atividade 3 - laboratorio micro e micologia (1)

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UNIFEV – Centro Universitário de Votuporanga
Curso de Biomedicina
Disciplina de microbiologia e micologia clínica
Nome do aluno: Gabriela Bernardo Gonçalves. RA: 87499
TESTE DE SENSIBILIDADE AOS ANTIMICROBIANOS
a. Quais técnicas podem ser utilizadas para o TSA?
	O TSA é utilizado para muitas técnicas incluindo a manutenção de culturas de estoque, contagem de placas, isolamento de microrganismos a partir de uma variedade de tipos de amostras. E também pode ser usado para testar contaminantes bacterianos em cosméticos. 
	O TSA é uma ferramenta importante no monitoramento da resistência bacteriana e é um recurso auxiliar na implantação de medidas eficazes de controle que evitem a disseminação de bactérias multirresistentes. Existem vários métodos para a avaliação do TSA disponíveis, são padronizados quanto a sua utilização, execução e interpretação. 
	O Clinical and Laboratory Standards Institute - CLSI, antigo NCCLS, é o documento-padrão utilizado pelos laboratórios brasileiros e adotado pela Rede Brasileira de Monitoramento da Resistência Microbiana coordenada pela Agência Nacional de Vigilância Sanitária – ANVISA, em cooperação com a Organização Pan-Americana da Saúde – OPAS, e em parceria com a Coordenação Geral de Laboratórios de Saúde Pública – CGLAB.
	Os métodos fazem avaliações qualitativas e quantitativas do comportamento bacteriano diante dos antimicrobianos. O método de disco difusão é um método qualitativo e indica apenas se a bactéria é sensível, intermediária ou resistente. Os métodos de macrodiluição em tubo, microdiluição em caldo, ágar diluição e o Etest são metodologias quantitativas, elas determinam qual é a menor concentração de antimicrobiano capaz de inibir o crescimento daquela amostra bacteriana.
b. Quais meios de cultura podem ser utilizados para o TSA?
	Agar Nutriente; Agar CLED – Cystine Lactose Electrolyte Deficient; Agar Mueller Hinton; Agar MacConkey; Agar Salmonella Shigella (SS); Agar Sabouraud Dextrose; Agar Sal Manitol.
c. Quais maneiras de realizar controle de qualidade dos antimicrobianos?
	Segundo a ANVISA os reagentes, corantes e kits devem ser testados a cada novo kit, semanalmente ou a cada novo lote, de acordo com os critérios determinados pelo sistema de gestão da qualidade do laboratório e deve estar descrito nos respectivos procedimentos técnicos (PTs).
	Quanto aos reagentes: Reações de uso na rotina diária para testes manuais de identificação bacteriana como catalase, oxidase, beta-lactamase (cefinase), novobiocina, bacitracina e optoquina precisam ser testados contra cepas ATCC ou de comportamento conhecido, idealmente em freqüência semanal, quinzenal ou mensal, conforme padronização do laboratório.
Reagentes adquiridos prontos: guardar os certificados de qualidade do fabricante. O controle de qualidade interno é realizado conforme descrito em procedimento técnico específico.
	Reagentes preparados no laboratório: aqueles utilizados por sistema automatizado (sistema que utiliza reagentes) são validados no controle de qualidade interno com as cepas ATCC de acordo com a indicação do fabricante (vide bula dos painéis).
	Outros reagentes podem ser testados contra cepas ATCC ou outras conhecidas ou validados contra os reagentes do lote anterior, já validados.
	Todos os testes realizados devem ser registrados em planilhas e guardados.
	Quantos aos kits: Incluem métodos bioquímicos, imunológicos ou miniaturizados para detecção ou identificação de microrganismos, seus antígenos ou características fenotípicas.
	Deve ser realizado na abertura de novo lote, kit ou quando necessário atestar o desempenho do mesmo.
	Utilizar controle positivo e negativo, cepa ATCC ou amostra conhecida, que deve ser registrado em planilha específica de acordo com as recomendações do fabricante ou determinação do CQI e CQE descrito no procedimento específico.
	Quanto aos corantes: Os corantes (Gram e Ziehl) devem ser testados e os controles registrados a cada lote produzido, para a habilidade de distinguir microrganismos positivos e negativos.
	As lâminas são preparadas previamente dentro da cabine de fluxo laminar (se manipular amostras positivas para BAAR, utilizar adicionalmente máscara N95); fazendo esfregaços de isolados de rotina (cepas selvagens) ou preferencialmente de cepas padrão ATCC.
	Homogeneizar com a alça de semeadura, secar, fixar pelo calor e estocar em caixas plásticas apropriadas para serem coradas como lâminas-controle.
	Testar a cada vez que for utilizado novo lote de corantes, semanalmente ou quando necessário atestar a eficácia do método (registrar em formulário).
d. Listar os antimicrobianos que podem ser testados para Gram negativo e Gram positivo.
	Gram-negativos: tetraciclina 83,02%, azitromicina 81,48%, doxiciclina 77,78%, ampicilina 62,96%, ceftiofur e florfenicol 50%, cefalexina 46,3%, enrofloxacino 44,44%, norfloxacino 18,52%, gentamicina 20,37%, levofloxacino 27,78%, amoxicilina + ácido clavulânico 31,48%, ciprofloxacino 31,48%. 
	Gram positivo: β-lactâmicos (5, cefalosporina), aminoglicosídeos (9, estreptomicina), tetraciclinas (12, clortetraciclina), macrolídeos (10, eritromicina), peptídeos (15, vancomicina) e outros (11 cloranfenicol, 16 rifamicina B, 14 clindamicina e polimixina B). Neste período apenas três derivados sintéticos foram introduzidos no mercado: isoniazida, trimetropim (23) e metronidazol.
HEMOCULTURA
a. Explique como podem ser realizadas as Hemoculturas?
	Hemocultura é um exame laboratorial que pesquisa microrganismos patogênicos no sangue através da utilização de meios de cultura específicos. O exame detecta bactérias e fungos no sangue. 
	Geralmente são colhidas de duas a três amostras de sangue em horários diferentes e de veias diferentes, para aumentar a possibilidade de um resultado positivo e também para diferenciar patógenos de bactérias da pele que podem contaminar a cultura durante a coleta.
	O sangue é colhido por punção venosa. O local da punção é limpo com álcool e com solução de iodo, o local deve estar seco antes da coleta. Usualmente colhe-se cerca de 20 mL de sangue, que é colocado em dois frascos de cultura, um para aeróbios e outro para anaeróbios. Em crianças a quantidade é menor mas a maneira como é coletado a mesma.
b. Quais microrganismos podem ser pesquisados?
	Pode detectar bactérias e fungos no sangue. 
Referências 
https://www.anvisa.gov.br/servicosaude/controle/rede_rm/cursos/atm_racional/modulo2/metodos1a.htm
https://www.infoescola.com/exames-medicos/hemocultura/#:~:text=Hemocultura%20%C3%A9%20um%20exame%20laboratorial,resultado%20projeta%2Dse%20na%20terap%C3%AAutica.
https://labtestsonline.org.br/tests/hemocultura#:~:text=A%20hemocultura%20detecta%20bact%C3%A9rias%20e,por%20fungos%20ou%20por%20v%C3%ADrus.
https://www.anvisa.gov.br/servicosaude/controle/rede_rm/cursos/boas_praticas/modulo6/frequencia6.htm