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See discussions, stats, and author profiles for this publication at: https://www.researchgate.net/publication/270342264 Plâncton Chapter · January 2006 CITATIONS 0 READS 1,212 4 authors: Some of the authors of this publication are also working on these related projects: PELD Habitats Costeiros do Espírito Santo (HCES) - PELD 2016 View project Composition patterns and occurrence of fishes in shallow areas of the mouth of the river São Francisco SE-AL View project Jean-Christophe Joyeux Universidade Federal do Espírito Santo 121 PUBLICATIONS 2,168 CITATIONS SEE PROFILE José H. Muelbert Universidade Federal do Rio Grande (FURG) 79 PUBLICATIONS 872 CITATIONS SEE PROFILE Tommaso Giarrizzo Federal University of Pará 122 PUBLICATIONS 1,589 CITATIONS SEE PROFILE Henry Louis Spach Universidade Federal do Paraná 178 PUBLICATIONS 1,611 CITATIONS SEE PROFILE All content following this page was uploaded by José H. Muelbert on 28 May 2015. 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Niencheski Gilberto Fillmann Cinthya Simone Gomes Santos Rio de Janeiro Museu Nacional 2006 ISBN 85-***-****-* Universidade Federal do Rio de Janeiro Reitor – Aloísio Teixeira Museu Nacional Diretor – Sérgio Alex K. Azevedo Editores – Miguel Angel Monné Barrios, Ulisses Caramaschi Editores de Área – Adriano Brilhante Kury, Alexander Wilhelm Armin Kellner, Andrea Ferreira da Costa, Cátia Antunes de Mello Patiu, Ciro Alexandre Ávila, Débora de Oliveira Pires, Guilherme Ramos da Silva Muricy, Izabel Cristina Alves Dias, João Alves de Oliveira, João Wagner de Alencar Castro, Marcela Laura Monné Freire, Marcelo de Araújo Carvalho, Marcos Raposo, Maria Dulce Barcellos Gaspar de Oliveira, Marília Lopes da Costa Facó Soares, Rita Scheel Ybert , Vânia Gonçalves Lourenço Esteves Conselho Editorial – André Pierre Prous-Poirier (Universidade Federal de Minas Gerais), David G. Reid (The Natural History Museum - Reino Unido), David John Nicholas Hind (Royal Botanic Gardens - Reino Unido), Fábio Lang da Silveira (Universidade de São Paulo), François M. Catzeflis (Institut des Sciences de l’Évolution - França), Gustavo Gabriel Politis (Universidad Nacional del Centro - Argentina), John G. Maisey (Americam Museun of Natural History - EUA), Jorge Carlos Della Favera (Universidade do Estado do Rio de Janeiro), J. Van Remsen (Louisiana State University - EUA), Maria Antonieta da Conceição Rodrigues (Universidade do Estadodo Rio de Janeiro), Maria Carlota Amaral Paixão Rosa (Universidade Federal do Rio de Janeiro), Maria Helena Paiva Henriques (Universidade de Coimbra - Portugal), Maria Marta Cigliano (Universidad Nacional La Plata - Argentina), Miguel Trefaut Rodrigues (Universidade de São Paulo), Miriam Lemle (Universidade Federal do Rio de Janeiro), Paulo A. D. DeBlasis (Universidade de São Paulo), Philippe Taquet (Museum National d’Histoire Naturelle - França), Rosana Moreira da Rocha (Universidade Federal do Paraná), Suzanne K. Fish (University of Arizona - EUA), W. Ronald Heyer (Smithsonian Institution - EUA) Normalização – Vera de Figueiredo Barbosa Capa: Luciano Gomes Fischer Diagramação e arte-final: Lia Ribeiro MUSEU NACIONAL – Universidade Federal do Rio de Janeiro Quinta da Boa Vista, São Cristóvão, 20940-040 Rio de Janeiro, RJ, Brasil Impresso no Brasil – Printed in Brazil 2006 Patrocínio: Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) Ministério da Ciência e Tecnologia (MCT) Fundação Universidade Federal do Rio Grande (FURG) Universidade do Sul de Santa Catarina (UNISUL) Universidade Federal do Paraná (UFPR) Universidade Federal do Espírito Santo (UFES) Universidade Federal Rural de Pernambuco (UFRPE) Universidade Federal de Pernambuco (UFPE) Universidade Federal do Pará (UFPA) Museu Paraense Emílio Goeldi (MPEG) Ficha catalográfica A945 Avaliação ambiental de estuários brasileiros : diretrizes metodológicas / organizadores Paulo da Cunha Lana ... [et al.]. – Rio de Janeiro : Museu Nacional, 2006. 156p. , 28 cm – (Série Livros , 22) Acima do Título: Projeto RECOS – Uso e Apropriação de Recursos Costeiros, Grupo Temático Biodiversidade e Qualidade Ambiental. ISBN 85-***-****-* 1. Ecologia dos estuários – Brasil. 2. Áreas estuarinas – Conservação – Brasil. 3. Estuários – Brasil. I. Lana, Paulo da Cunha. II. Projeto RECOS – Uso e Apropriação de Recursos Costeiros. Grupo Temático Biodiversidade e Qualidade Ambiental. III. Museu Nacional (Brasil). IV. Série. CDD 574.5263 132 6.1.1 Amostragem qualitativa As amostragens qualitativas serão feitas com rede de plâncton em arrasto com embarcação parada (por lançamento da rede) ou em baixa velocidade. Como estas amostras não serão utilizadas para quantificação do fitoplâncton não existe necessidade de controle da quantidade de água filtrada pela rede. A idéia é de recolher a maior quantidade possível de fito com a menor interferência de outros materiais em suspensão (que dificultam o exame da amostra). Portanto o esforço de arrasto pode variar segundo as características da água da região a ser amostrada. Será utilizada uma rede com malha de 60 mm, com boca de 30 cm e 1,0 m de comprimento, pois a área de filtragem é maior e menos sujeita a entupimentos. 6.1.2 Amostragem quantitativa As amostragens quantitativas do fitoplâncton (contagem) são feitas na superfície, utilizando uma garrafa de Van Dorn ou similar. Em caso de amostragem simultânea para a Hidroquímica é aconselhável que as amostras de fito sejam retiradas da mesma garrafada da água para hidroquímica, o que possibilitaria uma mais exata comparação dos resultados. 