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Patologia Clínica Variáveis Pré-analíticas: Interferem no resultado do diagnóstico. Analise da amostra biológica:: Amostra de algo que esta vivo, ou seja, são amostras biológicas de qualquer animal (sangue, urina, fezes, leite, secreções) Preparo do Animal 1) DIETA: Certos exames requerem restrição alimentar e/ou hídrica (4hrs). Interfere nas dosagens de minerais, açucares, lipídeos e hormônios) - HIPERLIPIDEMIA: Soro ou plasma turvo, causam hemólise., afetando os parâmetros hematológicos. 2) EVITAR ATIVIDADE FISICA: Afeta parâmetros hematológicos, níveis de gases respiratórios e enzimas musculares. Em gatos, causa hipertireoidismo. EXAMES REPOUSO ANTES DA COLETA (min) Ácido lático 30 Gasometria 15 Hormônio tireoidiano em gatos 120 3)ESTRESSE OU ATAQUES CONVULSIVOS: Decorrente do manejo para coleta de amostras, afeta glicemia, leucograma e % de enzimas musculares. Materiais específicos para coleta de amostras Todo material com amostra biológica deve ser cuidadosamente preparado e uso de EPI’S. · Amostra de sangue = Cel. sanguínea + Plasma. · Plasma = Parte líq. + Fibrinogênio. · Soro = Parte líq. + Fibrinogênio. Para coleta de plasma, deve-se usar um tubo anticoagulante, para não coagular (plasma contém proteína, glicose, água e minerais) - Fibrinogênio esta no plasma e ajuda na coagulação. - Coleta de soro = sem anticoagulante. Soro contém proteínas, hormônios, TUDO, mas o soro não tem fibrinogênio) MATERIAIS PARA COLETA: Garrote, algodão/gaze, álcool (70%)/clorexidine, seringas, tubos e vacutainer. (Não utilizar em pequenos animais, pelo calibre da veia ser menor). Agulhas - Marrom: Insulina - Violeta: Líq. Demora mais para sair ( NÃO COLETAR SANGUE, DESTRÓI AS HEMACEAS). - Preta: todos os animais (+ tradicional) - Rosa: Grandes animais (todas as vias) - Verde: Pequenos e Bezerros. - Transparente: Grandes animais, Transfusão de sangue, coleta de sangue e fluidoterapia. Frascos coletores - Tampa vermelha: Tubo de soro, utilizado para analise bioquímica comum ou sorológica, na parede do tubo tem ativador de coagulo. - Tampa amarela: Contém gel no fundo, sem anticoagulante, coleta de soro, esse gel serve para separar o soro do coagulo, indicado a ser feito apenas em locais que tenham centrifuga. - Tubo roxo com EDTA: Contém anticoagulante (EDTA), utilizados para exames hematológicos. - Tubo verde com heparina: Contém anticoagulante heparina, usado em testes bioquímicos e gasometria (não indicado para hemograma), interfere na conversão da pro trombina (usado em répteis e aves). - Tampa azul com citrato: Contém anticoagulante citrato de sódio, usado em testes bioquímicos e análises de coagulação, não recomendado para hematologia, remove cálcio. - Sempre fazer 5ml, e inversão lenta 10x. Primeiro fazer os tubos que contém AC. Colheita de sangue – FLEBOYOMIA 1. Preparo do material (seringa e agulha/ vacutainer e tubos). 2. Contenção do animal. 3. Assepsia do local de colheita • Agregação plaquetária ou coagulação da amostra 4. Repleção do vaso (garrote) 5. Introdução da agulha (bisel voltado para cima, ângulo de 30°) 6. Afrouxamento do garrote (evita hemoconcentração) 7. Aspiração do sangue (preenchimento da seringa) 8. Afrouxamento total do garrote e retirada da agulha. 9. Assepsia local. 10. Transferir sangue para o tubo escolhido (retirar agulha). 11. Homogeneização do sangue – INVERSÃO LENTA 10x. Locais para punção - Usar sangue venoso (cefálica, jugular e safena) -> Equinos: Jugular e facial. -> Bovinos: Jugular, mamária e coccígea. -> Suínos: Cava, jugular e cefálica. -> Aves: Jugular direita, ulnar medial e tibial caudal. Armazenamento, envio e processamento da amostra Após a colheita, o mesmo deve ser identificado e mantido sob refrigeração até o laboratório ( entre 2 a 4 graus). - Deve conter: dados do proprietário, data de envio e da coleta, material coletado, procedência, idade, exames a serem coletados, nome do animal, sexo, suspeita clínica, espécie, raça e uso de fármacos. Hemograma A amostra do hemograma deve ser refrigerada e analisada em até 1h após a colheita, estando em temperatura ambiente tem um aumento do VCM e VG, NUNCA CONGELAR! Bioquímica e sorologia -A amostra deve ser mantida em repouso de 15 a 30 minutos e em seguida centrifugada. - O soro/plasma deve ser separado dos elementos celulares (Ex: Glicose 10%H) - O soro refrigerado pode ser analisado dentre 24-48h,. Caso ocorra hemólise ou coagulação. Deve repetir a coleta! ->HEMÓLISE: Acontece quando demora para fazer a coleta, descarga violenta, amostra congelada, sangue agitado com muito vigor e fazer a coleta na mesma agulha várias vezes. Hematologia Clínica - 99,9% são glóbulos vermelhos no sangue (Eritrócito, hemácias -> são a mesma célula) - Caso não contenham monócitos no exame, é normal. - As células sanguíneas tem vida curta e seus níveis no sangue são mantidos por 2 organismos: Hematopoese (produção) e Hemocatarese (destruição) HEMATOPOESE -Locais: vida embrionária, fetal e adulta. - Origem embrionária do sangue: Células tronco totipotentes - Estímulos fatores de crescimento (hormônio) e fatores de transcrição gênica. 1. Vida embrionária:: Acontece no saco vitelínico na 1 semana de vida. Totipotente pode dar origem a vários tecidos e a pluripotente produz várias células de apenas 1 tecido. 2. Vida fetal: Migração de CTH das ilhas de sangue para fígado, timo, baço e medula óssea. - Fígado e baço são os principais órgãos hematopoiéticos no feto (tendo linhagem linfoide, mielóide e eritróide). - 1/3 final da gestação: Medula óssea produz células sanguíneas -> fígado deixa as funções hematopoiéticas e braço produz linfócitos. 3. Vida pós natal: A hematopoiése se concentra na medula óssea (ossos longos e chatos). A colheita de medula em grandes animais é feita na costela ou no externo, sendo anestesiado para o procedimento. Já em pequenos animais, no cão é feita na crista ilíaca ou na cabeça do úmero, e no gato é feita na cabeça do fêmur. · Medula vermelha: Ativa e funcional, apenas nos ossos próximos ao tronco e produção de glóbulos vermelhos. · Medula amarela: Inativa e afuncional, ela tem capacidade de reversão, sendo ativada em processos patológicos ( anemias e infecções) · Medula cinzenta (fibrozada): Acontece no baço e no fígado (animal senil). Eritropoiése Origem e fases evolutivas da maturação dos eritrócitos, Eritroóiése -> Medula vermelha.
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