diagnóstico da Gonorreia

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DISCENTE: Victor Lima de Paiva Freitas
	DATA: 11/09/2020
	DOCENTE: Neandder Correia
	UNIDADE CURRICULAR: Medicina Laboratorial
	Objetivo Geral
	Descrever testes laboratoriais para subsidiar o diagnóstico da Gonorreia.
	
 Visão geral da doença
	Gonorreia é uma infecção pela bactéria Neisseria gonorrhoee, transmitida pelo sexo com um parceiro infectado. 
Testes Laborais
1.1 Exame bacterioscópio direto: coloração pelo método de gram 
· Colher a amostra (secreção, corrimento ou primeiro jato de urina do dia); 
· Realizar o esfregaço utilizando a alça (Figura 1), passar a extremidade da alça na chama do bico de Bunsen (Figura 2) e assim realizar o esfregaço na colônia de bactéria e posteriormente na lâmina; 
· A lâmina deve descansar; 
· Passar a lâmina em triplica sobre a chama do bico de Bunsen, sem fazer com que a lâmina se aqueça de forma excessiva; 
· Cobrir o esfregaço com cristal violeta por um minuto; 
· Lavar de forma sutil a lâmina com água;
· Adicionar o Lugol por um minuto; 
· Enxaguar novamente de forma cuidadosa; 
· Adicionar o álcool-cetona para realizar a descoloração (porém caso o teste se trate de uma bactéria gram positiva, o corante cristal violeta não será retirado);
· Enxaguar novamente com água de forma cuidadosa; 
· Cobrir o esfregaço com fucsina por 30 segundos;
· Lavar rapidamente com água corrente e esperar a secagem;
· Utilizar um microscópio (aumento de 100 vezes) a coloração da colônia de bactérias (Figuras 3a e 3b). 
Figura 1: alça para esfregaço	 Figura 2: bico de Bunsen
Figura 3a: Bactéria Gram positiva Figura 3b: Bactéria Gram negativa 
Para identificar os compostos usados no processo de identificação do tipo de bactérias e suas respectivas funções é necessário observar a Tabela 1. 
	Nome do composto
	Classificação
	Cristal Violeta
	Corante
	Fucsina
	Corante
	Lugol
	Solução fixadora mordente
	Álcool- cetona
	Contra corante
Tabela 1: Compostos químicos usados no processo laboratorial 
Pode-se dizer, portanto, que as a parede celular das bactérias Gram positivas possui noventa por cento de peptidoglicanos e as bactérias Gram negativas possuem a parede celular constituída por dez por cento de peptidoglicanos. Essa diferenciação, das paredes celulares faz com que o cristal violeta adicionado não se esvaia ao entrar em contato o álcool-cetona e assim por isso que essa bactérias Gram positivas mantém a coloração roxa, já as bactérias Gram negativas perdem o composto Cristal violeta ao ter contato com o álcool-cetona e assim ao adicionar a Fucsina, a coloração fica avermelhada. 
Os materiais usados em laboratório estão listados na Tabela 2. 
	Lâminas
	Swab
	Bico de Bunsen
	Corantes, solução fixadora e contra corante
	Microscópio
	Livro de registros
Tabela 2: Materiais usados no processo 
1.2 Semeadura de amostras clínicas 
· Realize a flambagem da extremidade da alça na chama do Bico de Bunsen; 
· Realize o meio de cultura, através do giro do swap na superfície do meio em forma de “Z”; 
· Utilize a alça na função de espalhar o material semeado na placa, formando, assim, estrias(linhas) próximas;
· Posicione as placas, com as tampas para baixo na câmera úmida de microaerofilia (Figura 4);
· Fechar o local que deverá conter uma vela acesa em seu interior e um algodão úmido; 
· Incube as placas na estufa a 35ºC por um período de 24 a 48 horas; 
· Após o processo de incubação é necessário observar a morfologia da colônia; 
· Realizar o exame de citocromo-oxidase ( para identificar a presença ou não da enzima em bactérias) (Figura 5);
· Após isso selecionar uma colónia para realizar o esfregaço e assim realizar o teste de Gram. 
Figura 4: câmera úmida de microaerofilia Figura 5: exame de citocromo-oxidase
É preciso salientar que as colônias de genococos são brilhantes e acinzentadas e o formato varia, tais características devem ser observadas na análise da morfologia. Para realizar tal processo é necessário utilizar itens laboratoriais identificados na Tabela 3. 
	Placas de Petri
	Alça de bacteriológicas
	Câmera úmida de microaerofilia
	Vela
	Algodão
	Estufa
	Lãmina
	Swab
	Colorações
Tabela 3: Materiais