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Mariela Nobre D4541j3 Amostragem e técnicas de amostragem Amostra: porção limitada de material selecionado, para ter as características de um conjunto. Amostragem: é o processo do conjunto de etapas operacionais, até obter o protocolo de uma mostra necessária para analise. Fatores importantes para amostragem • Proveniência do material em teste: se ele é um tamanho unitário, qual a proveniência do material, história prévia, se o material é homogêneo e o custo do mesmo. • Natureza do lote: embalado, granel, tamanho e divisão em sub lotes. • Finalidade do material: aceitação ou rejeição, avaliar a qualidade média e determinação da uniformidade. • Procedimentos testados: procedimentos destrutivos ou não destrutivos, o curso e o tempo da análise. Coleta de amostra: tipo de amostra que deve ser feita. Operações: • Coleta amostra bruta • Preparar para amostra de laboratório • Preparar amostra pra ser analisada Tipos de amostras: • Sólidas: moídas e trituradas por ser diferentes em textura, densidade e tamanho de partículas. • Fluidas: coletadas do alto, meio e fundo, após agitação e homogeneização. Quarteamento (manual): • Colocar a amostra sobre uma superfície plana, misturar bem e espalhar em formando um quadrado. Equipamentos • Alimentos líquidos: misturar bem o líquido no recipiente por agitação, por inversão e por repetida troca de recipientes. Retirar porções de líquido de diferentes partes do recipiente, do fundo, do meio e de cima, misturando as porções no final. • Alimentos Semi-sólidos As amostras devem ser raladas e depois pode ser utilizado o quarteamento • Alimentos Úmidos A amostra deve ser picada ou moída e misturada; e depois, se necessário, passar pelo quarteamento, para somente depois ser tomada a alíquota suficiente para a análise. Cinzas Classificados como resíduos minerais fixo ou material mineral, onde indicam o teor de minerais totais presentes em um alimento. As cinzas de um alimento constituem os resíduos inorgânicos após a queima de matéria orgânica. As cinzas são constituídas de: • Grandes quantidades: K, Na, Ca e Mg • Pequenas quantidades: Al, Fe, Cu e Zn • Traços: F, I e Ar Os elementos minerais se apresentam na cinza sob forma de óxidos, sulfatos, fosfatos, silicatos e cloretos, dependendo das condições de incineração e da composição do alimento. DETERMINAÇÃO DA PUREZA E VERIFICAÇÃO DA ADULTERAÇÃO DE AMOSTRAS. Três métodos importantes: - CINZA SOLÚVEL E INSOLÚVEL EM ÁGUA: métodos muito utilizados na determinação da quantidade de frutas em geleias e conservas. - ALCALINIDADE DA CINZA: as cinzas de produtos de frutas e vegetais são alcalinas, A alcalinidade das cinzas deve-se á presença de sais ácidos fracos, como o cítrico, pois durante a incineração são convertidos em carbonatos correspondentes. Essa técnica é utilizada para verificar adulteração em alimentos de origem vegetal ou animal. - CINZA INSOLÚVEL EM ÁCIDO: essa determinação é importante para a verificação da adição de matéria mineral a alimentos. Ex: sujeira e areia em temperos Cinzas secas: são obtidas da queima total de matéria orgânica de um alimento em matéria inorgânica. As cinzas secas são obtidas por incineração e carbonização. As cinzas úmidas são utilizadas para a determinação da composição individual da cinza. A determinação de cinzas úmidas ocorre por meio de ácidos (sulfúrico, nítrico e perclórico) e agentes oxidantes. Carboidratos São biomoléculas chamadas de hidrato de carbono. Fontes de energia para as células. Funções • Energética • Possui metabolismo adaptado • Apresentam função estrutural nas membranas plasmáticas das células. Carboidratos podem ser classificados em três grupos de acordo com o grau de polimerização: Monossacarídeos: São compostos que não podem ser hidrolisados a compostos mais simples e compreendem monômeros dos carboidratos. Possuem apenas um grupo aldeído ou cetona Principais monossacarídeos (ex.: glicose, frutose, galactose). Polissacarídeos: São formados pela união de varias moléculas de monossacarídeos, sofrem hidrolise, quando isso acontece produzem um numero