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UNIVERSIDADE PAULISTA BACHARELADO EM BIOMEDICINA TRABALHO DE ESTÁGIO 1 Sunamita Dias RA: D61GIC4 CAMPINAS 2021 UNIP Universidade Paulista COLETA Introdução Na coleta de sangue para a realização de exames laboratoriais é importante que se conheça, controle e se possível, evite algumas variáveis que possam interferir na exatidão dos resultados. Os produtos utilizados para efetuar a coleta do sangue são de extrema importância, pois além de auxiliar em um melhor resultado dos exames, podem reduzir a ocorrência de erros na coleta e os fatores de interferência na fase pré-analítica. Materiais: 1 par de luvas de procedimento, 1 scalp nº 21 ou 23, ou agulha 30x06 ou 30x07, uma seringa de 10 ml, 1 garrote, 2 bolas de algodão, 5 ml de álcool a 70% e tubos para a coleta de acordo com o pedido do exame. Metódo: Lavar as mãos, utilizar luvas, apalpar a veia, colocar o garrote (por 1 minuto no maxímo), desinfetar o local da punção, montar o sistema de coleta, realizar a punção venosa, inserir o tubo de coleta avacuo no adaptador, retirar o garrote assim que o sangue fluir para dentro do tubo, inverter o tubo gentilmente de 8 a 10 vezes, descartar o material perfuro cortante no deskarpak. Sequência de tubos/cores: 1. Frasco para Hemocultura. 2. Tubos com Citrato (tampa azul- claro). 3. Tubos para soro com ativador de coágulo, com ou sem gel separador (tampa vermelha ou amarela). 4. Tubos com Heparina com ou sem Gel Separador de Plasma (tampa verde). 5. Tubos de EDTA (tampa roxa). 6. Tubos com Fluoreto (tampa cinza). Anticoagulantes: -SEM ANTICOAGULANTE (Activa a cascata de coagulação). Setor: bioquímica, sorologia. Análises: Creatinina Glicose, Uréia, Colesterol, Pesquisa e identificação de anticorpos e ou antigénios no soro (soro). -EDTA SÓDICO OU POTÁSSIO- Setor: Hematologia. Análises: Eritrograma, Leucograma, Plaquetas (sangue total) -CITRATO DE SÓDIO- Setor: Hematologia (Coagulação). Análises: Tempo de Coagulação, Retração de Coágulo, Tempo Parcial de Tromboplastina, Tempo de Protrombina (plasma). -CITRATO TRISSÓDICO- Setor: Hematologia (Coagulação), Análises: VHS, Factor V e VIII, Agregação plaquetária, Actividade terapêutica da heparina (plasma). -FLUORETO DE SÓDIO + EDTA- Setor: Bioquímica. Análises: Glicose, Lactato (plasma). -ÁCIDO CITRATO DEXTROSE (ACD) OU CITRATO FOSFATO DEXTROSE ADENINA (CFDA)- Setor: Hematologia/Banco de sangue. Análises: Testes de Tipagem Sanguínea, Preservação Celular (sangue total). -HEPARINA- Setor: Bioquímica. Análises: Determinações especiais de Biqouimica (Zinco, Chumbo, Cobre), Gasometria (sangue total). ESFREGAÇO Introdução A confecção do esfregaço sanguíneo é etapa significativa em um hemograma, pois possibilita a leucometria diferencial, a estimativa do número de leucócitos e plaquetas por microlitro de sangue, a avaliação morfológica das células sanguíneas e também a pesquisa de parasitas sanguíneos. Materiais: lâminas de vidro limpas, desengorduradas e secas; lâminas extensoras e a própria amostra de sangue. Metódos: Homogeneizar o sangue, segurar a lâmina com o polegar e o indicador da mão esquerda ou apoiar sobre superfície limpa, colocar uma pequena gota de sangue próxima à direita da lâmina, tocar a gota de sangue com as costas da extensora em um ângulo de 30 a 45º, aguardar que o sangue se espalhe pelo bordo da extensora e então deslizá-la de modo suave e contínuo até a direção oposta, secar a lâmina ao ar e identificá-la com lápis diretamente sobre a parte espessa do esfregaço ou sobre etiqueta de papel (não são usadas canetas esferográficas, pois os corantes removem esse tipo de identificação), corar o esfregaço sanguíneo. Erros comuns: borda irregular da lâmina extensora, pausas na hora de mover a lâmina extensora, movimento muito rápido, gota de sangue muito pequena, gota de sangue concentrada no centro da lâmina, sujeira ou gordura na lâmina ou amostra lipêmica, pressão desigual na lâmina extensora, demora na confecção do esfregaço/gota seca. Técnicas de coloração: Panótico rápido - Preparar as extensões sanguíneas e deixar secar em temperatura ambiente, submergir as lâminas na solução nº 1, mantendo um movimento contínuo de cima para baixo ou para os lados durante 5 segundos (5 imersões de 1 segundo cada) e deixar escorrer bem, submergir as lâminas na solução nº 2, mantendo um movimento contínuo de cima para baixo ou para os lados durante 5 segundos (5 imersões de 1 segundo cada) e deixar escorrer bem, submergir as lâminas na