Relatório de aula prática 1 Bioquímica Humana

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RELATÓRIO DE AULAS PRÁTICAS - EAD 
 
AULA 01 
DATA: 
 
07/08/2021 
VERSÃO:01 
 
RELATÓRIO DE AULAS PRÁTICAS: BIOQUIMICA HUMANA – Aula 1 
 
 
 
 
TEMA DE AULA: ATIVIDADE CATALÍTICA DA AMILASE SALIVAR 
 
 
1. Resumo sobre o tema abordado em aula. 
 
A amilase salivar é uma enzima produzida nas glândulas salivares, localizada na 
cavidade oral. Essa enzima serve para degradar carboidratos como o amido. O amido 
é um polissacarídeo de reserva energética das plantas. Os ácidos têm a capacidade de 
degradar as ligações glicosídicas que formam o amido. 
Na aula prática foi realizado a hidrolise química e hidrolise enzimática. A hidrolise 
enzimática foi realizada a partir da amilase salivar e a hidrolise química foi utilizada 
uma solução de ácido clorídrico. 
 
Procedimentos: 
 
Para hidrolise química: 
 
• Foi utilizado o amido a 1% que foi colocado na proveta 30ml e após foi colocado em um 
Becker. 
• Foi acrescentado 3 ml de ácido clorídrico na solução de amido. 
• Em cada um dos 3 (três) tubos foi adicionado 5 ml de água. 
• A solução que estava reservado no Becker foi transferida para os 3 tubos de ensaio na 
quantidade de 5ml cada. 
 
Para hidrólise enzimática: 
 
• Foi utilizado o amido a 1% que foi misturado em 3 ml de amilase salivar. 
• Em cada tudo de ensaio foi adicionado 5 ml de água. 
• A solução que estava reservado no Becker foi transferida para os 3 tubos de ensaio na 
quantidade de 5ml cada. 
 
Após todos os tubos serem preenchidos, os tubos 1 da hidrolise química e enzimática 
ficaram 1 minuto no banho de gelo. 
Os tubos 2 da hidrolise química e enzimática ficaram no banho maria durante 10 
minutos e depois no banho de gelo. 
 
 
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Os tubos 3 da hidrolise química e enzimática ficaram 20 minutos no banho maria e 
depois no banho de gelo. 
Após o banho de gelo foi adicionado no tubo 1, 2 e 3 a solução de lugol a 2%, sendo 5 
gotas. 
 
 
2. Materiais utilizados. 
 
• Foram utilizados 3 (três) tubos de ensaio A1, A2 e A3 para hidrolise química 
• 3 (três) tubos de ensaio A1, A2 e A3 para realização da hidrolise enzimática através 
da amilase salivar 
• Reagentes 
• Becker 
• Pipeta 
• Erlenmeyers 
• Proveta 
• Pipeta graduada 
• Pêra 
• Pipeta automática 
• Banho maria. 
 
 
3. Responda as Perguntas: 
 
A) Qual a composição do amido? 
 
O amido é considerado um carboidrato de origem vegetal, sendo a fonte energética das 
plantas. Segundo Pinheiro, Porto, Menezes (2005, p.12) “O amido: é um polissacarídeo 
encontrado nos vegetais, como cereais, raízes, tubérculos, leguminosas e outros. 
Constitui a principal fonte dietética de carboidrato”. O amido é formado da junção dos 
polissacarídeos amilose e amilopectina. 
 
 
B) Comente os resultados obtidos nos tubos 1, 2 e 3 no procedimento da hidrólise química 
do amido. 
 
Tubo 1: Após a adição de 5 gotas de lugol, o tubo ficou com a cor esverdeada, e houve 
a degradação do amido. 
Tubo 2: Após a adição de 5 gotas de lugol, o tubo ficou com a cor azul escuro, e não 
houve a degradação do amido. 
Tubo 3: Após a adição de 5 gotas de lugol, o tubo ficou com a cor azul escuro, e não 
houve a degradação do amido. 
 
 
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C) Qual o objetivo do uso de HCl, aquecimento e resfriamento no procedimento da 
hidrólise química do amido? 
 