grande de unidades de monossacarídeos. Os principais polissacarídeos são o amido e a celulose. Oligossacarídeos: Oligossacarídeos são açucares, formados pela união de dois a seis monossacarídeos, geralmente hexoses. Dissacarídeos: Os dissacarídeos, também chamado de açúcar duplo, é uma molécula formada por dois monossacarídeos, ou açúcares simples (monossacarídeos) ligadas entre si. Três dissacarídeos comuns são sacarose, maltose e lactose. Fatores extrínsecos e intrínsecos no crescimento de microrganismos nos alimentos. Métodos de identificação clássicos e rápidos Nos alimentos estão dispostos nutrientes suficientes para sustentar o crescimento microbiano. Nesse sentido alguns fatores influenciam em prevenir ou limitar o crescimento de microrganismos em alimentos, sendo que os mais importantes são Atividade de Água (Aw), pH e temperatura. Parâmetros intrínsecos são propriedades que fazem parte do alimento, por exemplo, os tecidos são uma parte inerente do animal que, sob diversas condições, podem promover crescimento dos microrganismos. Porém é importante ressaltar que é a inter- relação entre os fatores que irá definir se haverá ou não crescimento microbiano em determinado alimento. • Atividade da água (Aw) • Potencial de Oxi- Redução Ph • Composição dos Alimentos • Substâncias Naturalmente antimicrobianas. • Interação entre microrganismos • Estruturas biológicas Parâmetros extrínsecos são aquelas propriedades do meio (processamento e armazenamento) que existem fora do alimento, que afetam ambos, os alimentos e os microrganismos que estão neles. Açúcares redutores Um açúcar redutor é qualquer açúcar que, em solução básica, apresenta um grupo carbonílico livre. Sua capacidade de redução se dá pela presença de um grupo aldeído ou cetona livre. • Os principais açúcares redutores são glicose, maltose e lactose. Açucares redutores reagem com aminoácidos na reação de Maillard, que ocorre principalmente ao cozinhar uma comida em altas temperaturas, conferindo sabor. Os níveis de açucares redutores também são importantes para identificar a qualidade de produtos como vinhos, sucos e cana-de- açúcar. Os principais açúcares redutores são glicose, maltose e lactose. A sacarose, sendo formada por glicose e frutose, pode tornar-se um açúcar redutor se sofrer ação enzimática ou hidrólise ácida, formando assim monossacarídeos. Os carboidratos capazes de reduzir sais de cobre e prata em soluções alcalinas, conhecidos como açúcares redutores, apresentam grupamentos aldeídos ou cetônicos livres. Funções nos alimentos: Os níveis de açúcares redutores nos vinhos, sucos e cana de açúcar são indicativos da qualidade desses produtos e o monitoramento destes níveis mostram efeitos positivos na qualidade de mercado. O método Lane-Enyon é tradicional para este monitoramento. Consiste em titular os açúcares redutores com cobre na solução de Fehling. • Açúcar Redutor: possui grupo cetona ou aldeído • Açúcar não redutor: não possui grupo cetona e grupo aldeído Métodos de determinação de açúcares totais e redutores e limitações: Munson- walker: método gravimétrico baseado na redução de cobre pelos gruposredutores dos açúcares. Lane- Eynon: método titrimétrico também baseado na redução de cobre pelos grupos redutores dos açúcares. Método Somogyi: Método microtitrimétrico baseado também na redução de cobre MÉTODOS CROMATOGRÁFICOS Os açúcares são determinados individualmente porque, na cromatografia, ocorre separação de todos os tipos de açúcares presentes na amostra. Os métodos cromatográficos utilizados são: • Cromatografia em papel • Cromatografia em camada delgada • Cromatografia em coluna • Cromatografia gasosa • Cromatografia líquida de alta eficiência Limites de quantificação: Nos casos da indústria alimentícia, o maior problema envolvendo o limite de quantificação de uma amostra está relacionado ao limite superior de detecção. As técnicas que utilizam calibração por meio de um padrão, como as espectrofotometrias de SN e ADNS, são limitadas pela concentração máxima da curva de calibração utilizada. Escurecimento enzimático e não enzimático: A reação de escurecimento