6.1.3 Fixação das amostras Após a coleta, as amostras, tanto de rede como de garrafa, devem ser acondicionadas em frascos de politileno de 500 ml com tampa de rosca com vedador (batoque) interno e boca larga e fixadas com solução de formol a 2 % neutralizado, sendo recomendado frascos de vidro e fixação com lugol forte no caso de amostras com salinidade inferior a 5 %o. Do mesmo modo devem ser coletadas amostras para análise da clorofila a e feopigmentos. Para determinação de clorofila e feopigmentos, as amostras (volume entre 50 e 500 ml, dependendo da quantidade de material na água) devem ser preferencialmente filtradas ainda em campo, utilizando-se filtro de fibra de vidro (Whattman GF/F ou outro de porosidade similar) de 25 ou 47 mm de diâmetro (sempre em duplicata). Quando não puderem ser filtradas no campo as amostras devem ser coletadas e acondicionadas em frascos de 500 ml em isopor contendo gelo seco, para filtragem em laboratório. Estes devem ser dobrados e acondicionados em envelopes de papel alumínio (etiquetados) e colocados imediatamente em freezer, onde permanecerão até o momento da análise. Os filtros devem ser analisados o quanto antes, podendo ficar estocados no freezer por um período máximo de três meses, desde que dentro de um frasco com sílica gel. A medição da clorofila e feopigmento pode ser realizada pelo método da espectrofotometria ou fluorimetria. É recomendável que parte das amostras de rede seja mantida sem fixador e guardada em refrigerador para possível identificação de organismos vivos que possam perder a forma devido ao processo de fixação. 6.1.4 Análise qualitativa Deve ser feita sob microscópio ótico comum, se possível como uso de câmara clara e equipamento fotográfico (ou de digitalização de imagens). A identificação do fitoplâncton deverá ser feita até o menor nível possível. 6.1.5 Análise quantitativa A contagem do fitoplâncton deve ser feita utilizando-se câmara de sedimentação de Uthermöhl (UTHERMÖHL, 1958) em microscópio invertido, após um tempo mínimo de 6 horas de sedimentação. O volume da câmara varia segundo a concentração do fito e do material em suspensão de cada área. Em estuários geralmente são utilizados os volumes entre 5 e 25 ml. O procedimento de contagem aconselhado é o da escolha de campos aleatórios descrito por UEHLINGER (1964). O critério utilizado para determinação do número de campos a serem contados é o que procura alcançar 100 indivíduos da espécie mais abundante, mas mantendo um minimo de 25 campos de contagem . De acordo com LUND et alii (1958), isto permite trabalhar com intervalos de confiança de +/- 20 % da média, a um nível de significaria de 95 %, o que é considerado como suficiente para estudos desta natureza. 6. PLANCTON 6.1 FITOPLÂNCTON Frederico Pereira Brandini1 1 Centro de Estudos do Mar, Universidade Federal do Paraná, C.P. 50002, 83 255-000, Pontal do Paraná, PR. 133 Os resultados serão expressos em indivíduos ou células por ml, calculado pela formula: N = n . A / a . 1 / V Onde: N = Número de indivíduos ou células por ml n = número de indivíduos ou células contadas a = Área contada A = Área total da câmara V = Volume total sedimentado 6.1.6. Biomassa O único método confiável para quantificação da biomassa em áreas com grande quantidade de material em suspensão como os estuários é o feito através da estimativa dos volumes celulares das algas através do método de transformação das células em figuras geométricas tridimensionas (método do biovolume - EDLER,1979) e multiplicação pelos resultados da contagem. Trata-se de um método a principio muito trabalhoso, mas é o único viável em ambientes onde o material em suspensão inviabiliza medição de peso fresco ou peso seco das algas. 6.1.7 Diversidade A determinação das variações da diversidade específica do fitoplâncton é de suma importância. Esta diversidade deverá se obtida à partir dos valores de densidade do fitoplâncton, calculando-se o Índice Diversidade Específica (Índice de Shannon-Weaver), através da seguinte formula: Índice de Shannon-Weaver: H = Σ pi log2 pi sendo: pi = n / N Onde: H = Diversidade específica da amostra (bits / indivíduo ou célula) n = Número de indivíduos ou células da espécie i N = Número total de indivíduos ou células da amostra A utilização do log base 2 é recomendada, pois a maioria dos trabalhos de diversidade em fito utilizam este método. 6.1.8 Clorofila a e feopigmentos Para a análise de clorofila-a e feopigmentos, os filtros devem ser colocados em frascos de aproximadamente 20 ml (um filtro em cada frasco), adicionar 10 ml de acetona a 90% (pode ser usado também etanol, nesse caso é necessário padronizar) e deixar 24 horas em refrigerador, para extração dos pigmentos (este manuseio deve ser feito sob pouca luz). Após este período, procede-seà leitura no espectrofotômetro. Os comprimentos de onda e as formulas para os cálculos variam às vezes bastante segundo as varias metodologia, portanto é necessário padronizar. A fórmula proposta neste manual é a seguinte: Chl a (μg / l) = A x K (665 – 665a) x v Concentração da clorofila a Vf x p Pheo (μg / l) = A x K x (R[665a] – 665) x v Concentração da feopigmento Vf x p Onde: A = Coeficiente de absorção da clorofila a = 11,0 K = Constante de redução da absorbancia para a concentração inicial de clorofila a = 2,43 665 = Absorbância da antes da acidificação 665a = Absorbância após a acidificação Observações: dos valores de absorbância 665 e 665a deve ser descontado as absorbâncias 750 e 750a, quando estes últimos valores forem positivos. v = Volume de acetona usado para a extração (ml) Vf = Litros de água filtrados p = Passo ótico da cubeta (cm) R = Máxima razão 665: 665a na ausência de feopigmento = 1,7 6.2 ZOOPLÂNCTON Luiz Fernando Loureiro Fernandes1 6.2.1 Introdução Os organismos cuja capacidade de locomoção é insuficiente para sobrepujar a força das correntes são conhecidos como zooplâncton. Estes pequenos animais podem passar toda sua vida na coluna d’água como plâncton (holoplâncton) ou apenas parte do seu ciclo de vida neste ambiente (meroplâncton). Estes organismos são extremamente importantes na cadeia trófica pelágica pois transferem a energia orgânica produzida pelas algas unicelulares através da fotossíntese para níveis tróficos mais elevados como os peixes pelágicos (Lenz, 2000). Além de sua importância na cadeia trófica, são também responsáveis por parte da retirada de CO2 excedente da atmosfera através da produção de pelotas fecais que acabam sendo transportadas verticalmente e enterradas no sedimento. O zooplâncton marinho compreende uma grande variedade de organismos que diferem consideravelmente 1 Universidade Federal do Espírito Santo, Departamento de Ecologia e Recursos Naturais. Av. Fernando Ferrari 514, Goiabeiras, 29075910 - Vitoria, ES - Brasil. 