O ácido clorídrico foi utilizado para fazer a degradação das ligações glicosídicas. As 
enzimas são proteínas que podem desnaturar por diversos fatores como, Ph, 
temperatura, ácidos etc. Por esse motivo na aula prática foi feito o procedimento de 
banho maria e banho de gelo para constatar a ação dessa mudança de temperatura 
para a desnaturação dessas enzimas. 
 
 
D) Descreva a sequência de transformações operadas pela amilase na molécula da 
amilose. 
 
Com a adição do lugol foi possível verificar nos tubos 1 da hidrólise química e enzimática 
que houve a interação do lugol com o amido, e com o tempo a solução foi clareando, o 
que significa que houve a degradação do amigo. Já nos tubos 2 e 3 a cor ficou azul 
escuro, e não houve clareamento, o que se pode concluir que não ocorreu a hidrólise. 
 
E) Comente os resultados obtidos nos tubos 1, 2 e 3 no procedimento da hidrólise 
enzimática do amido. 
 
Tubo 1: com a adição do lugol, apresentou uma cor esverdeada, e houve a degradação 
do amido. 
Tubo 2: Após a adição de 5 gotas de lugol, o tubo ficou com a cor azul escuro, mas não 
houve a degradação do amido. 
Tubo 3: Após a adição de 5 gotas de lugol, o tubo ficou com a cor azul escuro, e não 
houve a degradação do amido. 
 
F) Explique a relação entre a atividade da amilase salivar, o tempo de incubação da enzima 
com o amido e a variedade de cores observada no procedimento da hidrólise enzimática do 
amido. 
 
Para que seja feita a hidrólise tanto a enzimática quanto a química, foi necessário o uso 
da água e de soluções químicas e enzimáticas, pois sem está substâncias seria 
impossível obter uma hidrolise, tendo em vista que é necessário para fazer a quebra 
das ligações glicosídicas. As cores observadas no decorrer dos processos de hidrólise 
significam que quando ocorreu o clareamento no tubo 1, isto por conta da hidrolise que 
estava ocorrendo, pois como o tubo 1 não teve mudanças de temperaturas então foi 
possível ocorrer a interação do amido com as demais substâncias, pois a temperatura 
influencia na atividade enzimática e na reação química. O tubo 2 e 3 ficaram com a cor 
escura identificando assim que não ocorreu a hidrólise. 
 
 
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3. Conclusão sobre a atividade catalítica da amilase salivar. 
 
Para que haja a degradação de um carboidrato, é necessário que ocorra a hidrólise 
através da ação de uma enzima que é chamada de amilase salivar, também chamada 
de ptialina. Essa enzima esta presente na saliva. Para que ocorra a atividade catalítica 
da amilase salivar, é necessário que tenha as condições ideais, pois interferentes como 
mudanças de temperatura podem fazer com que não ocorra a atividade catalítica, e que 
terá como consequência uma diminuição ou não ocorrência das velocidades das 
reações. 
 
 
TEMA DE AULA: REAÇÃO DE SELIWANOFF (REAÇÃO PARA DISTINÇÃO ENTRE 
ALDOSES E CETOSES) 
 
 
 
1. Resumo sobre o tema abordado em aula. 
 
Na aula prática foi feita a identificação e diferenciação entre aldoses e cetoses, que são 
identificadas dentro do grupo de carboidratos. 
 
Procedimento: 
 
• Preparar os tubos com 1 ml de glicose, frutose e água 
• Adicionar 1,5 ml de ácido clorídrico em todos os tubos 
• Colocar 0,5 ml do reativo de seliwanoff em todos os tubos 
• Colocar no banho maria e verificar a mudança ou não da coloração 
 
 
2. Materiais utilizados. 
 
• Reativo de seliwanoff 
• Ácido clorídrico 
• Glicose 
• Frutose 
• Tubos de ensaio 
• Banho maria 
• Pipeta graduada 
• Pêra 
 
 
3. Responda as Perguntas: 
 
 
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A) Explique o princípio bioquímico do teste de Seliwanoff. 
 
As aldoses são carboidratos simples, e as cetoses são monossacarídeos compostos 
por grupo cetona. A identificação de aldoses e cetoses é feita através da reação de 
seliwanoff. A coloração final deverá ficar na cor vermelha. 
 
