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Cultivo microbiano e meios de cultura utilizados no crescimento e manutenção dos microrganismos em laboratório Meio de cultura: Material nutriente preparado no laboratório para o crescimento de microrganismos. Algumas bactérias podem crescer normalmente nos meios de cultura, outras necessitam de meios especiais e existem aquelas que não são capazes de crescer em nenhum meio de cultura já desenvolvido. ( ex. Treponema) Microrganismos que crescem e se multiplicam nos meios de cultura são denominados “cultura”. Classificação dos meios de cultura Quanto ao estado físico Líquido Semi-sólido Sólido são os caldos, desprovidos de agar são aqueles que apresentam em sua composição até 1% de agar. são aqueles que apresentam em sua composição 1,5 a 2,5% de agar. *Agar : polissacarídeo complexo isolado de algas marinhas Simples Contém apenas componentes básicos para o crescimento de uma bactéria. Enriquecido meio que tem aumentada a sua capacidade nutricional para a bactéria pela adição de substâncias como gema de ovo, sangue, plasma, soro, leite. De uso frequente para bactérias de difícil crescimento (fastidiosas). De enriquecimento Visa inibir o crescimento de bactérias acompanhantes e favorecer o crescimento da bactéria alvo que pretende-se isolar. Ex: Caldo Rapapport Vassiliardis Quanto à finalidade e características Seletivo contêm substâncias seletivas que inibem o crescimento de certas bactérias e permitem o crescimento de outras. São meios sólidos e têm como objetivo isolar culturas puras. Diferencial Permite a diferenciação de diferentes microrganismos. Por exemplo: a diferenciação de bactérias fermentadoras e não fermentadoras da lactose no Agar EMB e Agar MacConkey. Indicadores Possuem agentes que indicam determinadas reações no meio, para a determinação do metabolismo das bactérias. EX: ferro no meio à pode indicar a produção de H2S pelo enegrecimento do meio. (sulfeto ferroso) * geralmente o agente é um indicador de pH • meios bioquímicos são geralmente indicadores De transporte São meios utilizados com a finalidade manter os microrganismos viáveis, permitindo seu crescimento em meios de cultura utilizados no laboratório. De estoque São meios utilizados com a finalidade de preservar uma cultura bacteriana pura para posteriores utilizações no laboratório. Agar TSI Diferentes tipos nutricionais dos microrganismos; Fatores necessários para o crescimento microbiano Crescimento das culturas bacterianas Controle do crescimento microbianos – Alguns fatores (físicos e químicos) que interferem no crescimento dos microrganismos http://www.ibb.unesp.br/Home/Departamentos/MicrobiologiaeImunologia/agentes-fisicos-e-quimicos-do-controle-microbiano.pdf http://www.ibb.unesp.br/Home/Departamentos/MicrobiologiaeImunologia/agentes-fisicos-e-quimicos-do-controle-microbiano.pdf Controle Microbiano Agentes Físicos Agentes Químicos Calor seco Incineração* Flambagem* Estufa ou Forno* Calor úmido Fervura Autoclavagem* Pasteurização Radiação (ionizante* e não ionizante) Pressão osmótica Baixas temperaturas Dessecação Liofilização Álcool Etílico (70%) Halogênicos Cloro Iodo ( ação sob alguns esporos) Oxidantes Água oxigenada Permanganato de potassio Antimicrobianos * Destruição total – esporos e formas vegetativas - esterilização
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