134 em tamanho. Isto significa que para cada grupo de organismos a ser estudado existe a necessidade de se adequar a metodologia de coleta (equipamento e estratégia amostral). Dentre os equipamentos de coleta mais comuns utilizados estão as redes (e.g. cônica, cilindro- cônica, Bongo, MOCNESS), garrafas (e.g. Van Dorn, Niskin, Nansen) e armadilhas (e.g. Schindler), entre outros. Para cada equipamento ainda podem ser utilizadas diferentes estratégias amostrais dependendo da fração de tamanho a ser estudada, da escala de resolução (vertical ou horizontal) e do ambiente a ser amostrado. Em ambientes estuarinos, dois grandes grupos são os principais objetos de estudo: o microzooplâncton (que vai de 20 a 200 micrômetros) e o mesozooplâncton (que vai de 200 micrômetros a 20 milímetros). Estes grandes grupos estão representados por diversos organismos de importância ecológica e interesse comercial. O mesozooplâncton tem sido foco de muita atenção recentemente, principalmente por ter representantes que respondem a diversas condições de estresse ambiental (e.g. poluição). Para a captura, foram estabelecidos procedimentos e técnicas que serão abordados a seguir. 6.2.2 Coleta 6.2.2.1 Material de coleta O material a ser utilizado depende de algumas considerações iniciais: qual a profundidade e extensão do local a ser amostrado e qual o organismo alvo. É muito importante saber qual ferramenta se utiliza para que haja viabilidade técnica na coleta. A rede escolhido neste protocolo é cilindro-cônica, com 50 centímetros de abertura de boca, com malha de 200 micrômetros e comprimento de 1,8 metro, conforme modelo abaixo (Figura 24). Esta rede possui, centrado em sua boca, um fluxômetro mecânico para estimar o volume de água filtrado pela rede. A rede selecionada é bastante apropriada para se coletar o mesozooplâncton, além de propiciar melhores resultados de captura devido à redução da possibilidade de colmatação, comum em ambientes com muita matéria orgânica em suspensão e da evasão ou fuga, por apresentar uma boca relativamente grande. O fluxômetro mecânico é um instrumento bastante eficaz para estimar o volume de água filtrada pela rede e seu posicionamento central reduz erro de cálculo de fluxo. Dependendo da profundidade local, o tamanho de boca de rede pode ser modificado. Alguns dos padrões de redes atualmente utilizadas no Brasil são de 30 ou 60 centímetros de boca (para estuários rasos e mais profundos, respectivamente) e com malhas de 140, 200 e 333 micrômetros. Estas variações são significativas pois tendem a coletar diferentes organismos. Em contrapartida, em algumas situações, estas podem ter uma eficiência de filtragem comprometida pelo próprio estado de eutrofização do ambiente e pela quantidade de material em suspensão que podem provocar o entupimento da malha da rede. Este ajuste deve ser feito no planejamento amostral. A rede cilindro-cônica é composta de: um aro de aço inoxidável (neste caso com 0,50m de diâmetro), elaborado a partir de uma barra cilíndrica (preferencialmente de 12mm de diâmetro). Em alguns casos este aro é feito com ferro galvanizado, o que com o tempo começa a enferrujar e manchar a rede, tornando seu manuseio um pouco perigoso; o aro deve ser munido de três alças eqüidistantes (neste caso de aço inoxidável), semi-circulares com diâmetro de 40mm, soldadas, oriundas de uma barra de 7mm de diâmetro, e orientadas para frente (i.e., perpendicular ao plano descrito pelo aro); nas alças são fixados, por meio de 3 manilhas (preferencialmente de aço inoxidável) (3/4 in. = 0,75 polegadas), 3 cabos de aço inoxidáveis de 2mm de diâmetro com 1m de comprimento, sendo as pontas dobradas em anel e mantidas fechadas por 2 anilhas (de alumínio ou cobre) de cada lado. Este cabo pode ser substituído por Nylon/Seda; a junção dos 3 cabos e da corda de tração é realizada com uma manilha (preferencialmente de aço inoxidável) de 11/4 in. (1,25 polegada); Figura 24. Rede cilindro-cônica: figura esquemática do aro da rede e seu cabeamento. 135 A rede possui as seguintes características (Figura 25): cilindro-cônica de 1,8 m de comprimento (0,90 m cilíndrica e 0,90 m cônica), com extremidade anterior de 50 cm de diâmetro, e extremidade posterior de aproximadamente 12 cm de diâmetro interno (dependente do diâmetro externo do copo coletor disponível no lugar de fabricação; malha de 200 micrômetros de abertura, quadrada, de nylon branco, em 6 painéis (3 na frente e 3 atrás); os painéis de malha são costurados em zigue-zague de maneira a minimizar a entrada de organismos entre os painéis. Interna e externamente, as costuras são reforçadas por uma banda de tela de nylon dobrada, 3 cm de largura; as duas extremidades e a parte mediana da rede são compostas de pano de tela de nylon (tipo vela de veleiro) ou lona, de 20 cm de largura na frente, 15 cm no meio e 15 cm na extremidade posterior; na dobra da extremidade anterior são inseridos anéis de latão, espaçados de 6 cm, dispostos a 1cm da borda anterior da rede, na parte dobrada, e de diâmetro interno 7 mm; o copo coletor (Figura 26) é composto de 2 peças de PVC, a anterior de 10 cm de comprimento e aproximadamente 12 cm de diâmetro externo e a posterior de 20 cm de comprimento total e munida de 2 janelas laterais de malha 200 micrômetros (aproximadamente 10 x 4 cm). A parte posterior se encaixa na anterior e é segurada por 2 parafusos e duas borboletas de aço inox ou latão. As janelas terminam a 3,5 cm do fundo e a malha é colada no interior. 6.2.2.2 Calibração do fluxômetro Figura 25. Rede cilíndrico-cônica: esquema do corpo da rede. Antes de cada período amostral deve-se proceder à calibração do fluxômetro. Esta calibração deve ser f e i t a de p re fe rênc ia em uma p i s c ina com comprimento conhecido, utilizando-se sistema de bóias ou um aro de rede (sem a rede) com sistema de cordas . Devem ser fe i tos em torno de 24 percursos em velocidades diferentes (lenta, média e rápida)na piscina para se obter uma boa média para calibração e, anotados o valor inicial (FI) e final (FF) do fluxômetro e o tempo gasto em cada percurso para compensação Tabela 25. Figura 26. Rede cilíndrico-cônica: esquema do copo coletor. 