Métodos de Estudo em Patologia

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Citologia 
• Estudo de uma célula isolada. 
• Trata-se de um estudo microscópico das 
características morfológicas da célula e 
adjacências. 
• Método minimamente invasivo. 
 
 
 
 
Serve para: 
• Diagnóstico de tipificação de neoplasias 
malignas (tipo de célula, núcleo e 
citoplasma). 
• Diagnóstico de lesões benignas. 
• Avaliação de população de microorganismos. 
• Avaliação qualitativa e quantitativa de 
células. 
 
O material para análise citológica pode ser obtido 
por meio de: 
 
 
 
Métodos de obtenção de amostra: 
• Citologia esfoliativa: 
Através de recolhimento de células desprendidas 
espontaneamente dos tecidos. 
Coleta de secreções/líquidos. 
Fixação das células: 
 
 
Colorações: 
1. Papanicolau: 
• Coloração multicromática: 
 
 
• Variações morfológicas, de graus de 
maturidade e de metabolismo celular. 
 
 
Mucosas
•Álcool etílico 
95%;
•Álcool: éter;
Sangue
•Esfregaço seco 
antes da 
fixação;
Muco e 
Secreções
•Podem ser 
guardadas em 
geladeira por 
até 1 dia antes 
de serem 
encaminhadas 
ao laboratório;
•Álcool 50%;
Patologia Geral 
Ana Beatriz de Souza Lima Campos. 
 
Métodos de Estudo em Patologia 
Sinonímia: Citodiagnóstico, Citopatologia. 
Origem: 
 
Cito-
Célula 
Estudo da 
célula 
Logia- 
Estudo 
Vantagens
• Fácil execução;
• Rápido;
• Baixo custo;
Desvantagens
• Não se sabe sobre a 
área específica;
• Lesões profundas não 
identificadas;
• Falso-negativos;
Raspagem de pele 
ou mucosas
Secreções
Líquidos Punção aspirativa
Coloração universal 
dos esfregaços 
celulares: 
Papanicolau 
Papanicolau PAS
Hematoxilina-
eosina
Azul de metileno Grocott
Hematoxilina: 
básica. 
Orange G: ácido. EA-65: citoplasma: 
policromático. 
Vírus 
do HPV 
Classe o: material insuficiente/inadequado. 
Classe I: célula normal. 
Classe II: célula atípica sem evidência de malignidade. 
Classe III: células sugestivas de malignidade. 
Classe IV: célula fortemente sugestiva a malignidade. 
Classe V: citologia conclusiva de malignidade. 
 
Citologia 
esfoliativa – 
Técnica: 
 
 
 
Citologia esfoliativa – Células encontradas: 
 
2. PAAF (Punção Aspirativa com Agulha Fina): 
• Utiliza-se uma agulha fina para obtenção de 
células para o estudo. 
• Utilização: 
 
 
 
 
 
 
 
 
• PAAF Tireóide: 
 
• Análise: 
Histologia 
• Estudo microscópico das características 
morfológicas dos tecidos. 
• Necessita-se de um fragmento de tecido 
(biópsia). 
• Amplamente utilizada para diagnóstico de 
lesões e prognóstico. 
• Pode participar também do tratamento 
(margens livres). 
 
 
 
 
 
 
 
Biópsia: é um exame que eu vou coletar a amostra 
de uma lesão e fazer um estudo histopatológico. 
• Há dois tipos: 
Vantagens
• Análise morfológica 
celular e tecidual;
• Comparação com 
tecidos adjacentes;
Desvantagens
• Pode necessitar de 
internação;
• Células 
indiferenciadas;
Lesões com 
conteúdo líquido. 
Lesões de difícil 
acesso cirúrgico. 
OBSERVAÇÃO: 
Nela eu consigo acessar alguns sítios que são 
inacessíveis ou de difícil acesso, como é o caso dos 
nódulos tireoidianos. 
Possui duas vertentes: pode ser um exame citológico 
e uma biópsia também. 
Cândida albicans Coilocitose Paracoccidioidomicose
Montagem da lamínula
Coloração
Fixação
OBSERVAÇÃO: 
Sinonímia: Anatomopatológico, Histopatológico. 
Origem: 
 
Histo- 
Tecido 
Logia- 
Estudo 
Estudo do 
tecido 
 
 
 
Imunohistoquímica 
Método que utiliza anticorpos como reagentes 
específicos para detecção de antígenos presentes 
em células ou tecidos. 
Pode ser feito por meio de: 
Método utilizado para: 
• Diagnóstico de lesões indiferenciadas. 
• Identificação de microorganismos, 
estruturas celulares ou materiais 
secretados por células. 
• Avaliação de proliferação celular. 
• Identificação topográfica do antígeno no 
tecido. 
 
