4 introdução às análises toxicológicas

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------------------------- Análise� t�icológica� -----------------------
Toxicologia é a ciência que estuda qualitativa e
quantitativamente os efeitos nocivos decorrentes da
interação de agentes químicos com o organismo.
Tem por objetivo prevenir, diagnosticar e tratar
intoxicações.
Vertentes
➔ Toxicologia analítica: detecção inequívoca, quali e/ou
quantitativa, do toxicante para prevenir intoxicações.
➔ Toxicologia clínica: tratamento de paciente exposto,
intoxicado ou não, para prevenir ou tratar a
intoxicação.
➔ Toxicologia experimental: elucidação dos mecanismos
de ação em animais de laboratório.
----------------------------Toxicologia analítica----------------------------
Visa auxiliar no diagnóstico, prognóstico, tratamento e
prevenção de uma intoxicação, por meio da detecção,
identificação e quantificação dos xenobióticos e/ou seus
metabólitos (ou de algum parâmetro bioquímico relacionado
com a exposição a toxicantes), em amostras biológicas ou
outras relevantes.
O procedimento analítico se faz utilizando matrizes
biológicas complexas (contém muitos outros componentes
além dos toxicantes), como sangue, urina, fezes, cabelo,
entre outras.
Importante para
➔ Diagnóstico: confirmar ou excluir substâncias suspeitas,
baseadas nas síndromes tóxicas sugeridas a partir da
história e exame clínico.
➔ Tratamento: guiar o manejo das intoxicações apoiando
nas decisões médicas.
➔ Prognóstico: avaliar a gravidade da intoxicação, obter
resposta sobre a precisão clínica, confirmar diagnóstico,
apoiar estudos de caso e auxiliar na determinação de
padrões de exposição.
◆ acompanhamento a longo prazo também.
O que se pesquisa
➔ O toxicante na sua forma inalterada;
➔ Um produto de biotransformação (metabólito);
➔ Alterações bioquímicas ou hematológicas provenientes
da interação entre o toxicante e o organismo vivo;
-----------------------------Amostras utilizadas-----------------------------
A escolha da amostra depende da finalidade de análise,
da natureza química, forma e concentração do analito.
Exemplos de amostras
➔ Urina;
➔ Sangue;
➔ Saliva;
➔ Leite;
➔ Conteúdo gástrico;
➔ Fezes;
➔ Cabelo;
➔ Produtos farmacêuticos e industrializados;
➔ Água, solo e ar;
➔ Alimentos;
Janela de detecção
É um ponto importante na determinação da amostra a
ser utilizada. Consiste no período no qual é possível
detectar o consumo de drogas ou exposição a toxicantes.
----------Áreas de aplicação das análises toxicológicas-----------
Análises forenses
Análises toxicológicas realizadas com propósitos legais,
com o principal objetivo de detectar e/ou quantificar
qualquer agente químico que possa ter nexo causal com a
morte ou com danos infligidos ao homem, patrimônio ou ao
meio ambiente.
Pode analisar:
➔ Presença de substâncias químicas nos tecidos e fluidos
coletados;
◆ material post-mortem (análises de cadáveres):
suspeita de morte súbita ou violenta, intoxicação
letal.
◆ amostras biológicas de indivíduos vivos: vítimas
de agressão, prejuízo psicomotor (substâncias
psicoativas), doping.
➔ Presença de substâncias químicas em materiais não
biológicos suspeitos;
◆ substâncias submetidas à fiscalização
internacional.
Análises de urgência
É a análise toxicológica que deve ser feita da forma mais
rápida possível para auxiliar no diagnóstico e prognóstico
das intoxicações agudas, bem como no monitoramento da
eficiência da detoxificação.
Necessidade de análise toxicológica de um paciente:
➔ Identificação do toxicante para a escolha do antídoto
correto;
➔ Nível plasmático do toxicante se correlaciona com a
severidade;
➔ Nível plasmático do toxicante influência na decisão
terapêutica;
Podem ocorrer casos em que o tratamento precede o
resultado dessa análise, em situações de extrema urgência.
Monitoramento da exposição ocupacional
Exposição ocupacional é a existência da probabilidade
de um trabalhador sofrer algum dano, resultante de suas
atividades profissionais.
➔ Análise no ambiente do trabalho = monitoramento
ambiental.
◆ limites de exposição: caracterização da
insalubridade do ambiente.
➔ Análise nas amostras biológicas do indivíduo =
monitoramento biológico.
◆ análise da substância química: inalterada ou
biotransformada ou de parâmetro biológico
alterado no paciente.
Monitoramento terapêutico de fármacos
Individualização da posologia para um determinado
paciente, no sentido de otimizar a eficácia terapêutica com
um mínimo de efeitos tóxicos.
◆ comum em hospitais que lidam com câncer, pois
neoplásicos não são específicos para esse tipo
celular, agindo também sobre células normais.
Pode ser feito pela quantificação do fármaco ou pela
análise do efeito do fármaco.
