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TÉCNICAS DE SEMEADURA DE MICROORGANISMOS PROFESSORA: KARLETE VÂNIA MONITORA: KAMILLA VIRGÍNIO Introdução ‐ A inoculação correta de uma amostra é um dos passos mais importantes na identificação de um patógeno; ‐ Pode ser feita por meio de swabs, ou de outras fontes, como alça de inoculação devidamente esterilizadas; ‐ Devem ser verificados nos meios se existe algum tipo de contaminação; ‐ As bactérias são semeadas em meios líquidos ou em meios sólidos; ‐ Após a inoculação, a placa ou o tubo, devidamente rotulado, é colocado em uma incubadora a 37°C por 24 a 48 horas; 2 Introdução ‐ Crescimento bacteriano em meio sólido: colônias (grupos de células bacterianas); ‐ Meio líquido: Turvação do líquido; ‐ As estrias da semeadura são feitas a fim que se consiga isolamento dos organismos; ‐ Análise: elevação, forma, tamanho, bordas, pigmentação; ‐ Único tipo de colônia: cultura pura - Vários tipos: cultura mista; - Existem várias técnicas de inoculação de microorganismos. Algumas são utilizadas para exames qualitativos e outras, para estudos quantitativos. ‐ 3 objetivos 4 5 - Realizar a inoculação em meios de cultura líquidos, sólidos em placa e inclinados “semi-sólidos”, verificando a presença ou ausência de crescimento bacteriano. Procedimento 6 7 Técnica de semeadura em meio líquido 8 Flambar a alça Identificar o tubo Agitar levemente Flambar a boca do tubo Introduzir a alça e retirar após coletar a gota Flambar novamente a boca do tubo 9 Flambar tubo com meio esterilizado Introduzir a alça carregada com microorgani smo Retirar a alça e flambar novamente a boca do tubo Tubo na estante e flambar alça, recolocá-la na estante 10 Técnica de esgotamento Meio sólido inclinado “ 11 Pode-se utilizar alça ou agulha Introduzir a agulha carregada de microrganismo no interior do tubo Levando-a ao interior do meio inclinado, fazendo estrias na superfície do ágar 12 Técnica de repicagem profunda Meio semi sólido em tubo 13 Utiliza-se a agulha Introduzir a agulha carregada com microrganismo no interior do tubo, levando-a ao interior do meio semi sólido Inocular a cultura. Deverá possuir a profundidade de dois terços do meio, aplicando apenas uma picada 14 Técnica de esgotamento em placa Meio sólido 15 Consiste em depositar sobre um ponto da superfície do meio uma parte do material, depois espalhá-la Obter quantidades progressivame nte menores do material Formação de colônias perfeitamente isoladas Estrias simples Estrias em quadrante 16 Alça de Drigalski Swabe Outros instrumentos utilizados 17 O sucesso da semeadura está em: Pegar uma quantidade pequena de material para semear Não se voltar a alça sobre a estria Não se perfurar o meio Haver um grande número de estrias 18 obrigada! Dúvidas?
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