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2 Aul�: Fun��� � ba��éri�: ● Conceitos: A célula é a menor unidade dos seres vivos. Elas constituem praticamente todos os organismos do planeta. As células podem ser: - Eucariota: -é mais complexo e evoluído. -principais características: núcleo, uma molécula linear bem maior e mais complexa. -Possui funções específicas comandadas por organelas. Exemplo: mitocôndrias e cloroplastos. Modelos de eucariontes: Algas; Fungos; Protistas; Plantas; Animais. - Procariota: -Ser vivo estruturalmente mais simples, -O material genético é processado diretamente no citoplasma; -Vários procariotos possuem um DNA extracromossomal -Plasmídeo: pequenas moléculas de DNA circular que são encontradas em bactérias e também em leveduras. Eles utilizam a membrana plasmática para gerar energia. Modelos e exemplos: bactéria Archaea. ● Plasmídeos bacterianos: Eles possuem a capacidade de se replicar de maneira independente e apresentam poucos genes. Uma célula pode ser encontrada várias cópias de plasmídeos e que eles são transferidos de uma célula para outra. Estes possuem informação genética que não são essenciais para a sobrevivência da bactéria, mas estão relacionados com alguma função adaptativa para situações especiais. Como exemplo, plasmídeos que garantem resistência a antibióticos ou aqueles que aumentam a probabilidade de uma célula bacteriana causar alguma doença. Eles são transmitidos por divisão celular e por pili, uma estrutura tubular com extensão citoplasmática. ● Célula bacteriana X Célula fúngica: -reino Monera: São as bactérias e cianobactérias. -Procariontes -Unicelulares -Podem ser heterotróficos( como bactérias decompositoras e as bactérias patogênicas.) -Podem ser autotróficas (como bactérias quimiossintetizantes, as bactérias fotossintetizantes e as cianobactérias). -Metabolismo rápido -reino Fungi: São os cogumelos, orelha de paú, bolores, levedura, etc. -Eucariontes -Uni ou multicelulares -Heterótrofos, inclusive aclorofilados) -Há fungos parasitas, outros decompositores e até predadores. -Tanto os fungos como as bactérias são importantes para a reciclagem da matéria no processo de decomposição. -Metabolismo lento -Só se desenvolvem em ambientes com - 80% de água e pH ácido. -Os fungos podem ter aspectos: 1. algodonoso e purulento (filamentosos): 2. de muco(mucóide) ● Esporos bacterianos e hifas: - Hifas: estão presentes nos fungos e são filamentos que constituem o micélio, podem apresentar diferentes tipos de organização: cenocíticas, hifas que não apresentam septos, e septadas. Pelos poros das hifas septadas ocorre trânsito de citoplasma e de núcleos de uma célula para outra. - Esporos bacterianos: são uma forma de mostrar extrema resistência à inativação química e física. Os esporos bacterianos servem como um estágio de repouso do ciclo de vida bacteriano, ajudando a preservar a bactéria por períodos de condições desfavoráveis. ● Célula bacteriana: 1. Morfologia e Estrutura da Célula Bacteriana : As bactérias podem apresentar diferentes formas: cilíndricas ou bacilos e de espiral. - cocos: são redondos ou ovais, alongados ou achatados em uma das extremidades. Quando as bactérias com esse formato se dividem, as células podem permanecer unidas umas às outras, surgindo em decorrência cocos: -diplococos:pares -estreptococos: cadeias -estafilococos: cachos -sarcina: cocos que se dividem em dois ou três planos e permanecem unidos em planos cúbicos de oito indivíduos, porém são menos frequentes. - Bacilos: só se dividem no plano sobre seu eixo. -diplobacilos: aparecem aos pares e -esteptobacilos: ocorrem em cadeias. Alguns bacilos parecem tanto com cocos que são chamados cocobacilos. Podem ser diferenciados pela rigidez dos corpos: -vírgulas: têm o corpo rígido. -Vibriões e espirilos: têm a forma de saca-rolhas. -espiralados:possuem corpo rígido e se movem às custas de flagelos externos. -espiroquetas:são flexíveis e locomovem se às custas de contrações do citoplasma 2. Coloração: Os métodos de coloração mais empregados em bacteriologia médica são os de Gram e de Ziehl-Neelsen. O método, ou técnica de Gram, consiste, essencialmente, no