136 Depois de feita a leitura inicial e final de cada um destes 24 percursos, subtrai-se a leitura inicial da final (FF-FI) e divide o comprimento da piscina pelo valor obtido para cada percurso. Faz-se então a somatória destes valores obtidos e divide-se pelo número de percursos (24 sugerido). A constante de calibração do fluxômetro é o resultado desta divisão. No caso da tabela acima, a constante de calibração seria de 0,285708697112893. 6.2.2.3 Metodologia de arrasto Os arrastos podem ser feitos de diversas formas dependendo da profundidade local. Em vários estuários, os arrastos são feitos na sub-superfície de forma horizontal devido à baixa profundidade do sistema. Em situações onde o estuário possui uma área bastante profunda, podem-se fazer arrastos verticais ou oblíquos, dependendo do objetivo do projeto. Optando por arrastos horizontais, a rede não deve ficar exposta na superfície para evitar a entrada de material flutuante como folhas, plásticos, galhos, etc., o que pode prejudicar a captura dos organismos. Deve proceder-se a leitura do fluxômetro sempre antes de colocar a rede na água (fluxo inicial = FI) e imediatamente após a retirada desta (fluxo final = FF). O tempo de arrasto em torno de 3 minutos, a uma velocidade máxima de 1,5 nós, é suficiente para capturar uma grande quantidade de organismos e ao mesmo tempo evitar uma possível colmatação da rede. Percebendo-se que o tempo não está adequado devido ao excesso (provocando colmatação) ou pouca captura de organismos, estes podem ser modificados. A velocidade sugerida evita um atrito excessivo da rede com a água o que poderia causar evasão pelos organismos. Tabela 25. Cálculo da constante de calibração. LEITURA INICIAL (FI) LEITURA FINAL (FF) TEMPO (rotações) (rotações) (segundos) 81841,1 81898,9 26’26 81898,9 81962,3 28’12 81962,3 82021,5 31’49 82021,5 82082,7 29’74 82082,7 82144,1 31’74 82144,1 82206,3 31’39 82206,3 82266,4 31’08 LE N TO 82266,4 82330,0 29’64 82330,0 82394,3 15’15 82394,3 82458,3 14’57 82458,3 82522,3 15’06 82522,3 82586,5 14’38 82586,5 82651,0 17’64 82651,0 82716,0 15’14 82716,0 82779,9 15’57 M É D IO 82779,9 82845,1 15’35 82845,1 82907,0 10’24 82907,0 82971,0 09’99 82971,0 83034,5 10’17 83034,5 83099,3 11’01 83099,3 83162,5 10’40 83162,5 83226,3 10’85 83226,3 83290,0 10’47 R Á P ID O 83290,0 83354,5 10’64 137 Um peso de 3 a 5 (cinco) kg deve ser acoplado no anel inferior do aro da rede por um cabo de aço de 30 centímetros, sendo os dois outros anéis utilizados para o arrasto da rede. Isto evita que a boca da rede incline ou se dobre reduzindo a quantidade de água efetivamente filtrada e prejudicando a entrada de organismos. Para evitar o afundamento da rede em arrastos de sub- superfície, pode-se utilizar um sistema de bóia (do tipo esférica simples de isopor) com 25 cm de diâmetro a ser acoplada na parte superior do aro da rede através de uma corda de 15 cm de comprimento. Este sistema irá permitir uma redução no risco de se coletar o sedimento de fundo ou até a perda da rede. O trajeto de coleta em arrastos sub-superficiais deve obedecer, sempre que possível, um padrão circular ou semicircular para evitar que a rede se posicione próximo à região de turbilhonamento da hélice do motor do barco. Isto deverá melhorar a performance de captura. 6.2.3 Preservação das amostras Após os arrastos, o material coletado nos copos deve ser transferido para frascos devidamente etiquetados (ver procedimento de identificação abaixo), contendo formalina 5%, neutralizada com tetraborato de sódio. Os copos coletores das redes devem ser parcialmente imersos em balde contendo água do local de coleta, até aproximadamente a parte superior que ainda contém a malha, agitados e novamente colocados nos frascos até que este esteja completo com líquido. Este procedimento evita a perda de material coletado e também a contaminação do mesmo com a água do balde. Pode-se ainda utilizar uma pisseta para auxiliar na retirada do material que possa vir ainda a ficar retido no copo coletor. Em laboratório, o material coletado deve ser transferido para frascos de vidro (o tamanho pode ser variável mas a quantidade de material não pode exceder 1/3 do volume do frasco) contendo formalina 5%, neutralizada com tetraborato de sódio, devidamente etiquetados (ver procedimento de identificação abaixo). 6.2.4 Análises As amostras de zooplâncton podem ser divididas em diversas partes iguais em um subamostrador de Folsom ou outro tipo de quarteador existente. Este procedimento facilita a análise do material pois diminui a quantidade de organismos a serem identificados mantendo a proporção natural obtida pela rede. Sugere-se sempre que sejam feitos testes das alíquotas com a contagem total de organismos nas amostras para verificar se estas são realmente representativas da comunidade a ser analisada. Na utilização do subamostrador de Folsom, o procedimento padrão para a divisão é verificar sempre de que o equipamento esteja nivelado, que o material seja colocado na parte sem divisão e posteriormente façam-se movimentos na roda para agitação e mistura da amostra (em torno de 40 vezes) antes de despejá-lo nos recipientes próprios do Folsom. As contagens devem levar em consideração o valor encontrado na alíquota multiplicado pelo fator de subamostragem (1/2, 1/4, 1/8, 1/16, 1/32, ...) para obtenção do valor total de organismos encontrados. Este valor então é o número total de indivíduos coletados. Os valores encontrados são normalmente expressos em indivíduos por metro cúbico (ind.m-3) com base no volume de água filtrada pela rede, segundo as fórmulas: V=A*R*C Onde: V= volume de água filtrada em m3; A= área da boca da rede em m2 (0,19635 no caso da boca ser 50cm) R= número de rotações do fluxômetro durante o arrasto (FF – FI); C= fator de aferição após calibração do aparelho em metros por rotações. N = ni / V Onde: N = abundância total da espécie em cada amostra ni = número de indivíduos da espécie i observados na amostra V = volume de água filtrado pela rede (m3) A identificação de organismos deve servir aos objetivos dos projetos. Sugere-se como literatura básica para o Atlântico Sul os livros de Boltovskoy (1981, 1999). O planilhamento dos dados podem ser feitos em tabela padrão definida pelo grupo para alimentação do banco de dados. 