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Fisiologia e metabolismo bacteriano Fisiologia Estudo dos processos vitais Exigências nutricionais dos microrganismos Todos os organismos vivos necessitam de compostos para sua nutrição, crescimento e multiplicação. Esses compostos são utilizados para a formação dos constituintes celulares e na obtenção de energia. Reações Metabólicas Fisiologia Bacteriana Essas necessidades específicas são dependentes de informações genéticas para cada espécie bacteriana. Algumas espécies com vasta flexibilidade nutricional, como as Pseudomonas, são capazes de sintetizar muitos de seus metabólitos a partir de precursores simples, enquanto outras espécies são mais exigentes, como as Porphyromonas e Treponemas, que necessitam de nutrientes complexos para o crescimento e reprodução. É necessário o conhecimento da fisiologia, bioquímica e nutrição microbiana para compreender os efeitos do mundo microbiano na saúde humana. Nutrição dos microrganismos Os microrganismos necessitam de um ambiente propício com todos os constituintes físicos e químicos necessários para seu crescimento. As substâncias ou elementos retirados do ambiente são utilizadas como blocos para a construção da célula. Nutrientes Crescimento Divisões celulares Nutrientes As substâncias ou elementos retirados do ambiente e usados para construir novos componentes celulares ou para obter energia são chamados nutrientes. Os nutrientes podem ser divididos em duas classes: macronutrientes e micronutrientes. Ambos os tipos são imprescindíveis, mas os primeiros são requeridos em grandes quantidades por serem os principais constituintes dos compostos orgânicos celulares e / ou serem utilizados como combustível. Fisiologia das bactérias As células procarióticas são compostas por água, macromoléculas, apresentando também uma menor quantidade de outros compostos orgânicos e íons. Os precursores das macromoléculas podem ser retirados do meio ambiente ou ser sintetizados pelas bactérias a partir de compostos mais simples. Macronutrientes Carbono está presente na maioria das substâncias que compõem as células. As bactérias podem utilizar o carbono inorgânico existente no ambiente, na forma de carbonatos ou de CO₂ como única fonte de carbono. São neste caso chamadas de autotróficas. Os microrganismos que obrigatoriamente requerem uma fonte orgânica de carbono são denominados heterotróficos e as principais fontes, são os carboidratos. Nitrogênio é componente de proteínas e ácidos nucléicos, além de vitaminas e outros compostos celulares. Está disponível na natureza sob a forma de gás (N₂) ou na forma combinada. Sua utilização como N₂ é restrita a um grupo de bactérias cujo principal habitat é o solo. Na forma combinada, o nitrogênio é encontrado como matéria inorgânica (NH₃ , NO₃ , etc.) ou matéria orgânica: aminoácidos, purinas e pirimidinas. Enxofre constitui parte das várias coenzimas e é encontrado nas cadeias laterais das proteínas; Fósforo é necessário como componente do ATP, dos ácidos nucleicos e de coenzimas como NAD, NADP e flavinas. Oxigênio é requerido na forma molecular como aceptor final na cadeia de transporte de elétrons aeróbia. Também é elemento importante em várias moléculas orgânicas e inorgânicas. Hidrogênio como componente muito frequente da matéria orgânica e inorgânica, também constitui um elemento comum de todo material celular. Micronutrientes Processo de nutrição em Procariotos Os microrganismos exibem os mais diversos mecanismos nutricionais. A nutrição ocorre predominantemente pela absorção, através da oxidação de substâncias com alto valor energético, preferencialmente os açúcares. 1) Nutrição em Gram positivos Estas bactérias sintetizam uma série de exoenzimas, as quais são liberadas no meio, clivando os nutrientes, que são captados por proteínas transportadoras. 2) Nutrição em Gram negativos Devido à presença de uma membrana externa (LPS), as bactérias Gram negativas apresentam um grande número de porinas associadas à camada lipopolissacarídica, e que permitem a passagem de moléculas hidrofílicas, de baixa massa molecular. No espaço periplasmático dessas células, são encontrados proteases, fosfatases, lipases, nucleases e enzimas de degradacão de carboidratos. FONTES DE CARBONO E ENERGIA PARA O CRESCIMENTO BACTERIANO As bactérias, de acordo com a fonte de carbono e de energia que utilizam, podem ser classificadas em diferentes tipos nutricionais: Carbono Energia Heterótrofos Autótrofos Quimiotrófico Fototrófico Microrganismos que utilizam carbono orgânico Microrganismos que utilizam carbono inorgânico (CO₂) Microrganismos que utilizam energia radiante (luz) Microrganismos que utilizam energia química (compostos químicos) Bactérias Autotróficas Fotossintetizantes Quimiossintetizantes Heterotróficas Saprófitas / decompositoras Parasitas / patogênicas Heterotróficas Fermentação Respiração celular Metabolismo Necessidades metabólicas: Requer fonte de energia e a matéria prima para a construção de proteínas, das estruturas e das membranas que perfazem a estrutura e o maquinário bioquímico da célula. As bactérias precisam obter ou sintetizar os aminoácidos, os carboidratos e os lipídios. O requisito mínimo para o