tratamento sucessivo de um esfregaço bacteriano, fixado pelo calor, com os seguintes reagentes: cristal violeta(VI), lugol(LULU), álcool(ALI), água(AGORA) e fucsina(FUMANDO). Observações para decorar: “As Gram-positivas não se deixam descorar pelo álcool, enquanto as Gram-negativas o fazem sem qualquer dificuldade. “ -As Gram-positivas mantêm a cor roxa do complexo cristal violeta-lugol, e as Gram-negativas, ao receber a fucsina, adquirirem a cor vermelha do corante ● GRAM: -GRAM-POSITIVOS – são os microorganismos que retém o corante cristal violeta por causa do aumento na quantidade do Ac teicóico e diminuição na permeabilidade da parede celular aos solventes por conter MENOS LIPÍDIOS. As Gram-positivas mantêm a cor roxa do complexo cristal violeta-lugol. -Gram negativas: apresentam uma grande quantidade de lipídios na parede, aumentando a permeabilidade aos solventes, permitindo a descoloração, perdendo o cristal violeta, se deixando corar pela fucsina. As Gram-negativas, ao receberem a fucsina, adquirirem a cor vermelha do corante . 3. Estruturas e funções da bactéria: - Membrana citoplasmática: A membrana citoplasmática bacteriana, também chamada membrana plasmática, é uma estrutura de aproximadamente 8 nm de espessura. Esta estrutura forma uma barreira responsável pela separação do meio interno (citoplasma) e externo, sendo vital para a célula. ESTRUTURA QUÍMICA:Como a maioria das membranas biológicas, a membrana das bactérias é composta de proteínas (60%) imersas em uma bicamada de lipídeos (40%), sendo os fosfolipídeos os mais importantes. Os ácidos graxos dos lipídeos são responsáveis pela condição hidrofóbica da porção interna da membrana, enquanto a parte hidrofílica deles fica exposta ao meio externo aquoso. Além das interações hidrofóbicas e pontes de hidrogênio, cátions como Mg e Ca são responsáveis pela manutenção da integridade da membrana. -Função: a) Transporte de Solutos: A membrana plasmática atua como uma barreira altamente seletiva, impedindo a passagem livre de moléculas e íons, possibilitando, assim, a concentração de metabólitos específicos dentro da célula. Além disso, a excreção de substâncias inúteis à célula também é feita através da membrana. Moléculas hidrofílicas polares como ácidos orgânicos, aminoácidos e sais minerais não conseguem passar livremente pela membrana e, por isso, devem ser especificamente transportadas. O transporte de substâncias através da membrana do meio externo para o interno e vice-versa ocorre com o auxílio de "proteínas de transporte de membrana". Podem ser divididas: 1- as proteínas responsáveis pelo transporte de apenas uma substância de um lado para o outro da membrana uniport; 2- as que carregam duas substâncias ao mesmo tempo, uma de interesse da célula e outra necessária para que ocorra o transporte da primeira — co-transportadora. Neste último, o transporte das duas substâncias pode ocorrer na mesma direção, simport, ou em direções opostas antiport. b) Transporte de solutos: A maioria das proteínas envolvidas no transporte está localizada ao longo da membrana com porções expostas tanto ao citoplasma como ao meio externo. Por meio de uma mudança conformacional na proteína, o soluto se ligou a ela do lado externo e é liberado para o lado interno. O mecanismo de transporte que envolve uma proteína transportadora e que ocorre sempre a favor de gradiente é denominado difusão facilitada. Os solutos também podem ser transportados contra um gradiente de concentração e, neste caso, envolvem gasto de energia. c) Produção de energia por transporte de elétrons e fosforilação oxidativa: A presença dos citocromos e de enzimas da cadeia de transporte de elétrons na membrana plasmática lhe confere uma função análoga à da membrana interna dasmitocôndrias em células eucarióticas. O transporte de elétrons por fotossíntese em certas bactérias também ocorre na membrana citoplasmática que substitui, em parte, a função dos cloroplastos em algas e plantas. d)Biossíntese: As enzimas de síntese dos lipídeos da membrana e de várias classes de macromoléculas componentes de outras estruturas externas à membrana estão ligadas à membrana citoplasmática. Uma