enzimático ocorre em frutas, bebidas e vegetais (maçã, banana, batata doce, batata, abacate entre outros) é um dos problemas principais nas indústrias de alimentos. As reações de escurecimento enzimático são catalisadas por enzimas chamadas polifenoloxidases (PPOs) e peroxidases (PO), essas enzimas (PPO) catalisam a oxidação enzimática de compostos fenólicos, presentes naturalmente em vegetais em ortoquinona. A reação do escurecimento enzimático ocorre pelo rompimento da célula do tecido vegetal, esse processo ocorre quando algum alimento é cortado, triturado etc. O escurecimento enzimático pode ser controlado por: • Remoção do oxigênio • Reagentes químicos • Agentes redutores • Baixa temperatura • Redução do pH Escurecimento não enzimático: As reações de escurecimento não enzimático envolvem açúcares ou compostos relacionados com açúcares. O processo de CARAMELIZAÇÃO é um exemplo de técnica na preparação do alimento. Processo de caramelização Reações podem ocorrer com açúcares sem a presença de aminoácidos ou proteínas. Caramelização consiste no aquecimento do açúcar em temperatura acima de 120 graus, levando a desidratação e geração de duplas ligações com formação de anéis, se condensam e formam a coloração e odor de caramelo. Amido O amido é um polímero (polissacarídeo) encontrado nos vegetais que possuem função de reserva. A obtenção do amido é por meio das sementes de cereais como: milho, arroz, raízes e tubérculos. O grânulo do amido é constituído por uma mistura de dois polissacarídeos: • amilose(estrutura linear) • amilopectina(Ramificada). A amilopectina constitui a fração ramificada do amido, constitui 75% presente no amido. Durante o cozimento, a amilopectina absorve muita água e promove o inchamento possibilitando maior viscosidade dessa suspensão. Gelatinização: Ao aquecer estes grânulos de amido em meio aquoso ocorre em sua estrutura o rompimento das ligações de hidrogênio (interação das moléculas de água com as hidroxilas da amilose e amilopectina) estabilizadora da estrutura cristalina interna do grânulo, quando certa temperatura é atingida conforme o tipo de grânulo. Amido resistente O amido resistente são amidos não digeridos e absorvidos pelo intestino delgado. Com suas particularidades físicas químicas, o amido resistente é classificado como fibra alimentar. Fibras As fibras alimentares são compostas por polissacarídeos de origem vegetal com a presença de outras substâncias como proteínas de parede celular, lignina, compostos fenólicos, fitatos, oxalatos e outros. A fibra alimentar também é denominada fibra dietética. Funções: • Reduzem o colesterol • Aumentam saciedade • Função reguladora do sistema digestivo Fibras solúveis: dissolvem-se na água e apresentam efeitos metabólicos no trato gastrintestinal: Elas servem de substrato para a microflora naturalmente presente no intestino, formam ácidos graxos de cadeia curta e regularizam o trânsito intestinal. Além disso, a absorção de glicose e colesterol é baixa. As fibras solúveis formam uma camada superficial suave ao longo da mucosa do intestino delgado para servi de barreira na absorção de alguns nutrientes. • As fibras solúveis: a pectina, gomas, mucilagem, beta, glucana, e algumas hemiceluloses são encontradas em frutas, verduras, aveia, cevada, leguminosa (feijão, lentilha, soja, grão de bico). Fibras insolúveis: Não se dissolvem em água e apresentam efeito mecânico no trato gastrintestinal. A ação fundamental destas fibras é a aceleração do trânsito intestinal. Isto é proveniente devido à extrema capacidade de detenção de água, absorvendo a água disponível. • As fibras insolúveis: lignina, celulose, e a maioria das hemiceluloses, estão presentes nos alimentos como: verduras, farelo de trigo, cereais integrais (arroz, pão, torrada). Proteínas É formado por unidades básicas de aminoácidos unidos por ligação peptídica, o que caracteriza polímeros de alto peso molecular. Funções das proteínas • As proteínas têm uma grande importância no esqueleto celular e estruturas de sustentação, como colágeno, elastina (resistência) e queratina (função estrutural) • São