Eletroforese

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Eletroforese
M É T O D O S E I N S T R U M E N T O S D E A N Á L I S E
C I Ê N C I A S B I O M É D I C A S L A B O R A T O R I A I S
1 º A N O - 2 º S E M E S T R E
Docente: Ana Carina Santos 
Discentes: Beatriz Guisado nº 20191308
Marta Diogo nº 20201534
Rafael Pinto nº 20201531
Tiago Plácido nº 20201841
Introdução
Métodos e Instrumentos de Análise 
Esta técnica foi 
descoberta em 1937 
pelo bioquímico 
Arne Tiselius
Eletroforese 
de fase 
líquida 
Em 1949, Linus 
Pauling faz uma 
descoberta 
importante 
Fracionamento 
isoelétrico da 
Hemoglobina S
Princípios da Técnica de Eletroforese
Métodos e Instrumentos de Análise 
Figura 1 – Representação esquemática da Eletroforese
Tipos de Tinas de Eletroforese
Métodos e Instrumentos de Análise 
Figura 2 – Tina de 
eletroforese horizontal
Figura 3 – Tina de 
eletroforese vertical
Aplicação Geral da Eletroforese
1. O fracionamento de proteínas, enzimas e hemoglobinas para o estabelecimento
de concentrações alteradas e/ou posicionamentos anormais de frações que
permitem descobrir patologias;
2. O fracionamento de segmentos de DNA, RNA previamente submetidos a
métodos de biologia molecular que irão permitir a resolução de casos de
paternidade, descobertas a nível forense e genótipos e haplótipos de interesse
clínico e antropológico.
Métodos e Instrumentos de Análise 
Principais
Tipos de 
Eletroforese
e as suas
Aplicações
Gel de Agarose
Métodos e Instrumentos de Análise 
• É utilizado para o fracionamento eletroforético sobretudo de 
DNA/RNA;
• Possui uma ampla capacidade de separação, boa resolução e 
é usado na clínica e a na investigação.
Figura 4 – Representação do movimento dos 
fragmentos de DNA
PCR
• É a reação em cadeia da polimerase e é uma técnica de rotina 
que permite fazer uma multiplicação, ou seja, permite a 
obtenção de muitas cópias de uma região especifica do DNA, 
in vitro;
• As etapas básicas da PCR são a desnaturação, a ligação e a 
extensão/síntese; 
• Na técnica existe a adição de um corante de ácidos nucleicos: 
o brometo de etídio. Figura 5 – Bandas de DNA fluorescentes 
após coloração com Brometo de Etídio
Métodos e Instrumentos de Análise 
Gel de Poliacrilamida (PAGE)
• O PAGE é uma técnica muito utilizada em química forense, bioquímica, 
biologia molecular, genética e biotecnologia.
• Pode ser utilizada em amostras que contenham ácidos nucleicos ou proteínas.
• Resulta da polimerização da acrilamida e metilenobisacrilamida.
• O processo prático é realizado numa tina de eletroforese vertical, ao contrário 
do gel de agarose.
• É um método vantajoso por ser barato e a aquisição dos resultados ser rápida.
Métodos e Instrumentos de Análise 
Figura 6 – Bandas de DNA 
após coloração com 
Coomassie brilliant blue
Acetato de Celulose
Vantagens:
• Material neutro;
• Absorção uniforme das proteínas;
• Micróporos homogéneos;
• Boas condições de armazenamento por longos períodos de tempo; 
• Baixo custo o que torna este meio ideal para uso na rotina laboratorial;
• Permite o fracionamento de proteínas, lipoproteínas, hemoglobinas e substâncias com 
baixo peso molecular como aminoácidos, peptídeos e nucleótidos;
• Rápida separação proteica.
Métodos e Instrumentos de Análise 
Figura 8– Tiras de acetato 
de celulose coradas
Acetato de Celulose
Desvantagens:
• O fracionamento proteico é limitado, por separar apenas 
cinco a sete grupos de proteínas;
• Com o desenvolvimento de novas técnicas que permitem 
principalmente uma separação proteica de alta resolução, 
esta técnica caiu em desuso.
Métodos e Instrumentos de Análise 
Focalização Isoelétrica
• A focalização isoelétrica é um método utilizado 
especificamente para o fracionamento de espécies 
moleculares.
• É aplicada uma corrente elétrica que não seja forte ao ponto 
de fazer com que as moléculas percam a sua carga original.
• Após atingirem o seu ponto isoelétrico concentram-se em 
zonas ou faixas à medida que alcançam a sua posição final e 
ficam dentro de um intervalo de pH estabelecido.
Métodos e Instrumentos de Análise 
Figura 9 – Esquema representativo das faixas de pH 
6,0 a 11,0 obtido pelo uso dos géis de agarose ou 
poliacrilamida 
• Um exemplo prático do uso da focalização isoelétrica é o teste do pezinho, que é feito em 
recém-nascidos com o objetivo de fazer o rastreamento de hemoglobinopatias.
