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MICROBIOLOGIA – Rafaela Negri Classificação das bactérias Critérios de classificação: -Características de crescimento in vitro: aspectos macroscópicos e propriedades metabólicas -Aspectos microscópicos -Antigenicidade -Genótipo -Proteômica Crescimento: -Aumento do numero bacteriano, e não do tamanho da bactéria em si -Tempo de geração ® tempo levado para a reprodução -Condições para o crescimento bacteriano: • Fatores químicos: o Nutrientes • Fatores físicos: o Temperatura o Pressão osmótica o Disponibilidade de gases o pH Características de crescimento in vitro: aspectos macroscópicos e propriedades metabólicas -Meios de cultivo com nutrientes e seletivos -Meios de cultivo (podem ser comprados prontos ou feitos em laboratório): • Água • Fontes de carbono • Fontes de nitrogênio • Sais minerais: P, S, Fe • Fatores de crescimento: fastidiosos (mais exigentes nutricionalmente) -Meio enriquecido: • Mais conhecido é o agar-sangue (apresenta 5% de sangue de carneiro em sua composição) -Meio seletivo: • Possui um agente que vai inibir seletivamente o crescimento de um grupo de bactérias • Mac Conkey ® é seletivo para bactérias gram-negativas, pois inibe o crescimento de gram-positivas (também é indicador de bactérias que utilizam a lactose em seu crescimento) • Sal manitol ® alta concentração de sal (alta pressão osmótica) e açúcar (manitol) ® seletivo para estafilococos -Aspectos macroscópicos: • Cor • Tamanho • Cheiro • Forma • Elevação • Margem -Propriedades metabólicas: • Produzir hemólise: produção de hemolisinas (utilizada para classificação e identificação de estreptococos) • Utilização da lactose (pode ser observada no agar Mac Conkey) • Formação de coagulo: produção de coagulase Aspectos microscópicos: -Forma: • Cocos • Bacilos • Vibriões • Espirilos • Espiroquetas -Arranjo: • Diplococos • Tetrades • Sarcina cocos • Estreptococos • Estafilococos • Diplobacilo • Estreptobacilo bacilos • Cocobacilos MICROBIOLOGIA – Rafaela Negri -Coloração: • Coloração de gram: o Gram-positivas ® violeta/roxo o Gram-negativas ® avermelhadas/rosa • Coloração acido álcool resistente - AAR (detecção de micobacterias) Antigenicidade: -Anticorpos: detecção de antígenos característicos da bactéria -Técnica: sorotipagem -Exemplos: • Identificação de Strptococcus (antígenos de Lancefield) • E. coli sorotipo O157:H7, responsável pela colite hemorrágica • Identificar organismos de difícil observação e cultura: Treponema pallidum Diferenciação genética: -Muito importante em relação a confiança dos resultados -Permitem identificar microrganismos e realizar diagnostico de doenças infecciosas -Técnicas de biologia molecular: • Hibridização de DNA (sondas genéticas que são marcadas com componentes fluorescentes) • Amplificação de fragmentos gênicos por reação em cadeia da polimerase (PCR) • Sequenciamento de DNA -Não necessitam de bactérias em crescimento -Material biológico: rápida detecção e identificação de organismos de crescimento lento, como micobacterias Proteômica: -Novo método de espectrometria de massas por MALDI-TOF-MS -Muito utilizada pela química -Utilizam as bactérias crescidas em cultura ® são colocadas no aparelho e coberta por uma matriz -É incidido um raio lazer, e com isso, os componentes químicos da amostra são ionizados -O espectro de proteínas identificado é comparado com um banco já existente do espectro de inúmeras bactérias
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