vez sintetizadas, estas macromoléculas são permeadas para o lado externo pelos canais chamados junções de Bayer. e)Duplicação do DNA: Algumas das proteínas do complexo de duplicação de DNA estão localizadas na membrana plasmática f) Secreção: A membrana está envolvida na secreção de enzimas hidrolíticas que têm como função romper as macromoléculas do meio fornecendo subunidades que servirão como nutrientes. Outras macromoléculas, como toxinas, bacteriocinas, penicilinases, podem também ser secretadas através da membrana plasmática. - ESTRUTURA QUÍMICA : As paredes de bactérias Gram-negativas e Gram-positivas apresentam diferenças marcantes. Bactérias Gram-negativas possuem uma parede composta de várias camadas que diferem na sua composição química e, consequentemente, é mais complexa que a parede das Gram Positivas que, apesar de mais espessa, apresenta predominantemente um único tipo de macromolécula. GRAM POSITIVA – MAIS ESPESSA, MENOS COMPLEXA GRAM NEGATIVA - MAIS COMPLEXA, PORÉM MENOR Na maioria das bactérias, a parede celular deve a sua rigidez a uma camada composta de uma substância somente encontrada em procariotos e que recebe diferentes denominações como mureína, mucopeptídeo, muco complexo, peptidoglicano, peptideoglicano, glicopeptídeo ou glicopeptídeo. O peptidoglicano representa a maior parte da parede das bactérias Gram-positivas, atingindo de 45% a 50% da massa seca da célula, ao passo que nas Gram-negativas não ultrapassa 5%. GRAM POSITIVAS - MAIOR PEPTIDEOGLICANO - MAIS RÍGIDAS Suas propriedades são: a) facilitar a ligação e a regulação da entrada e saída de cátions na célula b) regular a atividade das autolisinas durante o processo de divisão celular. Quando uma célula bacteriana se prepara para se dividir, ocorre o crescimento da parede celular e enzimas denominadas autolisinas atuam sobre o peptidoglicano no sentido de romper seus componentes em pontos específicos, permitindo assim a inserção de novas subunidades. Os ácidos teicóicos atuam na regulação da atividade destas autolisinas, impedindo que quebras excessivas ocorram, provocando a lise celular; c) constituir sítios receptores de bacteriófagos; d) servir de sítio de ligação com o epitélio do hospedeiro em algumas bactérias patogênicas. e) constituir, graças à sua localização na célula, importantes antígenos celulares tornando possível a identificação sorológica de muitas bactérias Gram-positivas. ● COMPONENTES CARACTERÍSTICOS DA PAREDE DAS BACTÉRIAS GRAM-NEGATIVAS: ● Membrana Externa: Como a maioria das membranas biológicas, a membrana externa das bactérias Gram-negativas é formada por dupla camada lipídica. 1. Tem como característica: -uma camada interna composta basicamente de fosfolipídeos -uma externa contendo lipopolissacarídeos e proteínas. -Como todas as bicamadas lipídicas, possuem o interior hidrofóbico devido às cadeias de ácidos graxos. -A parte polissacarídica externa constitui um ambiente hidrofílico. Meio Interior – hidrofóbico Meio Exterior - hidrofílico 2. Componentes: Lipopolissacarídeo (LPS): É constituído de um lipídio complexo (lipídio A) que está ligado a um polissacarídeo chamado antígeno O ou antígeno somático. Os açúcares que formam a cadeia lateral deste polissacarídeo variam de espécie para espécie e, por isso, são responsáveis pelas características antigênicas em bactérias Gram-negativas. O LPS chamado também endotoxina, pois é tóxico, provocando muitas vezes respostas fisiológicas, como febre em animais, incluindo o homem. 2.2Proteínas: Como a membrana citoplasmática, a membrana externa das bactérias Gram-negativas é um mosaico fluido com um conjunto de proteínas imersas na matriz lipídica. As principais proteínas com funções conhecidas são: -Porinas: proteínas triméricas que formam poros que propiciam a passagem passiva de solutos. -Proteínas da membrana externa (outer membrane proteins — OMPs): são na sua forma estrutural diferentes das porinas, também estão envolvidas no transporte de alguns solutos, além de funcionarem como receptores da fímbria sexual e de fagos. -Lipoproteínas: proteínas com função estrutural, onde a parte protéica está covalentemente ligada ao peptideoglicano e à parte lipídica imersa na camada interna de fosfolipídio da membrana externa, fazendo uma ponte entre os dois componentes. “A presença da membrana externa em bactérias Gram-negativas têm características bem exclusivas quando comparadas com as bactérias Gram-positivas.” A forte carga positiva que vem dos polissacarídeos localizados na membrana externa constitui fator importante na evasão destas bactérias à ação de células fagocitárias e ao complemento durante a invasão de um hospedeiro. Essa ação é denominada evasão ao sistema imune. 