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PONTIFÍCIA UNIVERSIDADE CATÓLICA DE GOIÁS – PUCGO DISCIPLINA: BIOQUÍMICA ***********************************************************************************************REAÇÃO DE CARACTERÍZAÇÃO DE PROTEÍNAS REAÇÃO DE BIURETO As proteínas são as macromoléculas mais abundantes nas células vivas. Estão presentes em todas as células e em todas as suas partes; ocorrem em grande variedade. Em uma única célula têm-se diferentes tipos de proteínas, desde peptídeos de tamanho relativamente pequeno até enormes polímeros com pesos moleculares variados. A detecção de proteínas em materiais biológicos envolve reações específicas com determinados reativos, os quais originam substâncias coloridas que absorvem luz na região visível, permitindo a sua quantificação. Dentre os métodos utilizados, situa-se o método do biureto, que é baseado na reação do sulfato de cobre em meio alcalino (reativo do biureto), com proteínas e peptídeos. O nome do método provém do fato de que a ureia aquecida dará reação positiva, com desprendimento de amônia. O reativo de biureto é uma solução de sulfato de cobre (CuSO4) e tartarato duplo de sódio e potássio (KNaC4H4O6) que ao reagir com os íons cúpricos, forma um produto de coloração violáceo. Esse reativo é utilizado na identificação de compostos proteicos, pois as ligações existentes na molécula de biureto são semelhantes às ligações peptídicas na formação de proteínas. A reação do biureto é positiva para proteínas e peptídeos com três ou mais resíduos de aminoácidos. A reação é também positiva para substâncias que contêm duas carbonilas (-CONH2) ligadas diretamente ou através de um único átomo de carbono ou nitrogênio. Dependendo da complexidade da proteína ou do peptídeo em questão, a cor do produto da reação (presença do biureto) varia substancialmente. Proteínas, normalmente, geram coloração violeta, peptídeos dão coloração rosa. Quanto maior for a quantidade de proteínas no meio, maior será a intensidade de cor. PROCEDIMENTO EXPERIMENTAL Enumerar os tubos de ensaio de 1 a 5 de acordo com a tabela abaixo: Material Tubo 1 Tubo 2 Tubo 3 Tubo 4 Água destilada 2mL - - - Leite - 2mL - - Clara de ovo - 2mL - Gema de ovo - - - 2mL Solução de Biureto 1mL 1mL 1mL 1mL Solução Hidróxido de sódio (NaOH) 1mL 1mL 1mL 1mL Observar as colorações apresentadas após o final das reações.
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