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LAURA ARAUJO - MED102 AULA 1 E X A M E S COMPLEMENTARES EM DOENÇAS INFECCIOSAS - POSTULADOS DE KOCH: Formulados inicialmente por Henle e adaptados por Koch em 1877. 1. A presença do agente deve ser sempre comprovada em todos os indivíduos quem sofram da doença em questão. 2. O a g e n t e n a o p o d e r á s e r encontrado em casos de outras doenças. 3. Uma vez isolado, o agente deve ser capaz de reproduzir a doença em questão após ser inoculado em animais experimentais. 4. O m e s m o a g e n t e d e v e s e r re c u p e r a d o d e s t e s a n i m a i s experimentalmente infectados e de novo isolados em cultura pura - POSTULADOS DE EVANS: Elaborados por Alfred Evans em 1976, são totalmente em 10, dos quais destacamos: 1. A proporção de indivíduos doentes entre os expostos a suposta causa deve ser significativamente maior que entre os não expostos. 2. O numero de novos casos da d o e n ç a d e v e r a s e r significativamente maior naqueles expostos a suposta causa que naqueles nave expostos. - PROPÓSITOS 1) I s o l a r e i d e n t i fi c a r microorganismos 2) Determinar suscetibilidade aos antibióticos. - NORMAS GERAIS PARA ORIENTAR A COLETA DAS AMOSTRAS: - A s a m o s t r a s d e v e m s e r representativas da infecção. - Deve ser colhida quantidade suficiente da amostra. - Evitar a contaminação das amostras. - Rapidez no envio do material ao laboratório. - Colher o material antes de iniciar o antibiótico. - SWABS: • Devem ser utilizados para coleta de material de pele e mucosas, apenas. • Material de nasofaringe: • Pesquisa de doenças virais: - Covid-19; - Influenza. • Pe s q u i s a d e p o r t a d o r e s d e bactérias: - Staphylococcus aureus; - Neisseria Meningitidis; - Corynebacterium diphteriae; - Bordatella pertussis. • Material de orofaringe: - Principais indicações: 1. Amigdalite estreptocócica: fazer coloração de Gram e cultura em Agar-sangue. 2. Difteria: azul de metileno de Loeffer. LAURA ARAUJO - MED102 LAURA ARAUJO - MED102 AULA 1 - ESCARRO: • Não é o melhor, pois passa pela orofaringe e pode se contaminar. • Avaliação da qualidade do material: Gram 100x <10 cels. epiteliais e >25 leucócitos. - P r i n c i p a i s c o l o r a ç õ e s p a r a bacterioscopia: 1) Gram (1000x): Pneumococo e Estreptococo. 2) Ziehl-Neelsen: Microbactérias. 3) KOH ou Nanquim: Fungos. • Culturas em meios para germes aeróbios: resultado duvidoso; sempre preferível utilizar o lavabo bronco-alveolar. - Meios de cultura específicos: 1) Lowenstein-Jensen: M.tuberculosis. 2) Agar-Sabouraud ou BHI: fungos. 3) BMPA: Legionella pneumophila (não tem no Brasil). - URINOCULTURA: • Técnica em “meio de jato”, se despreza o inicio e o final da urina. • Método quantitativo >100.000 col/ ml. • Iniciar o cultivo até 2 horas após a coleta. • Evitar a coleta do materisl em pacientes com cateter vesical de demorar; se possível, utilizar a via supra-púbica. • Meios mais utilizados: Agar-Sangue, Mac-Conckey ou Azul-de-Metileno- Eosina. - HEMOCULTURAS: • Colher 3 a 6 amostras intermitentes. • Colher 10ml ou mais. • O material deverá ser incubado a 37ºC por sete dias. • Evitar a administração prévia de antibióticos. • “Pico Febril” sem importância. -LIQUOR : • C o r a r m a t e r i a l p e l o G r a m (meningococo, pneumococo e Haemophilos influenzae) e pelo Azul de Toluidina ou Nanquim (fungos). • T e s t e s d e A g l u t i n a ç ã o : meningococo, pneumococo e Criptococcus neoformans. • Meningite Tuberculosa: esfregaço pelo Ziehl-Neelsen, cultura em meio de Lowenstein-Jensen e PCR. LAURA ARAUJO - MED102 LAURA ARAUJO - MED102 AULA 1 - SECREÇÃO URETRAL: Blenorragia (Gonorreia): 1) Colher o material pela manhã, antes da primeira micção. 2) B a c t e r i o s c o p i a p e l o G r a m : (diplococos Gram negativos). 3) Cultura em meio de Thayer-Martin. - TESTES SOROLÓGICOS: • Visam provar um diagnóstico específico. • Existem muitas técnicas para a mesma infecção. • A escolha do método depende da n a t u r e z a d o a n t í g e n o (especificidade), disponibilidade do t e s t e ( c u s t o x b e n e fi c i o ) e capacidade da técnica em detectar anticorpos (sensibilidade). • Princípios Gerais I: - O d i a g n ó s t i c o s o r o l ó g i c o frequentemente é retrospectivo e a decisão terapêutica costuma ser tomada antes que o resultado esteja disponível ao médico. - A presença de anticorpos IgM sempre indica infecção recente. • Princípios Gerais II: - Para o diagnóstico de infecção AG U DA c o m a n t i c o r p o s I g G compara-se os títulos do soro do paciente com um intervalo de 4 semanas, constatando-se uma elevação de 4 vezes na titulação para confirmação. - Títulos muito elevados em uma única amostra de soro na fase de convalescença também podem indicar infecção recente. • Principais técnicas para detecção de Ag e Ac: - Imunodifusão; - Aglutinação; - Inibição da Hemaglutinação; - Radioimunoensaio; - Fixação do Complemento; - I m u n o fl u o re s c ê n c i a D i re t a e Indireta; LAURA ARAUJO - MED102 LAURA ARAUJO - MED102 AULA 1 - Elisa e variações; - Diluições seriadas; - T É CN I C A S D E B I O LO G I A MOLECULAR: • Sondas de DNA e RNA ribossomal. • PCR - Reação em Cadeia da Polimerase. • NASBA - Nucleic Acid Based Sequence Amplification. • LCR - Reação em Cadeia da Ligase. • SDA - Strand Displacement Amplification. • B-DNA - Reaxao de Branched-DNA. • Captura Híbrida.