6.3 ICTIOPLANCTON Jean-Cristophe Joyeux1, Jose Henrique Muelbert2, Tommaso Giarrizzo3 & Henry Louis Spach4 6.3.1 Introdução O dinamismo do ictioplâncton, quando comparado ao 1 Universidade Federal do Espírito Santo, Departamento de Ecologia e Recursos Naturais. Av. Fernando Ferrari 514, Goiabeiras, 29075910 - Vitoria, ES – Brasil. 2 Fundação Universidade do Rio Grande (Furg), Depto. de Oceanografia, CP. 474, 96201-900 Rio Grande – Rio Grande do Sul.. 3 Universidade Federal do Pará, Centro de Ciências Biológicas, Laboratório de Biologia Pesqueira e Manejo dos Recursos Aquáticos. Av. Perimetral, 2651, 66077-530, Terra Firme, Belém-Pará, Brazil. E-mail: tgiarrizzo@yahoo.it / tommaso@ufpa.br. 4 Centro de Estudos do Mar, Universidade Federal do Paraná, CP 50002, 83255-000 Pontal do Paraná, Paraná. 138 dos outros componentes do plâncton, é alto. Portanto, a metodologia de amostragem deverá ser cuidadosamente discutida e ponderada, não somente entre os especialistas deste grupo mas também com os responsáveis para a hidroquímica ou para qualquer amostragem a ser realizada de maneira conjunta à amostragem de ictioplâncton. Entre outros, deverão ser avaliados os benefícios e prejuízos decorrentes da adequação/ inadequação dos protocolos na integração geral dos resultados. Esta avaliação deverá enfocar tanto a pertinência de protocolos iguais/diferentes em uma mesma área (por exemplo, o ictioplânctonem vários estados) quanto que de protocolos simultáneos/ asíncrones entre áreas (ictioplâncton, hidroquímica, etc.). De maneira geral, a eficiência de captura das redes de ictioplâncton depende das condições luminosas (luz, turbidez), da reação do organismo (escape/fuga e evitação/esquiva, ambos relacionados ao tamanho de boca e à velocidade de arrasto), das características hidrodinâmicas da rede (surpressão ou depressão frontal, refluxo, colmatagem, etc.) e do tamanho da malha. Alguns dos fatores a serem considerados são: amostragens noturnas são freqüentemente mais eficientes que amostragens diurnas. Abundâncias calculadas podem ser várias vezes mais altas de noite que de dia, ainda que tais características possam variar entre taxons. É provável que as diferenças observadas no decorrer do ciclo diário sejam dependentes, entre outros fatores, do ambiente desde que são afectadas pelas características da massa d´água (altura da coluna, estratificação, turbidez, etc.), e pelo comportamento do ictioplâncton (posição preferencial na coluna, migrações verticais nictemerais, etc.), entre outros. amostragens superfíciais ou sub-superficiais são freqüentemente menos eficientes que amostragens mais profundas, ainda que tais características possam variar entre taxons. A importância deste fator provavelmente aumenta com a estratificação da coluna d´água desde que muitos taxons realizem migrações verticais em resposta à direção das correntes de maré (para cima na enchente e para baixo na vazante) para manter a sua posição horizontal. amostragens realizadas durante a maré vazante são freqüentemente menos eficientes que durante a maré enchente, ainda que tais características possam variar entre taxons (ver acima). É provável que esta característica seja especialmente importante em estuários em que a hidrodinâmica local é fortemente influenciada pelas correntes de maré. de maneira geral, sempre se lembrar que amostragens realizadas de maneira sistemática (e não ao acaso/ aleatoriamente) podem sofrem impor tantes interferências causadas, de maneira direta ou indireta, por fenômenos naturais. Esta inter ferência, especialmente a causada por fenômenos cíclicos com periodicidade igual ou multipla inteira à da amostragem, pode prejudicar ou mesmo impedir a análise dos resultados. 6.3.2 Arte da pesca A rede (Figura 27) utilizada é composta de: um aro de aço inoxidável, 0,50 m de diâmetro, elaborado a partir de uma barra cilíndrica de 12 mm de diâmetro; o aro será munido de três alces eqüidistantes, semicirculares de diâmetro 40 mm, soldados, de aço inoxidável, oriundos de uma barra de 7 mm diâmetro, e orientados para frente (i.e., perpendicular ao plano descrito pelo aro); nos alces serão fixados, por meio de 3 manilhas de aço inoxidável (3/4 in.=0,75 polegadas), 3 cabos de aço inoxidáveis, 2 mm diâmetro, 1 m de comprimento com as pontas dobradas em anel e mantidas fechadas por 2 anilhas (de alumínio ou cobre) de cada lado; a junção dos 3 cabos e da corda de tração será realizada com uma manilha de aço inoxidável de 11/4 in. (1,25 polegada); Figura 27. Rede. 139 a rede propriamente dita (Figura 28) terá as seguintes caraterísticas : cilíndro-cônica de 2,5 m de comprimento (1,25 m cilíndrico e 1,25 m cônico), com extremidade anterior de 50 cm de diâmetro, e extremidade posterior de aproximadamente 12 cm de diâmetro interno (dependente do diâmetro externo do copo terminal disponível no lugar de fabricação); malha de 500 micrômetros de abertura, quadrada, de nylon branco, em 6 painéis (3 na frente, e 3 na trás); os painéis de malha serão costurados em ziguezague de maneira a minimizar a presa de larvas entre painéis. Interna e externamente, as costuras serão sobrecosturadas (reinforçadas) por uma banda de tela de nylon dobrada, 3 cm de largura; as duas extremidades e a parte mediana da rede serão compostas de pano de tela de nylon (tipo vela de veleiro), de 20 cm de largura na frente, 15 cm no meio e 15 cm na extremidade posterior; na dobrada frontal da extremidade anterior serão inseridos anéis de latão, espaçados de 6 cm, dispostos a 1cm da borda anterior da rede, na parte dobrada, e de diâmetro interno 7 mm; o copo terminal (Figura 29) será composto de 2 peças de PVC, a anterior de 10cm comprimento e Figura 28. Rede, esquema da malha. aproximadamente 12cm diâmetro externo, e a posterior de 20cm de comprimento total e munida de 2 janelas laterais de malha 500 micrômetro (aproximadamente 10 x 4cm). A parte posterior se encaixará na anterior e será segurada por 2 parafusos e duas borboletas de aço inóx ou latão. As janelas terminarão a 3,5cm do fundo e a malha será colada no interior. Figura 29. Copo terminal. 