2.2 Espaço Periplasmático: Espaço compreendido entre as membranas externa e plasmática. Além do peptideoglicano, contém uma série de enzimas e proteínas, tais como: a) enzimas hidrolíticas (proteases, nucleases, lipases): responsáveis pela quebra de macromoléculas, às quais a membrana citoplasmática é impermeável. Produzem, assim, moléculas menores que podem ser transportadas apesar de serem encontradas ao longo da parede, se encontram ligados à fração lipídica da membrana plasmática. Suas propriedades são: 1. facilitar a ligação e a regulação da entrada e saída de cátions na célula, 2. regular a atividade das autolisinas durante o processo de divisão celular. 3. constituir sítios receptores de bacteriófagos; 4. servir de sítio de ligação com o epitélio do hospedeiro em algumas bactérias patogênicas. 5. constituir, graças à sua localização na célula, importantes antígenos celulares tornando possível a identificação sorológica de muitas bactérias Gram-positivas. 2.3 Cápsula, Camada Mucosa e Camada S: Vários procariotos sintetizam polímeros orgânicos que são depositados para fora da parede e são chamados substâncias poliméricas extracelulares (SPE). As SPEs podem formar uma massa mais dispersa, parcialmente desligada da célula chamada, então, camada mucosa. Ambos os envoltórios, com raras exceções, são de natureza polissacarídica. A camada S, encontrada nas arqueobactérias, é composta de proteínas ou glicoproteínas ligadas à parede. Parece ser responsável pela sustentação da célula em bactérias que não possuem um peptidoglicano verdadeiro. Apesar de não serem essenciais à vida da célula, as substâncias poliméricas extracelulares SPE podem desempenhar papéis muito importantes para as bactérias: a) Reservatório de água e nutrientes: visto serem formadas por macromoléculas muito hidratadas, servem como proteção contra dessecação do meio e podem ser fonte de nutrientes. b) Aumento da capacidade invasiva de bactérias patogênicas: as bactérias encapsuladas são escorregadias e escapam à ação dos fagócitos. Assim, a perda da cápsula pode resultar na perda do poder invasor e, em alguns casos, da patogenicidade. c) Aderência: as cápsulas possuem receptores específicos que servem como sítios de ligação com outras superfícies. d) Formação de biofilmes: por causa dos SPEs, bactérias podem produzir os biofilmes capazes de aderir a diferentes superfícies. Os biofilmes têm sido responsáveis por inúmeros problemas nas indústrias, pois são aglomerados microbianos com atividade corrosiva, causando perfurações nas tubulações etc. e) Aumento do poder infectante de alguns tipos de bactérias. Exemplos: bactérias simbióticas,fixadoras de nitrogênio, como as do gênero Rhizobium, ligam-se através das SPEs à superfície de raízes de leguminosas; As bactérias formadoras de cáries (Streptococcus mutans) produzem um polissacarídeo extracelular que se liga ao esmalte do dente e promove o acúmulo de outros microrganismos. Quanto maior o número de bactérias lácticas aderidas, maior a produção de ácido pela fermentação microbiana da sacarose, resultando na desmineralização do esmalte do dente. f) Aumento da resistência microbiana a biocidas: a ação de biocidas que normalmente atuam sobre microorganismos se torna mais difícil quando estes formam o biofilme. g) Produção industrial de SPEs: polissacarídeos extracelulares de microorganismos têm sido produzidos e utilizados industrialmente como espessantes de alimentos, tintas etc. Exemplo:Plásticos biodegradáveis. 