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IDENTIFICAÇÃO DE CARBOIDRATOS-REO4

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IDENTIFICAÇÃO DE CARBOIDRATOS
1
Roteiro da Aula Prática
	No capítulo 2 da apostila de Bioquímica Experimental estão descritos de forma detalhada os experimentos para a execução da prática de Identificação de Carboidratos. 
	Os carboidratos utilizados nos testes são: arabinose, glicose, frutose, sacarose e amido. O objetivo da prática é identificar esses carboidratos através da realização de testes específicos (para um carboidrato) ou gerais (para um grupo de carboidratos). 
	As etapas do trabalho prático foram executadas por mim e fotografadas para um melhor entendimento da identificação. Posteriormente vocês devem responder as perguntas relacionadas a esta prática na Atividade 4, que deve ser entregue no Campus Virtual até 30/01/2021 às 12 h.
		
Bom trabalho!!!
2
Carboidratos testados na aula prática
Arabinose
Glicose
Frutose
Sacarose
Amilose
3
	As cinco soluções dos carboidratos foram rotuladas ao acaso como sendo A, B, C, D e E. Através da aplicação de testes específicos e gerais, vocês deverão identificar cada solução de carboidrato. 
4
Testes específicos e gerais
5
	Serão realizados cinco testes com cada um dos carboidratos utilizando as soluções acima. 
1) Teste do Iodo
	Utilizado para identificar homopolissacarídeos. Estes polissacarídeos formam com o iodo um complexo colorido.
6
Cada solução de carboidrato foi pipetada e transferida para os tubos de ensaio.
Foi adicionado o reagente de lugol (iodo) em cada tubo de ensaio.
7
- Apenas a solução de carboidrato D deu resultado positivo.
8
	Carboidrato	Teste do Iodo				
	A	-				
	B	-				
	C	-				
	D	+				
	E	-				
	Para uma melhor identificação das soluções de carboidratos, iremos construir uma tabela com o resultado de cada teste. Sinal ( - ) significa que o resultado é negativo para o teste em análise e sinal ( + ) significa que o resultado é positivo para o teste em análise. 
9
2) Teste de Molisch
	Identifica carboidratos com estruturas contendo 5 ou mais átomos de carbono. 
	Neste teste se utiliza o ácido sulfúrico, que desidrata as pentoses formando furfurais e as hexoses formando hidroximetilfurfurais.
Hexose e piranose
Hexoses na presença de ácido sulfúrico são desidratadas a HIDROXIMETILFURFURAL
10
Pentoses na presença de ácido sulfúrico são desidratadas a FURFURAL
Pentose e furanose
Hexose e furanose
11
12
O reagente de Molisch contém a-naftol, que reage com os furfurais formando um produto roxo/marrom.
Cada solução de carboidrato foi pipetada e transferida para os tubos de ensaio;
Foi adicionado o reagente de Molish em cada tubo de ensaio;
13
Foi pipetado o ácido sulfúrico concentrado em cada tubo de ensaio.
Todas as soluções de carboidrato deram resultado positivo;
A intensidade da coloração variou em decorrência da concentração de carboidratos em cada solução.
14
	Carboidrato	Teste do Iodo	Teste de Molisch			
	A	-	+			
	B	-	+			
	C	-	+			
	D	+	+			
	E	-	+			
Completando a Tabela !!!!!!!!
15
3) Teste de Selivanof
	Utilizado para diferenciar cetohexoses de aldohexoses. As cetohexoses são rapidamente desidratadas a hidroximetilfurfural pela ação do ácido clorídrico (presente no reagente de Selivanof) durante a ebulição. O hidroximetilfurfural reage com o resorcinol (presente no reagente de Selivanof) formando um produto de condensação de cor vermelha. 
Cetohexose
HCl
Hidroximetilfurfural
Resorcinol
Furanose
16
HCl
Piranose
Reação lenta (não forma o hidroximetilfurfural)
HCl
Furanose
Não reage com o reagente resorcinol
17
	O ácido clorídrico só consegue desidratar carboidratos com estrutura furanosídica, tais como a frutose e arabinose, formando respectivamente, hidroximetilfurfural e furfural.
	O reagente resorcinol (teste de Selivanof) só consegue reagir com o hidroximetilfurfural. 
18
Cada solução de carboidrato foi pipetada e transferida para os tubos de ensaio.
Foi adicionado o reagente de Selivanof em cada tubo de ensaio;
19
Os tubos de ensaio foram levados em banho de água em ebulição por alguns minutos.
Os tubos de ensaio contendo as soluções de carboidratos B e C deram positivo para o teste de Selivanof.
20
	Carboidrato	Teste do Iodo	Teste de Molisch	Teste de Selivanof		
	A	-	+	-		
	B	-	+	+		
	C	-	+	+		
	D	+	+	-		
	E	-	+	- 		
Completando a Tabela !!!!!!!!
21
4) Teste de Bial
	As pentoses desidratam rapidamente transformando-se em furfural na presença de ácido clorídrico. 
	Na presença do íon férrico, o orcinol (reagente do teste de Bial) e furfural condensam-se rapidamente dando um produto azul. 
	O hidroximetilfurfural formado a partir das cetohexoses não reage adequadamente como os furfurais. 
	As aldohexoses desidratam muito vagarosamente.
22
23
Cada solução de carboidrato foi pipetada e transferida para os tubos de ensaio.
Foi adicionado o reagente de Bial em cada tubo de ensaio;
Os tubos de ensaio foram levados em banho de água em ebulição por alguns minutos.
24
O tubo de ensaio contendo a solução de carboidrato E deu positivo para o teste de Bial.
25
	Carboidrato	Teste do Iodo	Teste de Molisch	Teste de Selivanof	Teste de Bial	
	A	-	+	-	-	
	B	-	+	+	-	
	C	-	+	+	-	
	D	+	+	-	-	
	E	-	+	- 	+	
Completando a Tabela !!!!!!!!
26
5) Teste de Benedict
	Identifica carboidratos redutores. Os íons cúpricos estabilizados em solução por agentes complexantes (azul), são reduzidos a quente pelos grupos carbonilas das aldoses, formando um precipitado de óxido cuproso. A coloração do precipitado obtido será laranja a vermelho-tijolo. 
27
Cada solução de carboidrato foi pipetada e transferida para os tubos de ensaio;
Foi adicionado o reagente de Benedict em cada tubo de ensaio;
Os tubos de ensaio foram levados em banho de água em ebulição por alguns minutos.
28
Os tubos de ensaios contendo as soluções de carboidratos A, B e E deram positivo para o teste de Benedict.
29
	Carboidrato	Teste do Iodo	Teste de Molisch	Teste de Selivanof	Teste de Bial	Teste de Benedict
	A	-	+	-	-	+
	B	-	+	+	-	+
	C	-	+	+	-	-
	D	+	+	-	-	-
	E	-	+	- 	+	+
Completando a Tabela !!!!!!!!
30
Na Atividade 4, identifique cada solução de carboidrato, de acordo com a tabela preenchida.

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