140 6.3.3 Preparativos antes da coleta Aferir o fluxômetro General Oceanics 2030R: - o f luxômet ro deve u t i l i zado confor me as instruções do construtor. Em particular o líquido interno (água de torneira ou gel especial de silicone) deve ser checado e eventualmente topado. Fluxômetros que perdem água (mas do que alguns cm cúbicos) durante as amostragens ou durante o armazenamento entre amostragens DEVERÃO ser devolvidos e trocados; - os fluxômetros utilizados devem ser aferidos previamente eo procedimentos são os seguintes : 1. acoplar aro, bóia, peso, fluxômetro, cabos e corda de tração; 2. ir na piscina da sua instituição, de comprimento conhecido; 3. puxar o aro de uma lado da piscina para o outro, anotando os números do início e do fim assim como o tempo decorrido; A priori, a velocidade de tração deve ser aproximada da velocidade de amostragem (1,5 nó, ou seja aproximadamente 1,5m por segundo); Alternativamente, se pode variar a velocidade de tração para verificar a eficiência do fluxômetro em várias velocidades de amostragem. 4. repetir esses procedimentos várias vezes (por exemplo, 10 vezes [mais no segundo caso]); 5. deduzir a constante média do fluxômetro, a ser utilizada no cálculo do volume filtrado e da abundância do ictioplânkton : Constante = Distância* (Número_final – Número_inicial 999999 com Distância em metros e Número_final e Número _inicial os números anotados do fluxômetro; ao sair da fábrica, a constante do GO2030R = 26873 (hélice padrão). alternativamente, se pode aferir o fluxômetro com uma corda de comprimento conhecido em um corpo d’água parada (sem correnteza). Preparar o material de campo: - separar todo o material, verificar seu bom estado, e verificar a sua presença (várias vezes...) - inserir pilhas novas em todos os aparelhos (e.g., GPS) que precisem, e levar um conjunto de pilhas extra. - preparar o formol: misturar alguns gramas de tetraborato de sódio (uma pequena colher) a 1 litro de formol puro (= solução de formaldeido a 38-40%). Sacudir várias vezes a uma hora de intervalo. Deixe decantar antes de utilizar. - Nota impor tante: O formaldeido é tóxico e cancer ígeno. Ev i te resp i rar vapores , lave cuidadosamente com água e sabão qualquer parte do corpo que entrou em contato com ele. Arde bastante em feridas e olhos. Siga os procedimentos de segurança recomendados. Nunca despeja na pia, mas recolha qualquer formalina usado, e armazene em um local isolado. Descubra quem pode recolher e destruir ou armazenar este (e outros) produto tóxico. - preparar os potes de coleção, um para cada ponto (numerados com o nome do ponto a ser amostrado), com vários potes de sobra em caso de grande quantidade de detritos ou ctenóforos (numerados A, B, C, etc. por exemplo); - em cada pote adicionar a quantidade suficiente para diluir apropriadamente (5%) o formol após compleição (e.g., em um pote de 0,5 litros, colocar 25 cm cúbicos (25 mL)). 6.3.4 Coleta das amostras As amostras serão coletadas: durante períodos de maré de quadratura (aproximadamente ±3 dias da lua crescente ou miguante), incluindo nos locais ou épocas nos quais as marés astronômicas são superadas por marés não- astronômicas (devido ao vento ou à chuva, por exemplo); no período diurno; de jusante para montante, nos locais impactadoscomo nos locais controle; a velocidade de tração pelo barco (mínimo 15 HP na poupa) será de 1,5 nó (aproximadamente 1,5 m/sec). Quando impossível o arrasto com barco devido à baixa profundidade, as amostragens deverão feitas manualmente; enquanto isso for possível, os ar rastos serão conduzidos seguindo uma rota circular para minimizar o impacto da movimentação d’água pela hélice do barco; as amostras terão uma duração de 3 minutos no mínimo, e não serão replicadas; a corda de tração terá entre 10 e 20 m de comprimento; a profundidade aproxima de 1m (arrastos subsuper ficiais). A rede será mantida nessa profundidade por uma bóia (aproximadamente 4 litros) e um peso (aproximadamente 2 kg) f ixados apostamente no aro de aço; um fluxômetro mecânico (Figura 30) General Oceanics 2030R (hélice padrão) será acoplado, horizontalmente, no aro; 141 6.3.5 Procedimentos no campo Parar o barco, sem ancorar; Amarrar a extremidade da corda de tração em algum lugar do barco. Nota: é mais fácil puxar reto com o ponto de fixação perto do eixo longitudinal do barco, e é mais fácil virar (mas de um lado só) com o ponto de fixação no lado do barco; Anotar na planilha de campo padronizada para todos os grupos os dados do arrasto: data, hora, ponto amostral, (número do arrasto), número inicial do fluxômetro, etc., indicando se o arrasto é manual ou com barco motorizado; O número de arrasto é o número do ponto (1 até 8), a menos que o arrasto seja repetido (por qualquer razão). Neste caso, o número de arrasto é o número do ponto- barra- número da repetição (por exemplo 8/2. Por definição, 8/1 = 8) pedir para o barqueiro navegar em curva, esperar que a velocidade chegue a 1,5 nós e lançar a rede, marcando o tempo. Este procedimento impede que a circulação da água ocasionada pelo hélice atrapalhe a coleta. Alternativamente: lançar o barco, devagar, e lançar a rede, segurando-a pela corda. Quando a corda está tensa, marcar o tempo e acelerar o barco até a velocidade de arrasto = 1,5 nós; durante todo o arrasto deverá ser utilizado o GPS, nas funções “velocidade” (speed) e “rota” (route), para se obter uma confirmação para a velocidade de arrasto e o comprimento do arrasto independentes do fluxômetro; Cuidado que a distância percorrida pelo barco em rota curva é bastante maior que a distância percorrida pela rede; após completar o tempo, colocar o motor em ponto morto, parar o motor, deixando o barco correr, e puxar na corda de tração da rede; uma vez a boca da rede seguramente fora d’água, anotar o tempo real de arrasto se for diferente da duração prevista e o número final do fluxômetro; a duração de arrasto é o tempo decorrido entre o início do arrasto (ou seja, o momento em que a corda tensa) até o surgimento da boca da rede na superfície da água; levantar a rede, lavando-a com água (bomba 12V de porão, ou balde), de fora da rede para dentro, para empurrar o plâncton colado na malha para o copo terminal; transferir o conteúdo do copo terminal para o pote. Completar o pote com água. Anotar na folha de campo o número dos potes suplementares, se houver. Os pote(s) devem conter uma etiqueta com os dados do arrasto (data, hora, ponto, etc.)