Métodos e Instrumentos de Análise 
Figura 10 – Representação do teste do pezinho e eletroforese da 
hemoglobina 
Conclusão
Referências Bibliográficas
• BRAMMER, S. P. A técnica de eletroforese: importância e aplicações em análises genéticas. Embrapa Trigo, 2001
[Consult. 8 de maio de 2021]. Disponível em
https://www.infoteca.cnptia.embrapa.br/bitstream/doc/852459/1/pdo06.pdf
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https://www.ciencianews.com.br/arquivos/ACET/IMAGENS/livros/acesso_gratuito/Livro_completo%20-
%20Eletroforese.pdf
• Eletroforese em gel. (2016) [Consult. 8 de maio de 2021]. Disponível em
https://pt.khanacademy.org/science/biology/biotech-dna-technology/dna-sequencing-pcr-electrophoresis/a/gel-
electrophoresis
• OLIVEIRA, E.; TRENTIN, T.; CAMARGO, F.; PINTO, Y.; MARTINS, D. Eletroforese: conceitos e aplicações. (2015) [Consult. 8
de maio de 2021]. Disponível em https://www.conhecer.org.br/enciclop/2015c/agrarias/Eletroforese.pdf
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https://pt.khanacademy.org/science/biology/biotech-dna-technology/dna-sequencing-pcr-electrophoresis/a/gel-electrophoresis
https://www.conhecer.org.br/enciclop/2015c/agrarias/Eletroforese.pdf
Referências Bibliográficas
• CORRÊA, E.; POSSIK, P. A análise de DNA por eletroforese [Consult. 8 de maio de 2021]. Disponível em
https://www.ciencianews.com.br/arquivos/ACET/IMAGENS/biologia_molecular/testesgeneticos.pdf
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https://www.hospitaldaluz.pt/pt/guia-de-saude/dicionario-de-saude/T/186/teste-pezinho-diagnostico-
precoce
• Focalização isoelétrica, Wikipédia, a enciclopédia livre (2018) [Consult. 9 de maio de 2021]. Disponível
em https://pt.wikipedia.org/wiki/Focaliza%C3%A7%C3%A3o_isoel%C3%A9trica#T%C3%A9cnica
• Manual do paciente, Tenho Traço Falcêmico… e agora? (2004) [Consult. 10 de maio de 2021]. Disponível
em http://www.hemorio.rj.gov.br/Html/pdf/manuais_2010/Tenho_traco_falcemico_agora.pdf
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Referências Bibliográficas
• Eletroforese em Gel de Poliacrilamida, Portal educação [Consult. 8 de maio de 2021]. Disponível em
https://siteantigo.portaleducacao.com.br/conteudo/artigos/biologia/eletroforese-em-gel-de-poliacrilamida/23316
• What is Polyacrylamide Gel Electrophoresis (PAGE)?, News Medical Life sciences (2019) [Consult. 8 de maio de 2021].
Disponível em https://www.news-medical.net/life-sciences/What-is-Polyacrylamide-Gel-Electrophoresis-(PAGE).aspx
• Polyacrylamide Gel Electrophoresis, Cleaver Scientific [Consult. 8 de maio de 2021]. Disponível em
https://www.cleaverscientific.com/applications/polyacrylamide-gel-electrophoresis/
• Reação em cadeia da polimerase (PCR). [Consult. 10 de maio de 2021]. Disponível em
https://pt.khanacademy.org/science/biology/biotech-dna-technology/dna-sequencing-pcr-
electrophoresis/a/polymerase-chain-reaction-pcr
https://siteantigo.portaleducacao.com.br/conteudo/artigos/biologia/eletroforese-em-gel-de-poliacrilamida/23316
https://www.news-medical.net/life-sciences/What-is-Polyacrylamide-Gel-Electrophoresis-(PAGE).aspxhttps://www.cleaverscientific.com/applications/polyacrylamide-gel-electrophoresis/
https://pt.khanacademy.org/science/biology/biotech-dna-technology/dna-sequencing-pcr-electrophoresis/a/polymerase-chain-reaction-pcr
	Eletroforese
	Introdução 
	Princípios da Técnica de Eletroforese
	Tipos de Tinas de Eletroforese
	Aplicação Geral da Eletroforese
	Principais Tipos de Eletroforese e as suas Aplicações�
	Gel de Agarose
	PCR
	Gel de Poliacrilamida (PAGE)
	Acetato de Celulose
	Acetato de Celulose
	Focalização Isoelétrica
	Slide Number 13
	Conclusão
	Referências Bibliográficas
	Referências Bibliográficas
	Referências Bibliográficas