AULA 4 Coloração de lâminas

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Análises Citológicas e Biotecnologia
(Prática)
Prof. Dr. José Roberto Fogaça de Almeida
AULA 4 – Coloração de lâminas
Objetivos de Aprendizagem
Compreender a coloração de lâminas;
Termos acidófilos e eosinófilos;
Citologia cervico vaginal
A citologia diagnóstica, como nós conhecemos atualmente, iniciou-se de uma 
investigação das mudanças hormonais do epitélio vaginal durante o ciclo 
menstrual, realizada por Stockard e Papanicolau (1917)
Geórgios Papanicolau
1883 - 1962
COLORAÇÕES
Atualmente existe uma variedade de técnicas de coloração que podem ser 
utilizadas em citologia, tanto para o processamento de rotina como para 
situações especiais como na imunocitoquímica. Para a rotina citológica, a 
coloração pelo método de Papanicolau é universalmente recomendada. 
➢ Coloração de Papanicolau;
➢ Coloração Panótica;
➢ Coloração de Hematoxilina-eosina (HE). 
O que é uma estrutura acidófila?
O que é uma estrutura basófila?
É o que tem afinidade ao corante ácido (Eosina), logo é uma 
estrutura básica.
É o que tem afinidade ao corante básico (Azul de metileno), 
logo é uma estrutura ácida.
COLORAÇÕES
COLORAÇÃO DE PAPANICOLAU
Obter boa definição de detalhes do núcleo, transparência citoplasmática e 
visualizar melhor a diferenciação celular.
É constituída por um corante nuclear natural, a hematoxilina, e dois corantes
citoplasmáticos: o orange G6 e o EA (composto por eosina, verde luz ou
brilhante e pardo de Bismarck).
Os corantes de Papanicolaou proporcionam excelente demonstração dos
detalhes morfológicos do núcleo, promovem boa transparência citoplasmática e
permitem a diferenciação dos tipos celulares.
Hematoxicilina de Harry (Corante Azul): Cora o núcleo de forma basofílica ou
cianofílico;
Eosina (EA36) (Corante violeta): Cora o citoplasma de forma basofílica e
acidofílica;
Orange G (Avermelhado/laranja): Cora o citoplasma de forma acidofílica;
Após a confecção da lâmina é necessário a fixação da lâmina, visando 
preservar a morfologia celular (solução alcoólica de polietilenoglicol a 
2% - distancia mínima de 15 cm, e máxima de 30 cm)
COLORAÇÃO DE PAPANICOLAU
- As imersões no inicio auxilia a retirada de do polietilenoglicol da fixação da lâmina e para a
desidratação da lâmina;
- Hematoxicilina de Harry faz a coloração do núcleo;
- Eosina e Orange G faz a coloração do citoplasma (De acordo com o seu pH);
- Xilol faz o clareamento da lâmina, melhorando a visualização das células. Ocorre a substituição da
água da célula por xilol “mumificação”
https://www.youtube.com/watch?v=K0Gs_oSJEz0
https://www.youtube.com/watch?v=6o7Fi0-tSf4
COLORAÇÃO DE PAPANICOLAU
É necessário a fixação da lâmina para 
proteger o material da dessecação e 
da oxidação, prevenindo o 
desbotamento
Utilizado o verniz ou esmalte
COLORAÇÃO DE PAPANICOLAU
COLORAÇÃO DE HEMATOXILINA-EOSINA (HE) 
Hematoxicilina de Harry (Corante Azul): Cora o núcleo de forma basofílica ou
cianofílico;
Eosina (Corante avermelhado): Cora o citoplasma de forma acidofílica;
Geralmente utilizada na coloração de cell blocks (punções) e esfregaços, cora 
o citoplasma em rosa e o núcleo em azul, à semelhança do que se observa nos 
esfregaços histológicos. Apesar de conter corantes comuns na coloração 
Papanicolau, o citoplasma não fica tão transparente e o núcleo não é tão bem 
definido
COLORAÇÃO PANÓTICA
Também é uma técnica rápida aplicada no estudo imediato de amostras obtidas
por punções e esfregaços sanguíneos que estabelece não só um diagnóstico de
urgência, mas também avalia a celularidade do material.
3 corantes (1 - Metanol; 2 - Eosina; 3 – Azul de Metileno)
➢ 10 segundos em cada
COLORAÇÃO PANÓTICA
O que é uma estrutura acidófila?
O que é uma estrutura basófila?
É o que tem afinidade ao corante ácido (Eosina), logo é uma 
estrutura básica e se cora de Vermelho/Laranja
Ex: Citoplasma do Eosinófilo, Hemácias
É o que tem afinidade ao corante básico (Azul de metileno), 
logo é uma estrutura ácida e se cora de Azul/Roxo
Ex: Núcleo, Citoplasma do monócito, Neutrófilo e etc
COLORAÇÕES
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1) O que é uma estrutura basófila e acidófila?
2) Descreva os corantes do papanicolau e seu principal objetivo?
3) Qual o melhor índice citológico para avaliar a citologia hormonal?
4) Qual a diferença do perfil celular da mucosa vaginal na infância,
estrogênica, progestacional e menopausa? Porque?