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Transcrição Classes de RNA - Estruturas e funções: RNA mensageiro (mRNA) - Levam a informação genética do DNA para a síntese de proteínas nos ribossomos - Transcriptoma: todo o conteúdo de mRNA de um organismo - Em eucariotos - sintetizado como uma forma precursora chamada pré-mRNA RNA transportador (tRNA) - Funcionam como adaptadores entre os aminoácidos e códons do mRNA durante a tradução. - Cada tipo carrega um aminoácido específico para um sítio especificado por um códon de RNA RNA ribossomal (rRNA) - Componentes estruturais catalíticos dos ribossomos Pequenos RNAs nucleares (snRNA) - Componentes estruturais dos spliceossomos (remoção de íntrons) - Atuam na regulação de fatores de transcrição ou da RNA polimerase e na manutenção dos telômeros. Transcrição: Ação ou processo de passagem de informação genética do DNA para o RNA. É o processo pelo qual uma molécula de RNA é sintetizada a partir de um molde de DNA. - Através da transcrição, são sintetizados todos os tipos de RNAs da célula, ou seja, o RNA mensageiro (mRNA), o RNA ribossômico (rRNA), o RNA transportador (tRNA) e outros RNAs menores. - A transcrição ocorre a partir da informação contida na sequência de nucleotídeos de uma molécula de DNA fita dupla, sendo sempre no sentido 5' → 3'. Apenas uma das fitas do DNA, chamada de fita molde, é utilizada durante a síntese, que segue as mesmas regras de complementaridade e antiparalelismo, exceto pelo pareamento de uracila (U), ao invés de timina (T), com adenina (A). - O RNA recém-sintetizado (5' →3') é, portanto, complementar à fita de DNA que serviu de molde (3' → 5'), essa fita é chamada de fita molde ou anti-senso. A outra fita de DNA (5' →3') que tem a sequência idêntica ao do RNA transcrito, exceto por T (timina) no lugar do U (uracila) é chamada de fita codificadora ou senso Quem sintetiza o RNA? A RNA polimerase é quem promove a ligação fosfodiéster entre os ribonucleotídeos. - Trabalha na direção 5´- 3`, não necessita de iniciador (primer). - Utiliza apenas uma fita de DNA como molde. - Não utiliza de SSBs e nem topoisomerases, porque a própria RNA polimerase fica entre as fitas e a área de separação é pequena não causando tensão no resto da fita. - A própria RNA polimerase separa as fitas. Existem três tipos de RNA polimerase em eucariotos e cada uma é responsável pela produção de um tipo de RNA. - A RNA polimerase I transcreve rRNA; - A RNA polimerase II requer muitos fatores para que se possa iniciar a transcrição, e esses fatores são chamados de fatores gerais de transcrição. Ela quem faz a produção dos RNAs mensageiros. O processo de transcrição pode ser dividido em 3 partes: iniciação, alongamento e terminação. I. Iniciação - sequências especificas do DNA (promotores) sinalizam o local de formação do complexo de transcrição para iniciar a cópia das sequencias do DNA em RNA. II. Alongamento - a molécula do RNA é sintetizada. III. Terminação - a síntese do RNA é terminada em resposta a sinais específicos de terminação da transcrição (terminadores). ➢ A transcrição tem início com a abertura e a distorção de uma pequena parte do DNA feita pela enzima RNA-polimerase, que ao encontrar o promotor, fixa-se firmemente e se move expondo as bases de ambas as fitas do DNA. ➢ Em seguida, uma das duas fitas do DNA atuará como molde para a síntese do RNA. ➢ Os ribonucleotídeos são adicionados, um a um, à cadeia de RNA em crescimento, e a sequência nucleotídica do RNA é determinada pelo pareamento por complementaridade de bases com o DNA-molde. ➢ Quando um pareamento correto é feito, o ribonucleotídeo recém-chegado é ligado covalentemente à fita de RNA em crescimento por meio de uma reação catalisada enzimaticamente. ➢ A extensão da cadeia continua até que a enzima encontre um segundo sinal sobre o DNA, o terminador, onde a polimerase se detém e libera tanto o DNA-molde quanto o RNA recém sintetizado. ☄ Splicing Processo durante o qual as sequências de íntrons são removidas do RNA recém-sintetizado e as sequências de éxons são unidas umas às outras. O splicing alternativo corresponde a genes eucarióticos que são processados por splicing sob diferentes formas, cada uma delas levando à