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Samara Francine Gonçalves de Lima Antônio. Faculdade Anhanguera Enfermagem noturno 3º período Prof. Jorge – Genética. Clonagem de DNA. É um processo onde são feitas várias copias idênticas de um pedaço especifico de DNA. A finalidade deste processo é produzir várias copias de uma sequência de DNA em um plasmídeo. O gene da insulina uma é um exemplo desse processo. O gene da insulina humana é expresso em bactérias E. coli para produzir a insulina usada pelos diabéticos Pontos principais: 1. Clonagem de DNA é uma técnica da biologia molecular para fazer muitas cópias idênticas de um pedaço de DNA, tal como um gene. 2. Num experimento típico de clonagem, um gene alvo é inserido num pedaço circular de DNA chamado do plasmídeo. 3. O plasmídeo é introduzido em bactérias através de um processo chamado transformação, e bactérias portadoras do plasmídeo são selecionadas utilizando-se antibióticos. 4. As bactérias com o plasmídeo correto são utilizadas para produzirem mais DNA do plasmídeo ou, em alguns casos, induzidas a expressar o gene e produzir proteína. É um processo complexo de cortar e colar o DNA, aguardar a transformação e selecionar as bactérias que serão usadas. Enzimas utilizadas Enzima de restrição – cortada do DNA que reconhece uma sequência alvo especifica e corta o DNA em dois pedaços. DNA ligase - sela as lacunas do eixo do DNA. OS plasmídeos e outros DNA podem ser introduzidos nas bactérias, como as inofensivas E. coli utilizadas em um processo de transformação. Durante a transformação acontece o momento de estresse que é causado pelo choque térmico, quando é dado um choque por exposição a alta temperatura, nesse momento a célula bacteriana especialmente preparada é encorajada a incorporar DNA estranho. O choque de calor altera a fluidez da membrana e faz com que se formem poros, tornando mais fácil o DNA atravessar e entrar na célula. Para checar os plasmídeos e selecionar os que serão usados, o método de digestão por enzima de restrição e PCR/RCP são comumente usados. A clonagem de DNA, é utilizada para várias finalidades, porém as mais exaltadas são as usadas em benefício da vida humana.
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