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16/08/2021 Tecnologia Bioquímica https://www.notion.so/Tecnologia-Bioqu-mica-fd32fd12fff34df49386b1dd28d8e923 1/6 Add a comment… Tecnologia Bioquímica Módulo 2 - Procariotos Células: • Fonte de genes para biotecnologia (nativos); → Kollagenase → microrganismo sem clonagem, utilizam um Clostridium spp. produz de maneira anaeróbica uma colagenase que é utilizada numa pomada; • Vetores para clonagem de outros genes; Procariotos Bactérias: • Como o nome prediz bacteriologia é o estudo de bactérias, que são organismos procariotos de células individuais que não possuem núcleo verdadeira; • Algumas bactérias absorvem nutrientes do meio ambiente circundante e algumas produzem seu próprio nutriente por fotossíntese; • Algumas bactérias estão livres no ambiente, enquanto outras permanecem aderidas; 16/08/2021 Tecnologia Bioquímica https://www.notion.so/Tecnologia-Bioqu-mica-fd32fd12fff34df49386b1dd28d8e923 2/6 • Unicelulares • Exceto os actinomicetos → bactérias de importância biotecnológica, grandes produtos de metabólitos, vários antibióticos; mistura de bac + fungo; aspecto de fungo na placa, mas com características de bactérias; • Material não envolto em MC; • Nutrição autótrofa, heterótrofa ou fotossíntese; • Podem apresentar apêndices móveis → flagelos. • Apresentam parede celular composta de um carboidrato complexo: peptidioglicano; • Reprodução por fissão binária; Arqueobactérias: • Células procariontes, morfológica e fisiologicamente variadas; • Ambientes extremos; • Desconhece que produzam doenças em humanos; • Se possuem parede celular, não são compostas por poptidoglicanos; • Dividem-se em três grupos principais: → Metanogênicas: produzem metano, vivendo apenas em ambientes anaeróbios como pântanos e intestino de ruminantes; → Halofílicas extremas: vivem em ambientes muito salinos → Great Salt Lake, Utah; Mar Morto; → Termofílicas extremas: habitam águas quentes e sulforosas (fontes termais). Biotecnologicamente é interessante como a TAQpolimerase → poucas realizam esse tipo de trabalho → resistir a processos industriais; altas temperaturas; continuando ativas; Processos químicos → substituição por processos biológicos → produzem menos resíduos ou resíduos mais brandos de serem tratados; 16/08/2021 Tecnologia Bioquímica https://www.notion.so/Tecnologia-Bioqu-mica-fd32fd12fff34df49386b1dd28d8e923 3/6 Nativos e vetores: Escherichia coli • Gram - Vetor em biologia molecular: • Simplicidade genética: Bactérias tornam ferramentas úteis para pesquisa genética devido ao seu tamanho de genoma relativamente pequeno comparado aos eucariotos. As suas célula possuem cerca de 4.400 genes, enquanto o projeto do genoma humano determinou que os seres humanos possuem aproximadamente 30.000 genes; • Segurança: encontrado em tratos intestinais de humanos e animais. onde ajudam a fornecer nutrientes (vit K e B12) ao seu hospedeiro. Existem linhagens que produzem toxinas ou causam infecções quando ingeridas (O157:H7), mas é geralmente relativamente inócua se manuseada com higiene razoável; • Capacidade de hospedar DNA exógeno: A maioria das técnicas de clonagem de genes foram desenvolvidas usando essa bactéria e ainda são mais bem-sucedidas ou eficazes em E. coli do que em outros microrganismos. Como resultado, a preparação de células competentes (células que absorverão DNA exógenos) não é complicada. As transformações com os outros microrganismos geralmente são menos sucedidas. 16/08/2021 Tecnologia Bioquímica https://www.notion.so/Tecnologia-Bioqu-mica-fd32fd12fff34df49386b1dd28d8e923 4/6 • Taxa de crescimento: costumam crescer muito mais rápido que os organismos mais complexos. E. coli cresce rapidamente a uma taxa de uma geração por vinte minutos em condições de crescimento típicas. Isso permite a preparação de culturas de fase logarítmica. Um crescimento mais rápido também significa melhores taxas de produção quando as culturas são usadas em processos de fermentação em escala; • Genoma bem compreendido: Foi o primeiro genoma a ser completamente sequenciado em 97, logo, foi o mais estudado. O conhecimento avançado de seus mecanismos de expressão de proteínas torna mais simples a utilização para experimentos para expressão de proteínas exógenas; Importante → as proteínas recombinantes obtidas em E. coli não possuem as modificações pós-tradução (PTMs) que estão presentes na maioria das proteínas eucarióticas; A glicosilação é o PTM mais comum, mas muitos outros como a formação de ligações de dissulfeto, fosforilação e processamento proteolítico podem ser essenciais para a atividade biológica. PTMs desempenham um papel crucial na conformação de proteínas, processamento, estabilidade, atividade biológica final, segmentação de tecido e imunogenicidade da proteína; portanto, a versão deficiente de PMT pode ser insolúvel, instável ou inativa. Outros vetores estão sendo estudados, um dos principais é o Bacillus spp. que é GRAM +; 16/08/2021 Tecnologia Bioquímica https://www.notion.so/Tecnologia-Bioqu-mica-fd32fd12fff34df49386b1dd28d8e923 5/6 Cianobactérias • Fazem fotossíntese; • Organismo de interesse biotec; Menos gastos; • Nativas como modelos de hospedagem; • Na última década, avanços significativos foram feitos com o objetivo de tornar as cianobactérias mais eficientes como "biofábricas" de células microbianas, e para algumas se alcançou produtos químicos como o etanol, sacarose, isobutanol, lactato e 2,3-butanodiol. • São menos eficientes do que células como aquelas baseadas em E. coli e Saccharomyces cerevisiae; • Taxa de absorção de glicose de E. coli e Saccharomyces cerevisiae pode atingir 900~2700 mg/h, enquanto a cianobactéria tem taxa de fixação de CO2 dentro da faixa de 3,5~24,1 mg/h; Microalgas (normalmente nativas) • Microalgas são pequenas fábricas e renováveis, sustentáveis; • São fontes econômicas de biocombustíveis, medicamentos bioativos e ingredientes alimentares. Microalgas são úteis em mitigação de CO2 elevado nível e tratamento de resíduos de água. 16/08/2021 Tecnologia Bioquímica https://www.notion.so/Tecnologia-Bioqu-mica-fd32fd12fff34df49386b1dd28d8e923 6/6
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