Diabetes Mellitus e Periodontite

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DIABETES MELLITUS E PERIODONTITE: RESPOSTA 
INFLAMATÓRIA EM MOVIMENTO DENTÁRIO ORTODÔNTICO
Beatriz Cavalcante Braga
Ludmila Moura Vieira
GEMP - GRUPO DE ESTUDOS EM MICROSCOPIA E PATOLOGIA
Movimentação Dentária Ortodôntica (OTM)
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INTRODUÇÃO | MATERIAIS E MÉTODOS | RESULTADOS | DISCUSSÃO | CONCLUSÃO
Processo de remodelação óssea mediado por citocinas e 
fatores de crescimento.
Aumento na busca por 
tratamento ortodôntico em 
pacientes adultos.
CONDIÇÕES LOCAIS E 
SISTÊMICAS
!
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INTRODUÇÃO | MATERIAIS E MÉTODOS | RESULTADOS | DISCUSSÃO | CONCLUSÃO
DIABETES MELLITUS PERIODONTITE
Distúrbio metabólico que 
modifica a resposta do quadro 
inflamatório e interfere na 
reparação tecidual, alterando a 
síntese de colágeno e reduzindo 
o processo de angiogênese.
Tendência ao aumento do 
número total de diabéticos.
Inflamação induzida por biofilme 
bacteriano. Indução de sinais 
pró-inflamatórios e fatores de 
crescimento que promovem 
angiogênese.
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INTRODUÇÃO | MATERIAIS E MÉTODOS | RESULTADOS | DISCUSSÃO | CONCLUSÃO
OBJETIVO
Avaliar o deslocamento dentário e 
alterações histomorfométricas e 
bioquímicas nos tecidos ósseos e gengivais 
durante a ortodontia, com e sem a 
presença de periodontia e diabetes.
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INTRODUÇÃO | MATERIAIS E MÉTODOS | RESULTADOS | DISCUSSÃO | CONCLUSÃO
40 ratos
90 dias de idade
300g
8 caixas
RANDOMIZAÇÃO
4 GRUPOS
OTM Animais saudáveis e com movimentação ortodôntica.
P + OTM Animais com periodontite e movimentação ortodôntica.
D + OTM Animais diabéticos e com movimentação ortodôntica.
D + P + OTM Animais diabéticos, com periodontite e movimentação 
ortodôntica.
Está de acordo com a Declaração ARRIVE para estudos em animais e foi aprovada pelo Comitê de 
Revisão Institucional de Centro Universitário - Fundação Hermínio Ometto - FHO (022/2014). 
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Cloridrato de Xilazina (10mg/kg)
+
Cloridrato de Cetamina (30mg/kg)
OTM Periodontite Diabetes
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INTRODUÇÃO | MATERIAIS E MÉTODOS | RESULTADOS | DISCUSSÃO | CONCLUSÃO
Indução de Diabetes Mellitus 
Monohidrato de Aloxana
Dose única de 150mg/kg diluida
em solução salina 0,9%.
Solução oral de glicose 80% por 24h.
Amostras de sangue foram coletadas semanalmente por 30 dias.
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Indução a Periodontite 
Induzida por ligadura e realizada 
com fio de sutura de seda 3.0.
A periodontite pode desenvolver-se 
após 7 dias de indução.
A indução ocorreu durante 30 dias.
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OTM
O dispositivo foi fixado por meio de fio 
de aço 0,15mm, indo de primeiro 
molar superior esquerdo a incisivos.
FORÇA APLICADA
Mola de aço estendeu-se 
cerca de 2mm, com força 
inicial de 0,4N.
A movimentação ocorreu por 10 dias.
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OTM
Medida a distância entre a distal do 
terceiro molar e a mesial do primeiro 
molar do lado movido (MS).
Remoção do tecido epitelial e 
componentes musculares.
2x
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Análise Histomorfométrica
5 animais /grupo
• Amostras fixadas em
solução de formaldeído a
10% por 72 horas
• Desmineralizadas por 2
meses
• Cortes transversais de 5
μm de espessura na
parafina
• 5 cortes – 3 fotos de cada
corte – total 15 imagens
por animal
• Contagem de células por
μm²
• Cervical das raízes
• Raízes diferentes do dente
movido
• Um único observador
calibrado
• O número de fibroblastos,
células inflamatórias, vasos
sanguíneos e fibras
colágenas do ligamento
periodontal do lado
tracionado foram
quantificados.
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Análise Histomorfométrica
5 animais /grupo
• Osteoclastos medidos no
lado de compressão
• Raiz disto-vestibular:
fibroblastos, vasos e
infiltrado inflamatório
• Raiz mesiovestibular:
organização de colágeno
(% de área).