 
B) Comente os resultados obtidos nos 3 tubos utilizados no procedimento, correlacionando 
com a presença ou não de aldoses e cetoses. 
 
Após o banho maria o tubo da glicose ficou com a cor sem alteração, o que comprova 
não ser uma cetose. 
O tubo da frutose ficou com a coloração vermelha o que significa que houve a interação 
do resorcinol com furfural o que confirma ser uma cetose. 
O tubo da água permaneceu com a cor inalterada. 
 
C) Explique qual o objetivo de utilizar um tubo apenas com água destilada.O objetivo de fazer a utilização de um tubo apenas com águas destilada é ter o controle 
negativo. 
 
D) Qual a função do ácido clorídrico (HCl) e da fervura aplicados no teste de Seliwanoff? 
 
Para que ocorra a diferenciação de aldose e cetose, é necessário utilizar o ácido 
clorídrico para fazer a desidratação do carboidrato. Para que a reação ocorra a fervura 
é necessária para que haja a interação entre os compostos. 
 
4. Conclusão sobre a identificação de aldoses e cetoses utilizando o teste de Seliwanoff. 
 
As cetoses reagem com ácidos fortes. Ao reagir com os ácidos fortes o composto irá 
produzir um material chamado de furfural, que irá reagir com o resorcinol, o qual é um 
composto derivado da ureia que está presente no reativo de seliwanoff. 
 
 
TEMA DE AULA: PRECIPITAÇÃO POR ÁCIDOS FORTES E METAIS PESADOS 
 
 
 
1. Resumo sobre o tema abordado em aula. 
 
 As principais fontes para precipitação de proteínas são os ácidos fortes. Na aula prática 
foi utilizado o ácido tricloroacético 20% e o acetato de chumbo para realização da 
 
 
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precipitação das proteínas. Foi utilizado a ovoalbumina 10%. Na aula foi feito uma 
reação com ácido e uma reação com metal pesado. 
 
Procedimento: 
 
• 2 ml de ovoalbumina em dois tubos de ensaios 
• 1 ml e ácido tricloroacético (no tubo de ácido) 
• 5 gotas de acetato de chumbo (no tubo do metal pesado) 
• Misturar a ovoalbumina com o ácido 
• Misturar a ovoalbumina com o metal pesado 
 
 
2. Materiais utilizados. 
 
3. Responda as Perguntas: 
 
A) Comente os resultados obtidos no procedimento da precipitação da ovoalbumina com 
ácido forte e metal pesado. 
 
Quando foi adicionado o ácido no tubo da ovoalbumina, na mesma hora houve a 
precipitação da proteína, que ficou com o aspecto branco leitoso. Quando o metal 
pesado foi adicionado no tubo da ovoalbumina houve também a precipitação imediata 
ficando com aspecto branco leitoso, porém no tubo do ácido a precipitação foi mais 
intensa, pois o ácido consegue romper as ligações peptídicas mais que o chumbo. 
 
B) Qual a fundamentação teórica que explica o processo de precipitação das proteínas 
com ácidos fortes e metais pesados? 
 
A precipitação das proteínas que significa a desnaturação, só é possível acontecer pois 
os compostos dos ácidos fortes e metais pesados são formados por compostos 
químicos que são capazes de fazer a quebra das ligações peptídicas. 
 
C) O que ocorreu com a ovoalbumina para que ela formasse um precipitado insolúvel 
neste experimento? 
 
Houve a mudança do ponto elétrico das cargas iônicas que ocorreram através das 
reações químicas. 
 
4. Conclusão sobre a precipitação de proteínas por ácidos fortes e metais pesados. 
 
Após a mistura dos compostos a precipitação das proteínas foi imediata, o que 
demonstra que as proteínas podem interagir com compostos que irão modificar sua 
estrutura. Ácidos fortes e metais pesados possuem compostos químicos que são 
 
 
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capazes de fazer o rompimento das ligações peptídicas, levando assim a desnaturação 
das proteínas. 
 
