Contagem de unidades formadoras de colônia

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Raissa Filgueira Macêdo
Agressão e defesa veterinária
a
CONTAGEM DE UNIDADES FORMADORAS DE COLÔNIA-
UFC
PRINCÍPIO DA UFC
· As células não se agregam, cada uma dará origem a uma colônia.
· Porém, algumas bactérias formam
agrupamentos ou arranjos, não é possível
fazer esta relação, ou seja, estabelecer o n.º
de colônias e o n.º de células. Por isso, o
resultado deve ser expresso em UFC
(Unidades Formadoras de Colônias).
· É a medida empregada para indicar o número de bactérias presentes.
· Neste teste, diluições apropriadas das amostras de leite são colocadas em placas de vidro (placas de Petri) e misturadas com o meio de cultura em estado líquido. Após a solidificação do meio de cultura, as placas são incubadas à temperatura de 30ºC, durante 72 ou 48 horas. Depois desse período, as colônias visíveis são contadas e calcula-se o número de UFC/mL de leite.
RECOMENDAÇÕES GERAIS: 
· Sempre utilizar mais de uma placa, seja uma duplicata da mesma diluição, seja duas ou mais diluições diferentes.
· As contagens deverão ser realizadas imediatamente após o período de incubação das placas.
· Na impossibilidade de realizar a contagem imediatamente após o período de incubação, manter as placas sob refrigeração em temperatura de 4ºC a 7ºC por um período não superior a 24h.
· As colônias deverão ser contadas com auxílio de contador de colônias equipado com placa de vidro ou acrílico, com diâmetro compatível com o das placas utilizadas, dividido milimetricamente em quadrantes com 1cm² de área com iluminação artificial uniforme.
· O contador de colônias deverá estar localizado em local onde não haja incidência direta de luz sobre a plataforma de apoio da placa, para evitar possíveis enganos na identificação das colônias.
REGRAS GERAIS PARA CÁLCULO E REGISTROS
· A contagem é expressa em número de bactérias por mililitro do meio de cultura ou UFC/ml.
· Diluição refere-se a diluição da amostra. Por exemplo, se 37 colônias estão presentes em uma placa com diluição 1:100, o cálculo pode ser:
MÉTODOS DE CONTAGEM DE CÉLULAS VIÁVEIS/ CONTAGEM EM PLACA
· Conta o número de células capazes de se dividir.
DILUIÇÃO ANTES DO PLAQUEAMENTO
· Placas confiáveis entre 30-300 colônias
· Se te muitas colônias, algumas não crescem, pode ter sobreposição de colônias 
· Poucas colônias, não é confiável estatisticamente
· Importante fazer replicas para diminuir erros nas medidas
· Método bastante usado: analisar contaminações; sensível; medir a quantidade de células de um organismo específico proveniente de uma amostra mista- selecionando o meio de cultura na placa de petri.