• As imagens foram
avaliadas no
fotomicroscópio Leica
DM2000 usando o Sigma
Scan Pro Programa 5.0 ™
O
TM
P
+O
TM
D
+O
TM
D
+P
+O
TM
Figura 3.A. Organização do tecido periodontal. A, Seções transversais da
raiz mesiovestibular do primeiro molar superior de ratos machos em 10
dias de movimentação ortodôntica nos grupos OTM, P + OTM, D + OTM e
D + P + OTM. Força de direção (F ‐ seta branca); D: dentina; C: cemento; PL:
ligamento periodontal. As seções foram tratadas através do método de
picrosirius-hematoxilina e analisadas sob polarização de luz. (*), osso
alveolar; (►), fibras de colágeno em PL. Bar = 200μm.
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Quantificação de proteínas no tecido gengival
Uma amostra de tecido gengival, por
animal, foi removido em torno do primeiro
molar superior, que envolveu
o epitélio e tecido conjuntivo na região do
sulco gengival e na bolsa periodontal.
O total de proteínas foram obtidas
usando uma extração tampão e
quantificadas usando o Método de
Bradford
Interleucina ‐ 6 (IL ‐ 6) e fator de necrose tumoral
(TNF ‐ α) foram medidos pelo método ELISA
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Quantificação de proteínas no osso alveolar
• Foi curetado osso alveolar, uma
amostra por animal, na região da parte
superior o primeiro molar.
• As amostras foram homogeneizadas
com Politron em um tampão de
extração proteína via Western blotting
• Essas amostras foram centrifugadas e o
sobrenadante foi coletado para
dosagem de proteína pelo método
Biuret (Laborlab). O sobrenadante foi
tratado com um tampão Laemmli.
• A concentração de fator de crescimento
fibroblástico (bFGF), fator de
crescimento transformador (TGF-β1) e
crescimento endotelial vascular fator
(VEGF) foi medido através do método
Western blotting. A
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Quantificação de proteínas no osso alveolar
• As membranas de PVDF foram
incubadas (4 ° C durante a noite) com
os respectivos anticorpos primários em
uma diluição de 1: 200: anti-bFGF, anti ‐
TGF ‐ β1 e anti- VEGF
• A revelação foi feita com um kit
quimiluminescência por dois minutos, e
as imagens foram capturadas por foto
documentário
• Anticoelho de camundongo e anti-
camundongo monoclonal foram usados
como anticorpo secundário em
temperatura ambiente por 2 horas
• As bandas de tensão foi avaliada por
densitometria no software ImageJ ™
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Análise Estatística
Os resultadosforam expressos como média ± desvio
padrão (DP). Todos os dados passaram no teste de
normalidade Kolmogorov ‐ Smirnov, se ajustaram à
curva de normalidade e foram analisados por ANOVA
e pós ‐ testes de Tukey. O nível de significância foi
estabelecido em 95% (P <0,05).
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Movimento Dentário Ortodôntico
• OTM: 0,76 ± 0,07
• P + OTM: 0,71 ± 0,09
• D + OTM: 0,67 ± 0,05
• D + P + OTM: 0,68 ± 0,06
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Diabetes mellitus aumenta a suscetibilidade e
influencia o desenvolvimento tratamento da
periodontite
A aplicação de forças ortodônticas promove
processos inflamatórios resposta no tecido
periodontal
O bFGF é um importante fator de crescimento na
angiogênese, e desempenha um papel
significativo na quimiotaxia e mitogênese
Animais com diabetes
Animais com periodontite
Aumento de IL6 e TNF-α em animais
diabéticos pode ter contribuído para a
persistência do processo inflamatório
Nogueira et al 2013, demonstraram que o
movimento ortodôntico na presença de periodontite
aumentam os níveis de citocinas inflamatórias,
danificando o tecido periodontal.
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produtos finais de glicação avançada (AGEs) +
receptor de produtos finais de glicação
avançada (RAGE)
Aumentam os níveis de citocinas pró
inflamatórias – (IL ‐ 1a), (IL ‐ 6) e (TNF ‐ α)
A osteoclastogênese induzida por força
ortodôntica foi inibida pela inflamação em
doença periodontal, promovendo redução da
movimentação dentária
A evolução da periodontite promove um
aumento de células inflamatórias e
imunológicas no local da agressão
TGF-β1 e TNF‐α e IL ‐ 1 e IL ‐ 6 estão
aumentadas na periodontite
TGF-β1 aumenta durante a movimentação
dentária ortodôntica, e a associação desta
condição com diabetes pode promover a
destruição do tecido
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Expressão de VEGF
Periodontite
Diabetes
Uma limitação do estudo foi
o não uso de linhagem de
animais diabéticos
consanguíneos
Esta estratégia evitou um
estudo com uma amostra
discrepante
Extremas alterações metabólicas e inflamação local
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O estudo da associação de periodontite 
e diabetes, bem como as citocinas e os 
fatores de crescimento envolvidos 
nessas patologias, podem contribuir 
para um tratamento ortodôntico seguro 
de pacientes com diabetes.
IL-6
TNF-α 
TGF-β1 
Angiogênese
Reorganização 
Tecidual
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