Resumo sobre meios de cultura

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Gabriela Zogbi | Medicina Veterinária | Práticas em microbiologia básica 2021.2 
Meios de cultura 
 
Introdução: 
 
Fonte: SP Labor 
Substancias ou complexo de substancias 
capazes de proporcionar aos 
microrganismos (ou células) o ambiente e 
os nutrientes necessários ao seu 
crescimento. 
Aplicações: 
Isolamento, identificação e quantificação, 
conservação de micorgranismos 
Os meios de cultura precisam ter: 
- Fonte de carbono; 
- Fonte de nitrogênio; 
- Fonte de fósforo; 
- Fonte de enxofre; 
- Fonte de sais e íons; 
- Fatores de crescimento 
Classificação quanto ao estado 
físico: 
• Líquidos (caldos): o crescimento de 
bacterias provoca turvação do meio 
• Semissólidos: o crescimento de 
bactérias ocorre no local de semeadura. 
É utilizado muitas vezes para evidenciar a 
utilidade dos microrganismos e também é 
muito utilizado na conservação de 
microrganismos 
• Sólido (ágar): o crescimento de bactéria 
leva à formação de colônias, neste meio 
o crescimento ocorre na superfície do 
meio de cultura, e as bactérias ou 
microrganismos vão crescer formando 
colônias 
Ágar: 
 ⇨ É um polissacarídeo complexo, de 
alto peso molecular, extraído das paredes 
celulares de algas marinhas dos gêneros 
Gelidium, Graciliaria e Gelidiela 
⇨ Não é metabolizado pela maioria das 
bactérias de interesse em saúde 
⇨ O ágar se liquefaz a uma temperatura 
próxima de 100ºC (temperatura de 
ebulição da água) e, ao nível do mar, 
permanece líquido ate que a temperatura 
chegue a cerca de 40ºC 
• Angelina Fanny Hesse foi a assistente 
de Robert Koch que, em 1881, propôs a 
substituição da gelatina pelo ágar para 
tornar os meios sólidos. 
Classificação quando à 
finalidade bacteriológica: 
• Básico; 
• Enriquecido 
• Seletivo 
• Diferencial 
• De enriquecimento 
• Conservante (de transporte) 
• Indicador 
Meio básico: 
⇨ Possui várias aplicações no laboratório 
de bacteriologia. É utilizado no cultivo de 
bactérias que não sejam muito exigentes 
no aspecto nutricional. Pode ser utilizado 
como base para meios enriquecidos. 
Exemplo: caldo simples, ágar simples 
Meios enriquecidos: 
É utilizado para o cultivo de 
microrganismos fastidiosos. Geralmente 
são meios básicos suplementados com 
complexos altamente nutritivos. 
Muitas bactérias crescem neste tipo de 
meio. 
 Exemplo: Caldo BHI, Calso TSA, Ágar 
BHI, Ágar Mueller Hinton, Ágar Thayer-
Martin, Ágar sangue e Ágar chocolate 
 
 
Meio seletivo: 
⇨ Permite o crescimento de um tipo de 
microrganismos e suprime o crescimento 
de outros. Tem na sua composição 
algumas substâncias que garantem esta 
seletividade, como o uso de alguns 
antibióticos, corantes ou até uma maior 
concentração de cloreto de sódio. 
Exemplos: Ágar Mac Conkey; Ágar BEM; 
Ágar SS 
Meio diferencial: 
⇨ Permite diferenciar, através da 
morfologia das colônias ou coloração do 
meio, bactérias com características 
semelhantes. 
Além disso, são formulados para 
evidenciar uma característica bioquímica 
ou fisiológica do microrganismo de 
interesse, possibilitando diferenciar suas 
colônias das dos outros microrganismos 
que se desenvolvam na mesma placa. 
Exemplo: Ágar Max Conkey; Ágar BEM; 
Ágar Chapman; Ágar sangue 
Meios seletivos e meios diferenciais são 
sempre meios sólidos. 
 
 
Meio de enriquecimento: 
⇨ Contêm nutrientes para o crescimento 
de microrganismos presentes em 
pequeno numero ou de crescimento 
lento, bem como microrganismos 
exigentes e fastidiosos. Estimula o 
crescimento diferencial de determinador 
microrganismos. Alguns meios de 
enriquecimento também podem inibir o 
crescimento de outros. Exemplo: caldo 
Rapapport-novobiocina (RVN); caldo 
selenito-cistinanovobiocina (SCN) e caldo 
tetrationato-novobiocina (TN). 
Meio conservane (transporte): 
Tem como objetivo não permitir que o 
microrganismo se multiplique 
rapidamente, e evitar a oxidação. Contêm 
substâncias redutoras que inibem as 
enzimas autolíticas e previnem os efeitos 
da oxidação. Permite o transporte do 
material até o laboratório. 
Exemplos: Meio de Stuart e Meio de Cary 
Blair 
Meio indicador: 
⇨ Possui substâncias que indicam a 
utilização de determinador substratos 
pelas bactérias. Usados em provas 
bioquímicas para identificação de 
bactérias. 
 
Meio cromogênico: 
 
Fonte: Kasvi 
⇨Tem em sua composição substratos 
cromogêniocs que são liberados após a 
hidrólise quando as bactérias semeadas 
possuem enzimas hidrolíticas especificas. 
Desta forma elas se diferenciam pela cor 
que adquirem nesse meio. 
A maioria dos meio cromogênicos é 
também seletiva (impedem o 
crescimento de outros microrganismos) e 
diferencial. 
Composição de um meio de 
cultura básico: 
Caldo simples: 
- Extrato de carne: substancias 
hidrossolúveis de tecido animal, 
carboidratos, compostos orgânicos 
nitrogenados, vitaminas, sais .................... 0,3g 
- Peptona: derivados de hidrolise de 
proteínas de origem animal ou vegetal, 
servem como fonte de nitrogênio 
orgânico e algumas vitaminas ................................ 1g 
- NaCl: manter o equilíbrio osmótico e 
também fonte de fions de Na e Cl ................. 
0,5g 
- Água destilada: solvente, umidade ................. 100 
mL 
• Para o ágar simples, acrescentar ágar-
ágar (1,5 a 2%) 
Etapas de preparo: 
1. Pesar os ingredientes e mensurar 
o volume de água; 
2. Adicionar água ao frasco 
(Erlenmeyer ou balão) e os demais 
ingredientes 
3. Completar o volume com água 
destilada 
4. Verificar e ajustar o pH (7,0); 
5. Filtrar 
6. Aquecer e fundir os componentes 
7. Autoclavar (esterilizar) – 121ºC por 
15 min (1 atm); 
8. Deixar esfriar ate 50ºC e distribuir 
assepticamente; 
9. Controle de esterilidade 
Após a distribuição, é preciso ser feito 
o controle de esterilidade: 
- Tira-se 1 ou 2 das placas ou tubos e 
leva para estufa de crescimento 
bacteriano a 37ºC. Posteriormente 
observa-se primeiramente por 24h e 
depois por 48h para verificar se não 
houve crescimento bacteriano. Caso 
não ocorra nenhum crescimento 
bacteriano, o meio é liberado para uso. 
 
Referências: 
- Anotações feitas em aula; 
- Práticas de Microbiologia – 2º edição 
– Alane Beatriz Vermelho; Antônio 
Ferreira Pereira, Rosalie Reed 
Rodrigues Coelho e Thaïs Souto-
Padrón.