(o mais simples e escrever com lápis/nanquim numa folha de papel vegetal). Misturar gentilmente para que todos os organismos estejam em contato com a solução de formol. lavar o copo terminal e coloca-lo de volta na rede. 6.3.6 Depois do campo lavar a rede com água doce, l impando-a cuidadosamente com uma escova de nylon dos detritos acumulados na malha da rede o do copo. Deixar secar fora dos raios direitos do sol. Armazena enrolada ou pendurada, nunca dobrada, fora do sol direito. Pode ser deixada no aro. lavar, limpar, e secar todo o equipamento, bombas, etc. O fluxômetro pode ser lavado externamente, secado (não deixe ele apoiado na hélice), e colocado de volta na sua caixa. Não parece necessário tirar a água de dentro do fluxo, nem lavar com vinagre, mas é importante armazena-lo fora da luz (qualquer luz, incluindo artificial). Favor ler o manual de manutenção da General Oceanics. Figura 30. Fluxômetro mecânico. 142 nos dias seguintes à amostragem, observar as amostras por presença de bolhas gasosas ou fermentação: se isso acontecer, você esqueceu de colocar o formol, não colocou suficientemente, ou houve uma quantidade extremamente importante de plâncton/detritos. Adicione formol puro, isso pode salvar a amostra. Em todos os casos em que haja bastante material, mistura (sacuda) gentilmente a amostra uma vez por dia durante alguns dias. depois 3-7 dias, transferir as amostras para frascos de armazenagem, 200 até 350 mL, de vidro com snap- cap ou outro tipo adequado. Os procedimentos são: sem mexer/misturar/sacudir a amostra, versar o máximo que for possível do formalina acima de uma peneira (com malha de 500 micrômetros), deixando o máximo que for possível da amostra no fundo do pote; passar o decantado do pote para o frasco de armazenagem com ajuda de um funil; lavar o pote de campo acima da peneira, a peneira acima do funil, e o funil acima da amostra (nesta ordem) com formalina 5% de um picete para recolher todo o plâncton; completar o frasco com formalina 5%. Pode-se utilizar o formalina da própria amostra se ele for limpo. Deve- se utilizar formalina nova se a amostra for muito suja, especialmente quanto houver “melasse” (géleia) de ctenóforos; as amostras contendo muito material deverão ser divididas em dois frascos de armazenamento ou mais. Incluir esta informação nas duas etiquetas (ver parágrafo a seguir); os recipientes de armazenagem devem contar, internamente e externamente, os dados da coleta. A etiqueta interna pode ser de papel vegetal escrita com nanquim ou lápis. Em geral será a etiqueta de campo. A externa, autocolante, será coberta por fita durex para minimizar o desgaste do papel (fricção contra outros vidros, gotejamento d’água, etc.), e conterá informações copiadas da etiqueta interna; SEMPRE armazenar as amostras no escuro para minimizar a despigmentação, em posição vertical sem possibilidade de versar. Verifique regularmente as tampas: elas podem quebrar com a passagem do tempo e deixar a amostra secar. Se possível passar a limpo as planilhsa de campo e triagem (não é recomendado), ainda que isso possa dificultar a posterior detecção de erros. De qualquer jeito, sempre guardar as planilhas de campo originais. Entrar os dados de coleta no computador, e armazenar as folhas de campo em um local adequado; levar uma cópia do arquivo por um outro lugar; 6.3.7 Triagem e identificação 6.3.8.1 Triagem do ictioplâncton da rede de 500 micrômetros Material necessário: caderno de triagem, 2 peneiras de 500 micras de malha, um funil, a amostra, uns frascos de armazenamento de sobra, dois grandes potes, uma placa de triagem, um pequeno frasco com tampa, um estereomicroscópio; Nota: peneiras podem ser construídas com peneiras de cozinha (em plástico), cortadas e onde é colada uma sobra da malha da rede (cuidado que alguns plásticos não segurem alguns tipos de cola). As placas podem ser construídas a partir de acrílico de 2 mm de espessura, seguindo o gráfico abaixo (Figura 31) (cuidado que o clorofórmio utilizado pelos vendedores de acrílico para colar peças entre si não resiste ao formol). Nos dois casos, se pode utilizar como cola (com resultados variáveis) resina sintética, cola para PVC ou cola epoxy. Cola para papel e silicone geralmente não dão bom resultado. Figura 31. Placas de triagem. 143 separar a amostra a ser triada das outras; no caderno de triagem, anotar os dados da amostra presentes nas DUAS etiquetas. Se as informações diferem, confiar na etiqueta interna... depois de verificar nas folhas de campo; anotar essas informações em papel vegetal e etiqueta autocolante a serem colocados no pequeno frasco: este é o frasco onde será depositado o plâncton; colocar formalina 5% limpo no frasco pequeno, e o deixar aberto perto do estereomicroscópio passar a amostra para uma peneira (com malha de 500 micrômetros), recolhendo o formalina emum grande pote; colocar a amostra, com um pouco de formalina ou água para impedi-la de secar, em uma placa de Petri de tamanho adequado; colocar uma pequena fração (<= 1cm cúbico) do material a ser triado na placa de triagem; completar com água; nunca utilizar formalina; distribuir o plâncton em toda a placa; Enumerar todos os ovos de peixe presentes; não haverá identificação de ovos; Nota importante: se os ovos forem extremamente abundantes (total estimado > 2000), dividir a amostra. O número de divisão varia com a quantidade estimada de ovos na primeira placa de triagem. Dividir primeiro em dois (= duas metades), eventualmente dividir uma das duas metades em dois (=dois quartos), ou dividir um quarto resultante em dois (= dois oitavos), etc. com o Falstom Splitter (fracionador). - se você não tiver acesso a um fracionador, a amostra inteira deverá ser enumeradas para ovos; - as frações obtidas (e.g., 1/2, 1/4, 1/8, 1/16, e um outro 1/16) são colocadas em frascos diferenciados; - enumerar os ovos de uma das duas frações menores (1/16, no caso). Se o número de ovos for inferior a 1000 (mil), enumerar a outra fração menor (o outro 1/16). Se o número