 
 
 
 
 
 
Imunofluorescência 
• Técnica que possibilita a visualização de 
antígenos nos tecidos ou em suspensões 
celulares. 
• Utilização de antígenos específicos 
marcados fluocromo, capazes de absorver 
luz UV e emitir luz. 
Objetivos: 
• Diagnóstico de doenças autoimunes. 
• Detecção de microorganismos nos fluidos. 
• Anticorpos diretamente sobre os tecidos. 
Biópsia incisional
Realizada em lesões 
potencialmente 
malignas
Remoção parcial da 
lesão.
Lesões extensas.
Biópsia excisional
Realizada em lesões 
com características 
benignas.
Remoção de toda a 
lesão.
Lesões pequenas.
Vantagens
• Reação específica ao 
antígeno.
Desvantagens
• Alto custo.
Fusão 
Tecidos removidos 
em biópsia
Células coletadas na 
citologia.
Células em cultura.
OBSERVAÇÕES: 
É uma reação extremamente específica. 
É essencialmente qualitativa. 
Tem como objetivo fundamental o encontro e a localização 
topográfica de antígenos em tecidos. 
Imunidade 
Tecido 
 
Tipos: 
• Direta: detecção de antígenos. 
• Indireta: detecção de antígenos e/ou 
anticorpos. 
 
 
 
 
 
PCR 
• Técnica que visa a duplicação do DNA para 
análise. 
• Reação em cadeia da polimerase. 
• Todo tipo de material. 
 
 
 
 
 
 
Pode ser feita por meio de: 
• Sangue; 
• Urina; 
• Cabelo; 
• Saliva; 
• Tecidos; 
Aplicabilidade: 
 
Processo: 
 
1) Desnaturação: fase em que ocorre a 
separação da dupla fita de DNA. Quebra da 
ligação entre as bases nitrogenadas e a 
separação de ambas as fitas para que eu 
tenha cada uma das fitas como molde para a 
fabricação de uma nova fita. 
2) Hibridização ou Anelamento: fase em que a 
ligação de um primer (sequência específica 
que foi desenhada em laboratório, isto é, é 
aquilo que quero encontra, ex: exame de 
p
a
t
e
r
n
idade) daquela sequência de DNA específica 
para a reação, vai se ligar à molécula de 
DNA que foi separada, ou sej,a colocada 
Vantagens
• Reação específica;
• Localização do 
anticorpo;
Desvantagens
• Alto custo;
Vantagens 
• Detecção de 
sequências de 
ácidos nucleicos 
específicas;
• Identifica 
alterações 
genômicas;
Desvantagens
• Alto custo;
• Equipamentos 
específicos;
Testes de 
paternidade
Identificação de 
mutações
Identificação de 
patógenos
Identificação de 
criminosos e 
vítimas
Diagnóstico HPV
OBSERVAÇÕES: 
Sinonímia: Reação da Cadeia da Polimerase 
O objetivo dessa técnica é pegar um fragmento de DNA e 
multiplicá-lo tantas vezes para que se consiga qualquer 
tipo de DNA em qualquer tipo de fluido tecidual ou 
fragmento de tecido. 
Desnaturação Hibridização
ExtensãoFase final
para reação. Então, cada uma dessas 
moléculas vai se ligar ao primer. 
3) Extensão ou Polimerização: durante essa 
fase é ligada o prime inicial a enzima 
taquipolimerase promovendo a leitura das 
bases e a formação de novas bases. 
4) Final do ciclo: tem aumento do número de 
cópias do DNA. 
5) Esse exame pode ser feito através de vários 
fluidos orgânicos como: cabelo, urina e 
sangue. Ele pode aplicado em testes de 
paternidade, identificação de criminosos e 
vítimas, identificação de mutações, 
identificação de patógenos. Durante o 
processamento é extraído o DNA, utiliza o 
PCR, multiplica o PCR, faz análise do DNA, 
compara com material genético, emite uma 
fluorescência, se der positivo e tiver aquele 
fragmento igual. 
 
 
 
 
 
 
https://www.youtube.com/watch?v=5YlfZwzRPa4 
 
BRASILEIRO FILHO, G. Bogliolo - Patologia. 9. 
ed. Rio de Janeiro: Gen, Guanabara Koogan, 
2016. 
https://www.youtube.com/watch?v=5YlfZwzRPa4