catalisadoras de diversas reações químicas do nosso organismo (enzimas) • Transporte de oxigênio para o sangue e músculos por hemoglobina e mioglobina • Sistema imune no combate a infecções bacterianas, como imunoglobulinas; • Hormonal (insulina) Desnaturação da proteína: O processo de perda da conformação de sua molécula e consequentemente perda da sua funcionalidade e atividade biológica. A proteína desnaturada é menos solúvel, aumentando a viscosidade no alimento. A desnaturação das proteínas pode ser provocada por diversos fatores como • Calor, alterações de ph, desidratação e concentrações salinas. As propriedades funcionais das proteínas estão relacionadas as propriedades físico-químicas que afetem o processamento ou as funções do produto final. • HIDRATAÇÃO: a propriedade de hidratação depende da sua conformação e composição, portanto quanto mais aminoácidos hidrofóbicos presentes menor capacidade de hidratação • Emulsificação: As proteínas são excelentes agentes emulsificantes por possuírem em sua estrutura uma parte hidrofílica e outra hidrofóbica. Reduzindo a tensão superficial e interagindo na interface da emulsão • Viscosidade: A viscosidade esta diretamente ligada com o diâmetro da partícula que dependem das características de cada proteína ( massa, volume, carga elétrica). A perda da viscosidade é afetada pela diminuição do diâmetro das partículas. • Geleificação: consiste na formação de uma rede proteica ordenada a partir de proteínas desnaturadas Lipídeos Lipídios são substâncias caracterizadas por sua insolubilidade em água e solubilidade em solventes orgânicos como: éter, clorofórmio, benzeno e outros. São componentes do tecido adiposo, juntos com proteínas e carboidratos, constituindo componentes estruturais das células vivas. Glicerídeos são ésteres de glicerol e dos ácidos graxos, constituindo óleos e gorduras. ➢ Lipídeos Apolares ou Neutros: Os ésteres de ácidos graxos com álcoois: glicerídeos, ceras, carotenoides, terpenóides e esteroides. ➢ Lipídeos Polares: a união do éster de ácido graxo e álcoois: esfingolipídios, cerebrosídeos,fosfolipídios e outros lipídeos complexos. ÁCIDOS GRAXOS: Os ácidos graxos presentes nos alimentos esterificados com moléculas de glicerol, ácido fosfatídico ou esteróides. Os ácidos graxos na forma livre estão presentes in natura ou processados, sendo a presença de ácidos graxos livres um indicativo de oxidação lipídica. ÁCIDO GRAXO SATURADO: são monocarboxílicos de cadeia saturada ( sem duplas ligações). Quanto maiores às cadeias, maior o peso molecular o ponto de fusão e a Insolubilidade. Ácidos Graxos insaturados: Ácidos graxos insaturados possuem duplas ligações. LIPÓLISE A reação de lipólise é uma reação que ocorre com a hidrólise de ligações éster de lipídeos , em consequência da ação enzimática (lipases e fosfolipases) ou por aquecimento da gordura na presença de água, em ambos os casos ocorre liberação de ácidos graxos livres suscetíveis a oxidação. OXIDAÇÃO LIPÍDICA: O processo de oxidação pode acontecer por via não enzimática ( fotoxidação ou autoxidação) ou via enzimática (lipoxigenase). Exercícios de Bromatologia Atividade amostragem: 1- Monte um fluxograma Coleta → Redução → carnes e peixes → picar e quartear → analise Coleta → Redução → Frutas → picar e quartear → analise Coleta → Redução → Queijos → Ralar e quartear → analise Coleta → Redução → molhos → liquidificar e quartear → Analise Coleta → Redução → pudim → liquidificar e quartear → analise 2- Leitura dos artigos e identificação das etapas do processo de amostragem Amostragem são etapas que comprovam que a amostra está adequada. Primeiro se coleta a amostra, reduz a amostra bruta por equipamento ou manualmente, quarteja-se e analisa-se posteriormente fazendo desintegração. Exercício de Teor de umidade Calcule a porcentagem de umidade e sólidos totais % umidade= PA-PAS X 100/PA Sólidos totais: PAS X 100/PA % umidade=15-5 X 100/15 % umidade= 66,667 Sólidos totais 5 x 100/ 15 Sólidos totais: 33,333 Exercício de cinza Diferencie e identifique quais os tipos de cinzas identificas nos artigos: • Artigo 1: Apresenta cinzas