Indicação do monitoramento de fármacos:
➔ Janela terapêutica estreita;
◆ qualquer flutuação mínima do fármaco pode levar
a toxicidade.
◆ janela terapêutica é o intervalo entre a
concentração mínima necessária para obter uma
resposta terapêutica e a concentração mínima
necessária para ter efeito tóxico (o ideal é que a
contração plasmática fique dentro da janela
terapêutica, uma vez que se for menor, não há
efeito terapêutico e se for maior, há efeito tóxico).
➔ Elevada variabilidade intra e interindividual em sua
farmacocinética;
➔ Correlação entre concentração plasmática e o efeito
farmacológico no local de ação;
Monitoramento da abstinência ao uso de substâncias
psicoativas
Quantificação de substâncias psicoativas em amostras
biológicas para confirmar se o paciente está mantendo a
abstinência durante seu tratamento.
Amostras mais utilizadas:
➔ Fluido oral: consumo nas últimas 6 a 24 horas;
➔ Urina: consumo nos últimos 2 a 4 dias;
➔ Cabelo: consumo pregresso (3 meses antes da coleta);
Análise de alimentos
Avalia se os alimentos podem ser ingeridos de maneira
segura, sem apresentar risco à saúde da população.
➔ Analisa se o alimento está dentro da legislação dos
limites aceitáveis de resíduos tóxicos nos alimentos
consumidos.
➔ Praguicidas, metais pesados, micotoxinas, nitratos e
nitritos, resíduos de medicamentos veterinários
(antimicrobianos e antiparasitários), glicosídeos
cianogênicos.
Análise de amostras ambientais
Identificar e quantificar agentes químicos presentes no
macroambiente -ar, água e solo- nocivos à saúde.
➔ Monitorar os teores dos possíveis toxicantes no
ambiente, visando à prevenção de seus efeitos nocivos.
➔ Identificação de fontes de poluição: domésticas,
urbanas, agrícolas e industriais.
➔ Produtos incluídos: metais pesados, praguicidas,
compostos orgânicos voláteis, material particulado,
agentes biológicos.
-----------------------------O método analítico------------------------------
Conjunto de procedimentos ou técnicas desde o
pré-tratamento da amostra até seu resultado final.
Tipos de método analitico
➔ Análise qualitativa: presença ou ausência do agente
tóxico na amostra ⇾ identificação do composto.
◆ são mais simples, rápidas e baratas.
➔ Análise quantitativa: determinação da concentração
dos analitos nas amostras ⇾ magnitude da exposição
a um composto.
◆ são mais complexas, custosas, demoradas, nem
sempre é necessário.
Validação dos métodos analíticos
Ato documentado que atesta que qualquer
procedimento, processo, equipamento, material, atividade
ou sistema realmente e consistentemente leva aos
resultados esperados ⇾ garantir que o método atenda às
exigências das aplicações analíticas, assegurando a
confiabilidade dos resultados.
➔ Fornecido pelo Inmetro, ANVISA e outras agências
reguladoras.
Conceitos
➔ Precisão: quão próximos estão os resultados uns dos
outros (repetibilidade);
➔ Exatidão: quão próximo do valor real estão as medidas
realizadas;
➔ Sensibilidade: capacidade de um método acusar
pequenas quantidades do analito e pequenas variações
de concentração;
◆ Limite de detecção: menor quantidade possível
de detectar pelo método empregado;
◆ Limite inferior de quantificação (LIQ): menor
quantidade possível de analisar, com segurança,
pelo método empregado;
◆ Limite superior de quantificação (LSQ): maior
quantidade possível de analisar, com segurança,
pelo método empregado;➔ Especificidade: capacidade de um método mensurar
exatamente um composto específico (seletividade), sem
sofrer interferência de outros componentes;
➔ Linearidade: capacidade de um sistema analítico em
fornecer resultados diretamente proporcionais à
concentração da substância em análise, dentro de uma
faixa de aplicação (faixa de linearidade);
◆ faixa de linearidade é expressa pela reta e indica
que quanto maior a concentração do analito,
melhor o resultado.
◆ ao passar de uma faixa linear, é necessário diluir a
amostra, pois não há garantia de obter um
resultado proporcional.
◆ curva de calibração é estabelecida - várias
soluções com concentrações conhecidas.
➔ Robustez: capacidade de um método resistir a
pequenas variações dos parâmetros analíticos,
indicando sua confiabilidade durante o uso normal
(estabilidade);
◆ exemplo de variações dos parâmetros
estabelecidos em diferentes métodos:
➔ Testes de triagem: testes rápidos que fornecem
informações qualitativas ou semi-quantitativas para
uma classe de agentes tóxicos;
◆ ex.: cromatografia em camada delgada e
imunocromatografia.
➔ Testes confirmatórios: identificação de um composto
específico;
◆ ensaios mais demorados e de maior custo.
◆ análise qualitativa ou quantitativa.
◆ ex.: cromatografia gasosa acoplada à
espectrometria de massas CG-MS (é o mais
utilizado).