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Processos Biológicos Relatório sobre aula prática de Hemólise Osmótica Lista de ilustrações Figura 1 – Ilustração de sistemas osmóticos FigurA 2 – Medidor osmótico Sumário Introdução 3 Objetivo 3 Métodos 4 Resultados 5 Introdução O presente trabalho busca relatar e elucidar as informações a respeito da hemólise osmótica ocorrida em nossas hemácias, as células sanguíneas. É finalidade desse trabalho disseminar mais conhecimento a respeito das células, e, mais especificamente, informações sobre os processos ditos passivos nos glóbulos vermelhos. As informações aqui apresentadas foram reunidas após a realização de uma aula prática no laboratório e com auxílio de pesquisas feitas através da Internet. Objetivo O Objetivo do experimento foi identificar as diferentes soluções presentes nos tubos de Eppindorf, com o qual os reagentes do NaCl, uréia e água destilada estiveram em ação com a hemoglobina, provocando soluções Hipotônicas e Hipertônica no interior das células. Soluções Hipotônicas: causa o inchamento para dentro da célula, havendo o seu rompimento. Soluções Hipertônica: Provoca osmose para fora da célula, resultando em seu equilíbrio. 3 Materiais Água destilada 10 tubos eppendorf de 2 mL Pipetas tipo Pasteur de 2 mL 1 Rack sem tampa para tubos de 1,5 a 2,0 mL Reagentes NaCl São Paulo 2018 *0,075 mL *0,1 mL *0,15 mL *0,175 mL *0,2 mL *1,0 mL Reagentes Uréia *0,1 mL *0,3 mL *1,0 mL 1 Tubo de sangue Método: -Numerar os tubos de 1 ao 10; -Preencher os tubos do 1 ao 6 com os reagentes de NaCl respectivamente; -Preencher os tubos do 7 co 9 com os reagentes de Uréia respectivamente; -Preencher o tubo 10 com água destilada; - Acrescentar 2 gotas de sangue com auxílio da pipeta de pauster nos tubos -Observar e anotar4 Resutados A água se movimenta livremente através da membrana, sempre do local de menor concentração de soluto para o de maior concentração. A pressão com a qual a água é forçada a atravessar a membrana é conhecida por pressão osmótica. A osmose não é influenciada pela natureza do soluto, mas pelo número de partículas. Quando duas soluções contêm a mesma quantidade de partículas por unidade de volume, mesmo que não sejam do mesmo tipo, exercem a mesma pressão osmótica e são isotônicas. Caso sejam separadas por uma membrana, haverá fluxo de água nos dois sentidos de modo proporcional. Quando se comparam soluções de concentrações diferentes, a que possui mais soluto e, portanto, maior pressão osmótica é chamada hipertônica, e a de menor concentração de soluto e menor pressão osmótica é hipotônica. Separadas por uma membrana, há maior fluxo de água da solução hipotônica para a hipertônica, até que as duas soluções se tornem isotônicas. A osmose pode provocar alterações de volume celular. Uma hemácia humana é isotônica em relação a uma solução de cloreto de sódio a 0,9% (“solução fisiológica”). Caso seja colocada em um meio com maior concentração, perde água e murcha. Se estiver em um meio mais diluído (hipotônico), absorve água por osmose e aumenta de volume, podendo romper (hemólise).5 A pressão osmótica de uma solução pode ser medida em um osmômetro. A solução avaliada é colocada em um tubo de vidro fechado com uma membrana semipermeável, introduzido em um recipiente contendo água destilada, como mostra a figura. Por osmose, a água entra na solução fazendo subir o nível líquido no tubo de vidro. Como no recipiente há água destilada, a concentração de partículas na solução será sempre maior que fora do tubo de vidro. Todavia, quando o peso da coluna líquida dentro do tubo de vidro for igual à força osmótica, o fluxo de água cessa. Conclui-se, então, que a pressão osmótica da solução é igual à pressão hidrostática exercida pela coluna líquida. 6 Discussão: Com o experimento realizado, tivemos como principal objetivo analisar a Hemólise Osmotica em diferentes concentrações. Primeiro, o sangue reagindo com o Cloreto de Sódio (NaCl). Ressaltando que a célula tem uma concentração de 0,15 M. Nesse primeiro experimento, levando em consideração a concentração das amostas e reagentes, notamos que, quando o NaCl á 0,075 e 0,1 está agindo com o sangue a concentrações inferiores ao valor mencionado acima, ocorre Hemólise por diferença de concentração, ou seja, a água entra nas hemácias, indo em sentido de um meio menos concentrado para um mais concentrado, lisando as células e liberando hemoglobina, tornando a amostra de cor vermelho translucido. No tubo de concentração igual a concentração da célula a solução é isotonica. Nos tubos de concentração 0,175 M á 1,0 M a solução é hipertonica em referência a concentração da célula de 0,15 M havendo um deslocamento de água para o exterior da célula fazendo com que a célula murche. Ao misturamos o sangue com a Ureia, notamos que há uma grande diferença no rompimento das hemácias A ureia, por ser um soluto onde, sua característica é ir de um meio mais concentrado para um meio menos concentrado(Osmose) o rompimento das células se torna mais dificultado, quando em concentrações maiores, como de 1,0M. 7 Bibliografias Conteúdo retirado das anotações das explicações dadas em aula pela professora anotadas no caderno de cada integrante do grupo. 8 4
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