RESUMO - BIOTECNOLOGIA APLICADA À SAÚDE

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T ÍT U LO: Biotecnologia Aplicada à Saúde N OM E: Luciano Feitosa P 2 - 2 0 2 1 .1
• Introdução: 
- Mutação já é associada a algo ruim 
➢ Na verdade, as mutações podem ser 
positivas, negativas ou neutras 
- Terrorismo da divulgação da saúde 
➢ Hipocondria zelada pela mídia 
 
• Manipulação de : 
- Cientista chinês cria bebês GM 
➢ Resistentes ao HIV 
- Pode ter causado mutações indesejadas 
- Condenado a três anos de prisão 
 
• Conceito: 
- Biologia + Tecnologia 
- É o que a ciência deveria ser sempre 
➢ União de diversas áreas das ciências 
biológicas e exatas 
 
 
• Aplicações: 
- Clonagem 
- Análise do DNA 
- Transformação genética 
- Uso de microrganismos na agricultura 
- Controle biológico 
- Produção de vacinas 
- Melhoramento genético 
- Produção de fármacos 
- Fermentações industriais 
- Cultura de tecidos e células 
 
• Engenharia Genética: 
- É o uso da tecnologia de biologia celular e 
molecular para modificar a sequência de DNA em 
genomas 
➢ Usa uma variedade de abordagens 
➢ Técnicas de DNA recombinante 
- https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/32164255/ 
 
• Manipulação de Ácidos Nucleicos: 
- Extração do DNA ou RNA 
- É o primeiro passo para muitas aplicações 
biotecnológicas 
➢ PCR 
➢ Clonagem 
➢ Transferência de genes 
➢ Tipagem molecular 
➢ Marcadores moleculares 
➢ Sequenciamento 
- Etapas para um diagnóstico molecular 
➢ 1) Coleta do material biológico 
➢ 2) Extração do DNA ou RNA 
➢ 3) Amplificação 
➢ 4) Análise dos resultados 
- O diagnóstico molecular pode demorar de horas 
a dias 
 
• Coleta do Material Biológico: 
- Sangue total 
- Líquido amniótico 
- Soro 
- Plasma 
- Urina 
- Fezes 
- Tecidos parafinados 
- Raspados bucais, cervicais e uretrais 
- Swabs (cotonete nasofaríngeo) 
➢ Conservar o material em soluções 
tampões, com pH 8 
➢ Visa a integridade do material genético e 
não a integridade do vírus, por exemplo 
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/32164255/
➢ Enzimas nucleases 
 
• Purificação: 
- O objetivo é separar o DNA de todas as outras 
moléculas 
➢ De maneira que não quebre 
➢ DNA quebrado pode dar falso-negativo 
- Detergente é perfeito para degradar as 
membranas biológicas 
➢ Possui partes polares e apolares 
- Soluções desnaturantes de proteínas e de lipídios 
➢ Degrada proteínas e lipídios 
- Centrifugação 
➢ Extração de DNA com fenol 
- Quebra da ligação com a água 
➢ Utilização de etanol e sal 
➢ É possível visualizar o DNA a olho nu 
- OBS: não é possível ver o DNA a olho nu sem 
utilizar álcool e sal, não por ser muito pequeno, 
mas por não estar em uma solução biológica 
adequada para desenvolver tamanho e nitidez 
 
• Quantificação e Qualificação: 
- Fundamental pós-extração 
- Espectrofotômetro 
➢ É capaz de determinar as concentrações 
médias de DNA ou RNA presentes em 
uma amostra, bem como sua pureza 
➢ É realizada por medição da quantidade de 
luz absorvida pelo DNA em solução no 
comprimento de onda de 260 nm 
➢ Quanto maior for a absorção de luz nesse 
comprimento de onda, maior a 
concentração de DNA na solução 
- Gel de agarose 
➢ Aplica-se amostras de DNA juntamente 
com padrões de concentração já 
conhecidos 
➢ Nas extrações é possível obter grandes 
moléculas, que incluem cromossomos 
inteiros ou fragmentados 
➢ Amostras de boa qualidade formam bandas 
íntegras, enquanto amostras degradadas ou 
com presença de moléculas de RNA 
apresentam rastros ao longo do gel 
➢ É realizada pela comparação entre a 
intensidade da fluorescência das amostras 
extraídas com uma solução de DNA de 
concentração conhecida