secas, o equipamento utilizado foi o Mufla e depois a estufa. • Artigo 2: cinzas úmidas , foi utilizado equipamentos mais tecnológicos e modernos. A partir do artigo 1, identifique qual a funcionalidade da técnica aplicada conforme a matéria prima empregada. • A técnica da utilização mufla é aplicada na determinação de cinzas secas, exige uma menor supervisão, utiliza temperatura alta e é uma técnica mais simples. • A) Descreva o passo a passo da técnica laboratorial utilizada para obtenção de cinzas com base nos itens explicados em aula • Para a obtenção de cinzas úmidas: mistura-se ácido nítrico e perclórico na porção de 3:1, coloca-se um grama de amostra no tubo de digestão, adicionando 15ml de solução nitroperclórica), aquece-se a 120 graus por 1 hora até formar solução límpida, transfere-se para um balão volumétrico e completa-se com água deionizada. No equipamento de analise o conteúdo é succionado e vaporizado. O equipamento mostra o resultado • Para a obtenção de cinzas secas: pesar 2,5g de amostra, incinerar o cadinho em Mufla a 550 graus por 1 a 2 horas, colocar a amostra em Mufla por 1 hora para a carbonização em 250 a 300 graus, aumentar a temperatura até 550 gradativamente, deixar por 6 horas para a formação de compostos inorgânicos, desligar para esfriar, retirar da Mufla o cadinho com cinzas e colocar no dessecador, e posteriormente é pesado o cadinho com as cinzas. É feito a conta para a determinação das cinzas. B) Calcule a porcentagem de cinzas da base úmida % cinzas = C – A X 100 / B % cinzas = 28,5939 – 28,5053 x 100 / 5,2146 % cinzas = 1,6990 C) Calcule a porcentagem das cinzas em base seca sabendo que a amostra possui umidade de 11,5% • 1,699 – 100% • X – 11,5% • X = 0,1953 • Cinza em base seca: 1,5036% Exercícios de contaminação: As doenças causadas pela Salmonella, mecanismo de transmissão, os alimentos associados, sintomas e diagnóstico. A Salmonella pode causar dois tipos de doença, dependendo do sorotipo: salmonelose não tifóide e febre tifoide. A transmissão se dá com a ingestão de alimentos contaminados com fezes de animais a bactéria é encontrada normalmente em animais como galinhas, porcos, répteis, anfíbios, vacas e até mesmo em animais domésticos, como cachorros e gatos. Dessa forma, qualquer alimento que venha desses animais ou que tenha entrado em contato com suas fezes podem ser consideradas vias de transmissão da Salmonella (Salmonellose). Os principais sinais e sintomas da infecção por Salmonella (salmonelose não tifoide) são: Diarreia, vômitos, febre moderada, dor abdominal, mal-estar geral, cansaço, perda de apetite e calafrios. Os alimentos que têm sido associados incluem carnes, aves, ovos, leite e produtos lácteos, pescados, temperos, molhos de salada preparados com ovos não pasteurizados, misturas de bolo e sobremesas que contêm ovo cru. O diagnostico é feito por isolamento do agente nas fezes ou vômito ou ainda em amostras dos alimentos suspeitos consumidos. As fezes devem ser coletadas durante a fase aguda, antes do tratamento com antibióticos. Após a confirmação do diagnóstico, o médico pode indicar o tratamento mais adequado, conforme cada caso. Conforme a explicação em aula. Leia os fragmentos de artigos classifique como fatores extrínsecos e intrínsecos. artigo 1: Fatores extrínsecos: Não foi abordado Fatores intrínsecos: constituintes antimicrobianos dos alimentos (óleo essencial do cravo-da-índia - eugenol), atividade antioxidante. artigo 2: Fatores intrínsecos: Não foi abordado Fatores extrínsecos: produção, armazenamento, transporte e embalagem, temperatura. Procure em sites de bases científicas (Pubmed, scielo, webscience e outros) os itens de parâmetros Íntrínsecos e extrínsecos não abordados anteriormente no desenvolvimento de microorganismos. • Fatores intrínsecos: pH, atividade de água, composição química e suas interações, nutrientes e estruturas biológicas dos alimentos, microbiota dos alimentos. • Fatores extrínsecos: umidade do ar, composição química do ambiente, oxigênio presente no meio ambiente, presença de gases no meio.
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