pipetar 10μL da amostra de soro, plasma ou sangue total na cavidade específica da 
amostra.
Adicionalmente, as amostras de sangue total podem ser obtidas por punção digital. 
Neste caso, seguir o procedimento abaixo:
2. Pressionar firmementea ponta da lanceta na lateral do dedo limpo para puncioná-lo. 
Em seguida, ordenhar bem o dedo até formar uma gota de sangue grande.
COLETA DE AMOSTRA POR PUNÇÃO DIGITAL
Após congelar a amostra, evitar repetidos ciclos de congelamento e descongelamento, 
pois isto causará falsos resultados.
1. Limpar a ponta do dedo que será puncionado utilizando álcool 70%.
3. Encostar o capilar/pipeta na gota formada e coletar o sangue total. Evitar a formação 
de bolhas de ar nesse processo.
REF
REF
REF
REF
REF
REF
REF
REF
REF
REF
Amostra
Diluente
de Amostra
4. Não substituir componentes deste kit com o de outros fabricantes, nem usar 
componentes de lotes e códigos diferentes.
8. Deixar os reagentes adquirirem temperatura ambiente antes de iniciar os testes.
10. Manter os cuidados habituais de segurança na manipulação dos componentes. 
Todas as amostras devem ser manuseadas como materiais potencialmente infectantes.
5. Deve-se evitar expor o kit a temperaturas elevadas, assim como diretamente ao sol.
11. Descartar todo o material conforme a regulamentação local. Brasil: consultar a Nº 
222 de 28/03/18 da ANVISA.
6. Não congelar os componentes do kit, pois isto causará deterioração irreversível.
7. O descarte dos reativos que contenham azida sódica como conservante deve ser 
realizado utilizando grandes volumes de água para evitar acúmulo de resíduos nos 
encanamentos, sob risco de explosão. A azida sódica é tóxica quando ingerida.
12. Utilizar as Boas Práticas de Laboratório (BPL) na conservação, manuseio e descarte 
dos materiais.
A WAMA Diagnóstica, após a revisão e análise crítica detalhada de todos os perigos 
conhecidos e/ou previstos, conclui que todos os riscos associados aos Produtos da 
9. Não usar o kit quando qualquer componente apresentar característica visual em 
desacordo com o especificado na FISPQ do produto.
GERENCIAMENTO DE RISCO
Os resultados mostraram que a sensibilidade do teste para IgM é de 100,0% e a 
especificidade para IgM é de 97,9%.
PRECISÃO
LIMITAÇÕES DE USO 
1. Somente para uso diagnóstico in vitro.
Foram testados dois lotes produzidos usando 7 amostras de resultado conhecido (3 
positiva IgG, 3 positivas IgM e 1 negativa). Foram realizados dez réplicas sob condições 
diferentes (operadores e lotes). As amostras foram corretamente identificadas em 100% 
das vezes.
2. Ler cuidadosamente as instruções de uso antes de realizar o teste.
O Imuno-Rápido Chikungunya IgG/IgM é utilizado somente para diagnóstico in vitro. 
Nem o valor quantitativo, nem a taxa de aumento de concentração de anticorpos anti- 
Chikungunya podem ser determinados, pois se trata de um teste qualitativo. A 
intensidade da linha teste não está necessariamente relacionada à concentração de 
anticorpos na amostra.
Falsos resultados podem ocorrer com o uso de amostras hemolisadas, lipêmicas, 
ictéricas, contaminadas, diluídas, congeladas e descongeladas repetidamente e/ou 
armazenadas fora das especificações descritas.
Inter-ensaio 
Intra-ensaio 
O Imuno-Rápido CHIKUNGUNYA IgG/IgM é um teste de triagem para determinar 
qualitativamente a presença de anticorpos de classe IgG e/ou IgM anti-Chikungunya. 
Dessa forma, os resultados devem sempre ser confirmados por outros testes. O 
diagnóstico clínico definitivo deverá ser feito pelo médico após a análise dos dados 
clínicos e laboratoriais.
O resultado negativo não exclui, em nenhum momento, a possibilidade da infecção pelo 
CHIKV. A não detecção de anticorpos anti-Chikungunya pelo teste pode ser causada por 
um conjunto de fatores que inclui a coleta do material em um momento inadequado da 
doença, onde os anticorpos ainda não estão presentes ou manipulação inadequada do 
material. Se o resultado do teste for negativo e os sintomas clínicos persistirem, um teste 
adicional realizado com outras metodologias é recomendado.
INTERFERENTES 
3. A data de validade corresponde ao último dia do mês assinalado na etiqueta da caixa 
do kit. Não usar componentes do kit após a data de validade.
PRECAUÇÕES E ADVERTÊNCIAS 
Foram testados dois lotes produzidos usando 7 amostras de resultado conhecido (3 
positiva IgG, 3 positivas IgM e 1 negativa). Foram realizados dez réplicas sob as 
mesmas condições. As amostras foram corretamente identificadas em 100% das vezes.
POSITIVO para IgM (infecção primária): surgimento de 2 bandas coloridas, uma na 
área teste (M) e outra na área controle (C).
