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Pedro Acquaviva Microbiologia Básica Meios de Cultura Definição ● “habitat” artificial com a presença de todos os nutrientes para o crescimento de uma bactéria específica ● Utilizados para análise laboratorial Classificações - Estado físico: ● Meios líquidos: Nutrientes em solução favorecem um crescimento bacteriano mais rápido. EX: BHI ● Meios sólidos: Possibilita o isolamento e o crescimento de várias colônias . EX: Ágar sangue (AS) ; Ágar Batata (AB) ● Meios semi-sólidos: verificar a motilidade da bactéria. Sulfeto indol Motilidade (SIM) Classificações - Composição ● Meios sintéticos: previsíveis e controlados quimicamente (rico ou pobre). EX: Manitol Salt Agar (MSA ● Meios complexos ou naturais: imprevisíveis e quimicamente indefinidos. Ex: Ágar Sangue Classificações - Utilização: ● Meios de Transporte: Meio pobre em nutrientes utilizado apenas para o transporte de bactérias e para apenas mantê-las metabolicamente seguras por algumas horas. Ex: stuart e armys ➔ Stuart: Carência de Nitrogênio impede a multiplicação celular, mas composição permite a sobrevivência do microrganismo por até 24 horas ➔ Armys: Semelhante ao stuart ● Meio de enriquecimento: Meio rico em nutrientes que favorece o rápido crescimento das colônias e a identificação mais rápida destas. Ex: Ágar sangue, Ágar chocolate, Ágar Cled. ➔ Ágar chocolate: Sangue hemolisado. Utilizado para o cultivo de microrganismos exigentes (Haemophilus spp. Neisseria spp.). Quase todos os microrganismos crescem nesse meio. ➔ Ágar Sangue: O mais utilizado é o sangue de carneiro a 5%. Indicação a partir da hemólise. Streptococcus; Staphylococcus. ❖ Total (beta-hemólise): bactérias promovem a lise das hemácias formando uma coloração diferentes ao redor da colônia. Streptococcus piogenys ❖ Parcial (alfa-hemólise): formação de um esverdeado em volta da colônia indicando hemólise parcial. Staphylococcus aureus ❖ Sem resultado (gama-hemólise): O meio permanece o mesmo em volta da colônia. Streptococcus viridans ➔ Ágar CLED: Utilizado principalmente para o crescimento de microrganismos presentes em amostras urinárias. Substância reveladora para bactérias que consigam clivar a lactose (cor amarela). Também permite o crescimento de leveduras ● Meios seletivos: meios que contêm substâncias (antibióticos, componentes químicos) que inibem o crescimento de alguns microorganismos e permite o crescimento de espécies específicas. Ex: Ágar SS; Ágar MacConkey (MC) ➔ Ágar Manitol (MSA) - Meio seletivo para S. aureus, que torna o meio amarelado, enquanto para outras bactérias este pemanesce vermelho ➔ Ágar SS (Salmonella - Shigella):Cor original vermelha alaranjada. Meio seletivo que inibe o crescimento de bactérias gram positivas. Possuem indicadores para bactérias lactose positivas e negativas e de detecção de H2S. Utilizado em amostras de fezes pois a maioria das bactérias da microbiota intestinal são gram positivas. Também utilizada em amostras de água e alimentos ➔ Ágar Hektoen: Semelhante ao Ágar SS com cor original esverdeada ➔ Ágar MacConkey: Também inibe o crescimento de bactérias gram positivas. Permite a identificação de bactérias fermentadoras de lactose - positivas (Cora colônias em rosa) e não fermentadoras - negativas (incolor). Utilizada em amostras de fezes, urina, água e alimentos ➔ Teague: Semelhante a ágar MacConkey. Cor original vinho ➔ Lowen Steins-Jensen: Cor verde. Seletivo para crescimento de micobactérias como Mycobacterium tuberculosis. ➔ Ágar Thayer-martin: Cor chocolate. Meio que permite o crescimento exclusivo de Neisseria gonorrhoeae e Neisseria meningitidis (inibição antibiótica das demais bactérias). ➔ Ágar Mueller Hinton: Cor amarelo palha (quase transparente). Meio rico utilizado para o teste de sensibilidade de antimicrobianos ➔ Ágar Sabouraud: Cor âmbar claro. Utilizado para o crescimento de fungos filamentosos e leveduras. Utilização de antibióticos para inibir o crescimento bacteriano ● Meios de Identificação: Meios utilizados para identificar a bactéria presente. Geralmente essa identificação ocorre através da coloração. Meio caro. IAL, EPM-MILI, TSI Caldos de Enriquecimento ● Meios líquidos de enriquecimento ➔ Tioglicolato: Análise da dependência de O2 ➔ Caldo BHI: Caldo produzido pela infusão de nutrientes do coração e cérebro, se tornando um meio extremamente rico para o crescimento rápido de bactérias. ➔ Caldo TSB: Caldo à base de carne, de cor amarelo límpido e utilizado para o inóculo no teste de susceptibilidade de antimicrobianos ➔ Caldos para fezes: meios seletivos de enriquecimento. Caldos selenito, GN e tetrationato de Kauffmann Técnicas de Semeadura ● Semeadura quantitativa com alça calibrada: Inserção de uma estria central inicial e posterior produção de estrias em zigue-zague. Inóculo inicial na ponta da estria central. Utilizada para urocultura. ● Semeadura por Esgotamento: Série de estriações em zigue-zague, formando 3 áreas sem contato entre elas. Crescimento isolado de colônias na área 3 (mais distante da inoculação)
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