produção de uma proteína distinta. Ele permite, portanto, que diferentes proteínas sejam produzidas a partir de um mesmo gene. Término da transcrição em eucariotos: - A RNA-polimerase II produz RNAs mensageiros. *Promotor: São regiões que antecedem um gene e que contém uma sequência específica de nucleotídeos e que indicam o ponto de iniciação para a síntese de RNA. Asseguram que apenas aquelas porções da molécula de DNA que contêm um gene serão transcritos em RNA. - São ricos em A e T pois é onde começará a haver abertura das fitas de DNA pois é onde tem menos pontes de hidrogênio, para que a fita molde seja exposta e a RNA polimerase tenha acesso a ele e comece a produção. - Um promotor forte resulta num aumento de cópias produzidas *Terminador: sítio indicador onde a RNA-polimerase libera o DNA-molde e RNA obs: Nas células eucarióticas, o DNA está isolado dentro do núcleo. A transcrição ocorre no núcleo, mas a síntese de proteínas ocorre nos ribossomos que se encontram no citoplasma. Desse modo, antes que um mRNA eucariótico possa ser traduzido, ele deverá ser transportado para fora do núcleo por pequenos poros existentes no envelope nuclear. Procariotos: Em procariotos a região promotora possui uma sequência de nucleotídeos chamados consensus (todos os genes de procariotos vão apresentar uma sequência específica de nucleotídeos em uma determinada região). O fator sigma é quem reconhece a região promotora. *Região promotora de RNA mensageiro é reconhecida pelo fator sigma e faz parte da RNA polimerase única de procariotos. Diferenças entre a transcrição em procariotos e eucariotos: 1. As células eucarióticas apresentam 3 diferentes RNA polimerases e cada uma transcreve uma classe diferente de RNA e identifica um tipo diferente de promotor. Assim, um promotor genérico não pode ser descrito para as células eucarióticas. A descrição de um promotor depende se ele é identificado pela RNA polimerase I, II ou III. 2. A RNA-polimerase bacteriana é capaz de dar início ao processo de transcrição independentemente, já as RNA-polimerases de eucariotos necessitam da assistência de um conjunto de proteínas acessórias. - Entre essas proteínas acessórias se encontram os fatores gerais de transcrição, que devem associar-se a cada promotor, em conjunto com a polimerase, antes que a polimerase possa iniciar a transcrição. - A iniciação da transcrição em eucariotos deve levar em consideração o empacotamento do DNA em nucleossomos e em formas mais compactas da estrutura de cromatina. Embora consigam sintetizar RNA a partir de nucleotídeos livres, as RNA polimerases sempre precisam de proteínas acessórias, chamadas de fatores de transcrição, que auxiliam o início da transcrição.- São estes fatores que identificam ao longo de um gene as sequências específicas no DNA que indicam o local de início da transcrição, ou seja, a partir de qual base o gene deve ser copiado em RNA. Transcrição em procariotos - resumo: 1- O reconhecimento da região promotora pelo fator sigma 2- A RNA-polimerase abre as fitas de DNA para expor o molde. 3- Inicia-se a síntese de uma pequena molécula de RNA 4- quando essa pequena molécula atinge cerca de 10-20 nucleotídeos ocorre a liberação do fator sigma para que ele possa se unir a outras regiões beta e alfa de outras RNA polimerases, sintetizando outros genes. 5- O término da transcrição em procariotos acontece assim que uma estrutura chamada de grampo ou alça é formada - pontes de hidrogênio entre as bases nitrogenadas de uma mesma molécula se unem, formando essa estrutura similar a um grampo-. Essa estrutura desestabiliza a união entre a RNA-polimerase, o DNA e o RNA , fazendo com que a RNA - polimerase se solte juntamente com o RNA, e que aconteça o fechamento das fitas do DNA. Finalizando a produção do RNA. *Devido a ausência de uma membrana nuclear nos procariotos, assim que o RNA está sendo transcrito, acontece um reconhecimento por parte dos ribossomos que inicia uma produção de proteínas, simultaneamente. Diferentemente dos eucariotos que possuem uma membrana nuclear separando os eventos de transcrição e de tradução que acontecem, respectivamente, no núcleo e no citoplasma.
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