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Avaliação Aula assíncrona Coloração de Ziehl Neelsen e Meios de Cultivo e Técnicas de Semeio Aluna: Carolina Reis Baseggio 1. Em relação a coloração de Ziehl Neelsen qual seria as aplicações da fucsina fenicada e o azul de metileno na realização desta técnica. A fucsina fenicada é corante primário utilizado como reagente de Ziehl Neelsen e o azul de metileno é o corante de contraste. A técnica se inicia com a fixação do esfregaço pelo calor e em seguida cobertura da lâmina com a fucsina fenicada, depois há o descoramento com álcool-ácido e o contracorado com o azul de metileno, assim têm-se a lâmina pronta. Todas as estruturas absorvem o corante (fucsina fenicada), a lâmina é submetida à ação do álcool-ácido, que descora todas as estruturas celulares, exceto os BAAR (Bacilos álcool-ácido resistentes). Para facilitar a microscopia, faz-se uma coloração de fundo com azul de metileno. Os Bacilos Álcool-Ácido Resistentes, coram-se em vermelho contra um fundo azul: Resultados: • Microbactérias: Células finas em formato de bastão coradas em vermelho. • Cocos gram positivo: Células esféricas coradas em azul. • Bacilos gram negativo: Células em formato de bastão coradas em azul. • Células Epiteliais: Tonalidade azulada. • Coloração de Fundo: O fundo da lâmina apresenta-se límpido e isento de sujidades ou precipitados. 2 . Em relação aos meios de cultura conceitue e exemplifique: a) Meio de Cultura Diferencial: É o meio de cultura utilizado para detectar colônias bacterianas com propriedades distintas. Exemplos: Ágar EMB: é um meio seletivo e diferencial empregado no isolamento de bactérias Gram negativas. A seletividade do EMB Teague Ágar é assegurada pela presença da eosina e do azul de metileno que inibe o crescimento de bactérias Gram positivas. Ágar Sangue: é um meio de cultura diferencial e não seletivo, rico em nutrientes, utilizado para isolamento de microorganismos não fastidiosos, prova de satelitismo e verificação de hemólise de Streptococcus spp. e Staphylococcus spp b) Meio de Cultura Seletivo: É o meio de cultura que contém substâncias que inibem o crescimento de certos microrganismos, sem impedir o crescimento de outros. A exemplo: Ágar Salmonella-Shigella (SS): A diferenciação de organismos entéricos consegue-se através da incorporação de lactose no meio. Os organismos que fermentam a lactose produzem ácido que, na presença do indicador vermelho neutro, resulta na formação de colónias vermelhas. Os organismos não fermentadores da lactose formam colónias incolores. Ágar MacConkey: É um meio de cultura destinado ao crescimento de bactérias Gram negativas e indicar a fermentação de lactose. Colônias bacterianas que fermentam lactose tornam o meio rosa choque e as bactérias que não são fermentadoras de lactose tornam o meio amarelo claro. c) Meio de Cultura Enriquecimento: É o meio de cultura que permite o crescimento de micro-organismos exigentes que necessitam de fatores específicos de crescimento. Exemplos: BHI: O caldo BHI é um meio de cultura utilizado para cultivo de estreptococos, pneumococos, meningococos, enterobactérias, não fermentadores, leveduras e fungos. De coloração original amarela e límpida a turvação é indicativa de crescimento bacteriano de Streptococcus pneumoniae e Candida albicans. Ágar sangue: É um meio diferenciador e enriquecedor. Ágar chocolate: É um meio enriquecido e não seletivo para cultivo de bactérias delicadas e exigentes. Uma variante do ágar sangue. Contém glóbulos vermelhos lisados para liberar hemina, NAD e hematina que dão a coloração marrom característica.