INVÁLIDO: se não surgir banda na área controle (C), havendo ou não o surgimento de 
banda na área teste (G e/ou M). Nesse caso, a amostra deverá ser testada novamente 
com um novo dispositivo.
POSITIVO para IgG (infecção secundária ou pregressa): surgimento de 2 bandas 
coloridas, uma na área teste (G) e outra na área controle (C).
DESEMPENHO DO TESTE
A sensibilidade e a especificidade clínicas do kit Imuno-Rápido CHIKUNGUNYA 
IgG/IgM da WAMA foram determinadas em um estudo comparativo com um kit ELISA 
do mercado, realizado com 785 amostras de soro obtidas de um laboratório de 
referência, das quais 22 eram positivas e 763 negativas.
NOTA: qualquer intensidade de cor na área teste (T) deve ser considerada como 
positivo.
CONTROLE DE QUALIDADE
A linha controle na região identificada pela letra "C" é o controle interno do kit. O 
aparecimento da linha controle indica que os reagentes estão em perfeito 
funcionamento, porém é recomendado utilizar um controle positivo e negativo 
conhecidos em cada bateria de testes para assegurar o bom desempenho do ensaio.
Os resultados mostraram que a sensibilidade do teste para IgG é de 100,0% e a 
especificidade para IgM é de 99,3%.
BIBLIOGRAFIA 
1. ARYA, S. C.; AGARWAL, N. Rapid point-of-care diagnosis of chikungunya virus 
infection. Asian Pac. J. of Trop. Dis., v. 1, n. 3 p. 230-231, 2011.
3. CAVRINI, F. et al. Chikungunya: an emerging and spreading arthropod-borne viral 
disease. J. Infect. Dev. Countries, v. 3, n. 10, p. 744-752, 2009.
5. MYERS, R. M.; CAREY, D. E. Concurrent isolation from patient of two arboviruses, 
Chikungunya and dengue type 2. Science, v. 157, n. 3794, p. 1307- 1308, 1967.
7. STAPLES, J. E.; BREIMAN R. F.; POWERS, A. M. Chikungunya fever: an 
epidemiological review of a re-emerging infectious disease. Clin. Infect. Dis., v. 49, n. 6, 
p. 942-948, 2009.
A WAMA Diagnóstica garante a troca deste conjunto diagnóstico, desde que o mesmo 
esteja dentro do prazo de validade e seja comprovado por sua Assessoria Técnica que 
não houve falhas na execução, manuseio e conservação deste produto. A WAMA e seus 
distribuidores não se responsabilizam por falhas no desempenho do kit sob essas 
condições.
A WAMA Diagnóstica e seus distribuidores não se responsabilizam por quaisquer 
implicações decorrentes direta ou indiretamente de resultados obtidos com o uso 
incorreto deste produto. Uma vez que os testes são realizados em ambiente fora do 
controle do fabricante e do distribuidor, estes podem ser afetados por fatores ambientais 
e/ou erro do usuário.
TERMO DE GARANTIA
2. CAGLIOTI, C. et al. Chikungunya virus infection: an overview. New Microbiology, v. 
36, n. 3, p. 211-227, 2013.
Linha Imuno-Rápido foram avaliados e medidas de redução dos riscos foram 
implementadas, bem como que os produtos da Linha não apresentam riscos maiores 
que os benefícios obtidos com o seu uso; e que, se usado por profissionais qualificados 
e treinados, cientes das precauções descritas nos produtos, desempenhará suas 
funções com qualidade, segurança e eficácia.
4. HUNDEKAR, S. L. et al. Development of monoclonal antibody based antigen capture 
ELISA to detect chikungunya virus antigen in mosquitoes. Indian J. Med. Res., v. 115, p. 
144-148, 2002.
AVISO IMPORTANTE
6. SIMIZU, B. et al. Structural proteins of chikungunya virus. J. Virol., v. 51, n. 1, p. 254-
258, 1984.
Limite de temperatura 
Temperature range
Limite de temperatura
Fabricado por
Manufactured by
Fabricado por
REF
Número do catálogo
Catalog Number
Número del catálogo
LOT
Número do lote 
Lot Number
Número del lote
Proteger do calor
Keep awayfrom sunlight
Proteger del calor
IVD
Produto diagnóstico in vitro
For in vitro diagnostic use only
Produto diagnóstico in vitro
O conteúdo é suficiente para (n) testes
Quantity sufficient for (n) tests 
O contenido es suficiente para (n) testes
Data limite de utilização
Expiration date
Fecha de la caducidad
Consultar instruções para uso
See instructions for use
Consultar las instrucciones para el uso
2
Uso único
Single use
De un solo uso
SIMBOLOGIA
I Edição: Rev. 02/2020
22
0
22
5
758
763
27
758
785
NegativoPositivo
Positivo
Negativo
Kit Comercial
(ELISA) Resultados
Totais
Resultados Totais
Imuno-Rápido
Chikungunya IgG/IgM
Comparativo Chikungunya IgG
22
0
22
16
747
22
38
747
763
NegativoPositivo
Positivo
Negativo
Kit Comercial
(ELISA) Resultados
Totais
Resultados Totais
Imuno-Rápido
Chikungunya IgG/IgM
Comparativo Chikungunya IgM
	Página 1
	Página 2