crescimento consiste em fontes de carbono, nitrogênio, energia, água e vários íons O ferro é tão importante, que muitas bactérias secretam proteínas especiais (sideróforos) para capturar ferro de soluções diluídas. O gás oxigênio, apesar de essencial para o hospedeiro humano, é de fato um veneno para muitas bactérias, as chamadas de anaeróbias obrigatórias. Outros, requerem de oxigênio para o crescimento, chamados de aeróbios obrigatórios. No entanto, a maioria é anaeróbias facultativas. O metabolismo e a conversão de energia Toda célula requer um fornecimento de energia constante pra viver ATP Derivado da quebra controlada de vários substratos orgânicos (carboidratos, lipídios e proteínas). Trifosfato de adenosina os fosfatos negativamente carregados se repelem são mantidos unidos por ligações de alta energia a ruptura das ligações para eliminar os fosfatos libera energia ATP alta energia ADP baixa energia VIAS ANABÓLICAS E CATABÓLICAS Dentro da célula bacteriana ocorrem reações químicas catalisadas por enzimas. O conjunto de transformações da matéria orgânica é denominado METABOLISMO e compreende basicamente dois processos: Construção de moléculas orgânicas complexas a partir de moléculas simples, com gasto de energia. Ex.: formação das proteínas. Quebra de compostos orgânicos complexos em compostos mais simples, com liberação de energia. Ex.: Degradação do açúcar Catabolismo Anabolismo O processo metabólico começa, geralmente, no ambiente extra celular, com a hidrólise de grandes macromoléculas por enzimas específicas. As moléculas menores produzidas são transportadas através das membranas celulares para dentro do citoplasma, por mecanismos de transporte ativos ou passivos, específico para o metabólito. Esses mecanismos utilizam carreadores específicos ou proteínas de transporte da membrana para ajudar a concentrar os metabólitos provenientes do meio externo. Estes são convertidos por uma ou mais vias para um intermediário universal comum, o ácido pirúvico. A partir desse ácido os carbonos podem ser canalizados para a produção de energia ou síntese de novos carboidratos, aminoácidos, lipídios e ácidos nucleicos. Concentram e formam o ácido pirúvico!!! Respiração Celular Respiração: atuam aceptoresexternos de elétrons (fosforilação oxidativa) Podendo ser: Aeróbia: o aceptor externo é o oxigênio Anaeróbia: aceptores diferentes do oxigênio (nitrato, sulfato, carbonato, ...) Fermentação: ocorre na ausência de aceptores externos de elétrons (fosforilação a nível de substrato) Respiração aeróbia É o procedimento mais comum às células e compreende 3 etapas: 1) Piruvato (glicólise/ glicolítica quando o substrato é a glicose) 2) Ciclo do ácido cítrico (ciclo de Krebs) 3) Cadeia respiratória A D P A D P A T P Metabolismo da Glicose Glicolítica via mais comum para conversão da glicose em piruvato. Aeróbia Anaeróbia Glicose Glicose – 6 - fosfato ATP Frutose – 6 - fosfato ATP ATP Frutose –1, 6 - difosfato Diidroxiacetona Gliceraldeído ADP ADP ADP Piruvato A T P A T P Respiração Celular C6H1206 (glicose) Gasto de 2 ATP 2 C3H4O3 + 4 ATP (ácido pirúvico) O ciclo do ácido cítrico Ocorre no citoplasma (procariotos) e nas mitocôndrias (eucariotos) Além do papel-chave nas reações catabólicas, é importante nas reações biossintéticas. Os intermediários são desviados para vias biossintéticas quando necessário: Exemplos: Oxalacetato: precursor de aminoácidos Succinil-CoA: formação de citocromos e da clorofila, entre outros Acetil-CoA: biossíntese de ácidos graxos Cadeia Respiratória 32 ATPs FERMENTAÇÃO É o processo de degradação incompleta de substancias orgânicas com liberação de energia e realizada principalmente por fungos e bactérias. Existem diversos tipos de fermentação, que variam quanto ao produto final. No processo de fermentação o aceptor final de hidrogênios é o produto final. Observação: a composição elementar dos produtos de fermentação deve ser idêntica a dos substratos Fermentação Alcóolica Fermentação Láctica C6H12O6 2C3H6O3 Fermentação Alcóolica Produtos Finais: etanol, CO₂ e 2 ATPs Realizada por leveduras que é utilizada na produção pouco eficaz no que diz respeito à liberação de energia, pois uma molécula de glicose só rende 2 ATPs Saccharomyces cerevisiae Fermentação Láctica Realizada por bactérias do leite que é empregada na preparação de iogurtes e queijos. Também ocorre em nossos músculos em situações de grande esforço físico. Também rende 2 ATPs por molécula de glicose. O sabor azedo do leite fermentado se deve ao ácido lático formado e eliminado pelos lactobacilos. A acidificação do pH causado pelo ácido lático provoca a coagulação das proteínas do leite e a formação do coalho, usado na fabricação de iogurtes e queijos. Exercício 1) Diferencia bactérias gram-negativas de gram-positivas. 2) O que fornece a coloração azulada as bactérias gram- positivas pós teste de coloração de gram? 3) O que são nutrientes e quais os dois tipos principais para as bactérias? 4) Quais são as vias metabólicas? 5) Quais as etapas da respiração celular e descreva como você entendeu. 6) Qual a diferença entre fermentação e respiração celular? Próximo assunto: Genética e reprodução microbiana!!
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