ainda for menor que 1000, passar para a fração imediatamente maior (1/8). Repetir o processo até ter enumerado pelo menos 1000 ovos. - anotar o número total de ovos enumerados e a fração triada (e.g., 1/16 + 1/16 + 1/8 = 2/8 = 1/4); catar TODAS as larvas e juvenis de peixe (na amostra inteira). Não haverá fracionamento para as larvas. Se houver fracionamento para enumeração de ovos, catar todas as larvas em todas as frações. as larvas e juvenis são pegos com uma pinça fina, com bastante precaução, e depositadas no frasco pequeno; quando toda a placa de triagem for passada sob o estereomicroscópio e todas a larvas catadas, limpa a placa acima da segunda peneira, com a ajuda de um picete d’água; colocar novo plâncton não triado na placa de triagem e repetir o processo até triar a amostra inteira; no final do trabalho, colocar o amostra triada de volta no frasco de armazenamento, completar com formalina adicionar no caderno de triagem os dados de triagem: dia, pessoa, fracionamento, número de frascos de plâncton separado, etc. armazenar o ictioplâncton separado em local escuro. 6.3.8.2 Identificação do ictioplâncton da rede de 500 micrômetros A identificação do ictioplâncton se fará a nível de família, utilizando a bibliografia pertinente; os organismos apresentando problemas na identificação deverão ser separados dos outros (esta separação deve ser claramente descrita no caderno de triagem), colocados em um frasco com as informações de coleta (e de triagem) para futura conferência, envio a um colega, fotografia, etc. 6.3.8 Apresentação dos dados Os dados devem apresentados de maneira tabular, com variáveis nas colunas e amostras nas linhas; uma certa redundância é desejável para diminuir o risco de erro. As colunas conterão os seguintes dados: estado do país; ponto amostral, no formato numérico 1 até 8; latitude (S) do ponto amostral, no formato ggmmss,d (grau minuto segundo, decimal); longitude (W) do ponto amostral, no formato ggmmss,d (grau minuto segundo, decimal); data, no formato dd/mm/aaaa; hora, no formato hh:mm (24 horas); duração, no formato mm:ss; distância percorrida, estimada pelo GPS, em metro; a velocidade de arrasto, estimada pelo GPS, em metro por segundo; constante do fluxômetro (se a amostragem ocorrer entre dois aferrinemos periódicos, e se as constantes calculadas antes e depois desta amostragem forem diferentes, fazer uma estimação linear; isso pressupõe que os fluxômetros forem utilizados somente nas amostragens do Milênio). número do fluxômetro no início do arrasto, no formato de 6 dígitos; número do fluxômetro no final do arrasto, no formato de sete dígitos; o primeiro digito será um zero (0) e será seguido pelo número lido; nos raros casos que o fluxômetro passe por o valor zero entre início e fim do arrasto, o primeiro digito será um (1) e será seguido do número lido; 144 a fração utilizada na enumeração de ovos, distância varrida, em metros, com uma casa decimal, calculada a través da formula seguinte: Distância = Diferença+de+número* constante_do_fluxômetro 999999 velocidade de arrasto, em metro por segundo, calculada a través da formula seguinte, com duração de arrasto em segundos, com duas casas decimais : Velocidade = Distância aa Duração_do_arrasto volume filtrado, em metros cúbicos, calculado a través da formula seguinte, com diâmetro do aro da rede (0,50m) em metros, com duas casas decimais: Volume = π* Diâmetro_do_aro2 * Distância 4 as colunas seguintes conterão as abundâncias calculadas de ovos de peixe, famílias de peixe, em número por 100 metros cúbicos, com 3 casas decimais; as abundâncias serão calculadas com as formulas seguintes: Abundância ovos = 100 * Número_de_ovos fracção_triada * Volume Abundância ictioplâncton = 100 * Número_de_larvas Volume 5.3.10 Planilha de Campo Uma sugestão para uma planilha de campo é anexada a seguir: 6.4 REFERÊNCIAS BOLTOVSKOY, D. (Ed.) (1981) Atlas del Zooplancton del Atlántico Sudoccidental. Mar del Plata: INIDEP. _____. (1999). South Atlantic Zooplankton. [S.l.]: Leiden: Backhuys Publishers. EDLER, L. (1979). Recomendations on phytoplankton and chlorophyl. W.C. Balt. Mar. Biologist., [S.l.], v. 9, p. 59 p. LENZ, J. (2000). Introduction. In: HARRIS, R. P. Et al. (Eds.). Zooplankton methodology manual. Great Britain: Academic Press. LUND, J. W. et al. (1958). The inverted microscope method of estimating algal numbers and the statistical basis of estimation by couting. Hydrobiologia, Dordrecht, v. 11, p. 143-170. UEHLINGER, V. (1964). Étude statistique des méthodes de dénobrement planctoniqe. Arch. Sci., [S.l.], v. 17, n. 2, p. 121-123. UTERMÖHL, H. (1958). Zur Vervollkommung der quantitativen Phytoplankton metodik. Mitt. Int. Ver. Theor. Argew. Limnol., Hickory Corners, v. 9, p. 1-38. LOCAL____________________________ DATA______________ ___________________________________________________________________ PONTO/ARRASTO_______ MALHA_________micrômetros LATITUDE___________________ LONGITUDE___________________ HORA_____________ DURAÇÃO__________________ FLUXÔMETRO-entrada_____________________ FLUXÔMETRO-saída_______________________ DISTÂNCIA-GPS___________________________ VELOCIDADE-GPS_________________________ Parâmetros físico-químicos ? Sim Não NOTAS_______________________________________________________________________________________________________ ______________________________________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________ PONTO/ARRASTO_______ MALHA_________micrômetros LATITUDE______________ LONGITUDE_______________ HORA_____________ DURAÇÃO__________________ FLUXÔMETRO-entrada_____________________ FLUXÔMETRO-saída_______________________ DISTÂNCIA-GPS___________________________ VELOCIDADE-GPS_________________________ Parâmetros físico-químicos ? Sim Não NOTAS_______________________________________________________________________________________________________ ______________________________________________________________________________________________________________ _____________________________________________________________________________________________________________ View publication statsView publication stats https://www.researchgate.net/publication/270342264 recos-a1.tif