2.4 Flagelo: O flagelo bacteriano é responsável pelo movimento da célula e é formado de uma estrutura basal, um longo filamento externo à membrana. O filamento é composto de um único tipo de proteína chamada flagelina. Porém nem todas as células têm flagelo. O comprimento de um flagelo é maior que o da célula, mas seu diâmetro é uma pequena fração do diâmetro celular. Nas eubactérias de interesse médico, pode generalizar que muitas espécies de bacilos apresentam flagelos, mas eles ocorrem nos cocos. A localização e o número de flagelos são utilizados na classificação das bactérias em certos grupos taxonômicos. Os flagelos são muito finos e apenas com o aumento do seu diâmetro por meio de colorações especiais podem ser observados ao microscópio. Anfitríquio: Lofotríquio: Monotríquio: Peritríquio: 2.5 Fímbrias, Pêlos ou Pili: Muitas bactérias Gram-negativas apresentam filamentos proteicos que não são flagelos, chamados fímbrias que são menores, mais curtos e mais numerosos que os flagelos, além de não formarem ondas regulares. Sem papel de motilidade. Fímbria F: A fímbria sexual serve como condutor de material genético durante a conjugação bacteriana. Agem também como Receptores de bacteriófagos e estruturas de aderência. 2.6 Nucleóide: Ausência de membrana nuclear e de aparelho mitótico. Preenchido por fibrilas de DNA dupla hélice em forma de molécula única 2.7 Plasmídeos: No citoplasma podem existir moléculas de DNA circulares, menores que cromossomos, cujos genes não determinam características essenciais, porém conferem vantagens seletivas. Possuem capacidade de autoduplicação independente de replicação cromossômica e podem ter número variável. Exs: Fatores sexuais (fator F), fator de resistência a antibióticos (fator R), plasmídeo de fixação de nitrogênio, etc. 2.7 Componentes Citoplasmáticos: Há partículas insolúveis dentro deste líquido, sendo algumas essenciais como ribossomos e nucleóide. Ribossomos: partículas citoplasmáticas onde ocorre a síntese proteica. São compostos de RNA (60%) e ptns (40%). Embora sejam diferentes estruturalmente em procariontes e eucariontes, sua função é a mesma. Grânulos: Sua natureza química é variável de organismo para organismo, porém é quase sempre de substâncias de reserva e subunidades para compor outras estruturas celulares. Grânulos metacromáticos: glicogênio, amido e polifosfatos. O armazenamento de polímeros insolúveis permite o acúmulo de substâncias de reserva sem aumentar a pressão osmótica da célula. Vacúolos gasosos: são encontrados em organismos que vivem flutuando em lagos ou mares. Sua membrana é constituída de unidades de proteínas repetidas, sendo somente permeável a gases. Esporos bacterianos: Os endósporos são estruturas formadas por algumas bactérias Gram-positivas, sobretudo os gêneros Clostridium e Bacillus, quando o meio se torna inóspito. Bactérias esporogênicas são comumente encontradas no solo. Sob determinadas circunstâncias, a célula em vez de se dividir, passa por eventos que levam à formação dos esporos. ● Fungos: - Principais características: Há dois tipos morfológicos principais: fungos filamentosos (bolores ou mofos) e leveduras. Os bolores crescem como filamentos ramificados chamados hifas (2 a 10 μm de diâmetro), enquanto as leveduras unicelulares têm forma oval ou esférica (3 a 5 μm de diâmetro). Fungos dimórficos ocorrem tanto na forma de bolores como na de leveduras. Fatores ambientais geralmente determinam a forma na qual os fungos dimórficos aparecem. Fungos como Candida albicans, que produzem formas adicionais a essas duas principais, são descritos como polimórficos. Os fungos crescem sendo que muitos são aeróbios estritos. A temperatura para crescimento ótimo de diferentes grupos de fungos patogênicos e o tempo de incubação requerido para desenvolvimento de características coloniais distintivas são variáveis. A reprodução por formação de esporos pode ser sexuada ou assexuada. Em algumas espécies, ambos os tipos de formação de esporos ocorrem. Os fungos toleram pressões osmóticas altas e meios ácidos com pH inferior a 5. - Classificação: leveduras: células únicas, reproduzem por brotamento. fungos filamentosos: multicelulares, crescem como filamentos longos (hifas)
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