solução nº 3, mantendo um movimento contínuo de cima para baixo ou para os lados durante 5 segundos (5 imersões de 1 segundo cada) e deixar escorrer bem, lavar com água deionizada ( de preferência tamponada a pH 7), secar ao ar na posição vertical e com o final da extensão voltado para cima. Leishman - Fazer os esfregaços, após secarem à temperatura ambiente estão prontos para serem corados, em dias frios, agitar as lâminas para acelerar o processo de secagem, cobrir cada lâmina com 10 a 15 gotas do corante, de acordo com a extensão do esfregaço, fixar a lâmina com o corante durante um minuto, distribuir sobre a lâmina igual número de gotas de água destilada ou solução tampão, homogeneizar a mistura de corante com água, a partir deste momento, começa a atividade de coloração, corar por 3 a 4 minutos, o tempo de coloração depende da extensão e da espessura do esfregaço. CONTAGEM DIFERÊNCIAL DE LEUCÓCITOS Introdução A contagem diferencial informa as quantidades relativas dos diferentes tipos de leucócitos no sangue periférico, por si só, faz um diagnóstico, mas fornece também dados importantes, quando bem interpretada. Materiais: esfregaço de boa qualidade corado, microscópio para observação. Metódos: No primeiro momento, a avaliação da lâmina é feita com uma objetiva de menor aumento (10x a 40x) e depois, com uma objetiva de imersão de maior aumento (100x). A contagem de células é realizada da metade para o fim da borda do esfregaço, contando 50 células na parte superior e 50 células na parte inferior do esfregaço ou percorrendo o esfregaço de uma borda a outra, totalizando a contagem de 100 células. Características das células Neutrófilos segmentados: são células arredondadas, com 10 e 14 μm, o núcleo é segmentado apresentando lóbulos (normalmente de dois a cinco) ligados por finos filamentos de cromatina, o citoplasma é acidófilo e apresenta grânulos específicos. Quando são jovens, os neutrófilos são chamados de bastonetes, o núcleo geralmente aparece em formato de U e não possui lóbulos separados. Eosinófilos: possuem o mesmo tamanho dos neutrófilos ou um pouco maiores, o núcleo é lobulado, o citoplasma é levemente mais azulado do que o dos neutrófilos, possuem grânulos grandes que se coram pela eosina. Basófilos: essas células possuem núcleo volumoso com formato irregular, possuem grânulos específicos bem grandes em seu citoplasma que acabam encobrindo em partes o seu núcleo. Monócitos: são os maiores leucócitos encontrados no sangue com diâmetro entre 15 e 22 μm., seu núcleo apresenta-se em forma de rim e geralmente é excêntrico, a cromatina é levemente densa e pode ter 2 a 3 nucléolos, o citoplasma é claro e basofílico e possui grânulos azurrófilos bem finos. Linfócitos: são menores do que os neutrófilos, são esféricos, com núcleo esférico, cromatina nuclear condensada, o citoplasma é escasso e basofílico. Referências bibliográficas: http://www.doles.com.br/produtos/instrucoes/LEISHMAN.pdf https://siteantigo.portaleducacao.com.br/conteudo/artigos/enfermagem/coleta-de-sangue- venoso/23162 https://kasvi.com.br/coleta-de-sangue-boas-praticas/ https://www.ufrgs.br/lacvet/coleta_amostras.php https://repositorio.ipcb.pt/bitstream/10400.11/626/1/Poster%20Anticoagulantes%20joao%20Sil- va%5B1%5D.pdf https://siteantigo.portaleducacao.com.br/conteudo/artigos/conteudo/esfregaco/29416 https://www.biomedicinapadrao.com.br/2017/06/erros-mais-comuns-na-confeccao-do.htmlhttps://www.laborclin.com.br/wp-content/uploads/2019/06/Coloracao_panotico_rapido_620259_ 620100_620105_620106_620107.pdf https://www.ufrgs.br/lacvet/diferencial.htm https://ibapcursos.com.br/celulas-do-sangue-quais-sao-funcoes-e-caracteristicas-principais/ http://www.doles.com.br/produtos/instrucoes/LEISHMAN.pdf https://siteantigo.portaleducacao.com.br/conteudo/artigos/enfermagem/coleta-de-sangue-venoso/23162 https://siteantigo.portaleducacao.com.br/conteudo/artigos/enfermagem/coleta-de-sangue-venoso/23162 https://kasvi.com.br/coleta-de-sangue-boas-praticas/ https://www.ufrgs.br/lacvet/coleta_amostras.php https://repositorio.ipcb.pt/bitstream/10400.11/626/1/Poster%20Anticoagulantes%20joao%20Silva%5B1%5D.pdf https://repositorio.ipcb.pt/bitstream/10400.11/626/1/Poster%20Anticoagulantes%20joao%20Silva%5B1%5D.pdf https://siteantigo.portaleducacao.com.br/conteudo/artigos/conteudo/esfregaco/29416 https://www.biomedicinapadrao.com.br/2017/06/erros-mais-comuns-na-confeccao-do.html https://www.ufrgs.br/lacvet/diferencial.htm
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