TEMA DE AULA: PRECIPITAÇÃO FRACIONADA POR SOLUÇÕES SALINAS 
CONCENTRADAS 
 
 
 
1. Resumo sobre o tema abordado em aula. 
 
Na aula prática foi realizada a abordagem a respeito das precipitações salinas das 
proteínas. 
 
Procedimento: 
 
• 2 ml de ovoalbumina no tubo A e tubo B 
• 2 ml de concentração salina no tubo A 
• Adiciona a água com a ovoalbumina e sulfato de amônio no tubo B 
 
2. Materiais utilizados. 
 
• Ovoalbumina 10% 
• Sulfato de amônia 
• Água destilada 
• Tubo A (concentração salina) 
• Tubo B (ovoalbumina) 
• Pera 
• Pipeta 
 
 
3. Responda as Perguntas: 
 
A) O que é “Salting out”, “Salting in” e camada de solvatação? 
 
O Salting in ocorre quando temos uma solução, a qual acrescentamos solução salina, 
temos como consequência um aumento na força iônica. Se em uma solução que 
contenha proteínas for acrescentado baixas concentrações de sais, as cargas dos sais 
começam a interagir com as proteínas o que gera uma maior solubilidade das 
proteínas. 
O Salting out ocorre a insolubilidade das proteínas por conta da grande quantidade de 
sais que é adicionado ao composto, fazendo com que haja uma interação proteína-
proteína. 
 
 
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A camada de solvatação é uma camada que faz com que as partículas se espalhem de 
forma uniforme pela água. 
 
B) Explique o princípio Bioquímico da precipitação de proteínas por adição de soluções 
salinas. 
 
As proteínas têm a classificação de acordo com os pontos isoelétricos, e em alguns 
ambientes ela interage de forma iônica com alguns compostos. Essas concentrações 
iônicas podem ser modificadas através da adição de sais, fazendo com que haja ou não 
a solubilidade da proteína. 
 
C) Comente os resultados observados da precipitação da proteína por sulfato de amônio 
na presença e ausência da água, correlacionando com a solubilidade da proteína. 
 
No tubo A sem a presença de água houve a precipitação das proteínas, o que é 
possível notar por conta do aspecto branco leitoso e no tubo B que continha água não 
foi possível verificar essa precipitação pois a água interfere nas ligações iônicas das 
cargas dos compostos. 
 
D) Conclusão sobre a precipitação das proteínas por adição de sais neutros (soluções 
salinas concentradas). 
 
Na aula prática foi possível identificar a importância do ponto isoelétrico das proteínas. 
Notamos também que na presença de água a proteína não ficou solúvel. Foi também 
possível observar que quando houve a adição de sais, ocorreu a separação para 
análise de determinados compostos 
 
 
TEMA DE AULA: REAÇÃO DE BENEDICT (IDENTIFICAÇÃO DE AÇÚCARES 
REDUTORES) 
 
 
1. Resumo sobre o tema abordado em aula. 
 
 Na aula prática foi feita a abordagem a respeito dos açucares redutores, para isto foi 
utilizado o reativo de Benedict que é um reagente que possui a cor azul. A junção da 
carbonila do açúcar redutor e o íon cúprico formam um composto vermelho, a partir dessa 
reação foi possível identificar quais são os principais açúcares redutores. 
 
Procedimento: 
 
• Colocar 5 ml do reativo de Benedict em cada um dos tubos 
• Colocar 5 ml da solução de glicose em um tubo 
• Colocar 5 ml da solução sacarose em outro tubo 
 
 
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• Colocar 5 ml de água em outro tubo 
• Após a mistura do reativo de Benedict com a glicose, sacarose e a água, levar ao 
banho maria por 5 minutos 
 
2. Materiais utilizados. 
 
• Glicose 1% 
• Sacarose 1% 
• Reativo de Benedict 
• Água 
• Tubos de ensaio 
• Pipeta 
• Pera 
 
3. Responda as Perguntas: 
 
A) Qual a composição do Reativo de Benedict? 
 
O reativo de Benedict é um reagente que serve para identificar açucares redutores. Esse 
reativo possui a cor azul e é formado pela solução de sulfato cúprico. 
 
B) O que são açúcares redutores? 
 
Os açucares redutores são monossacarídeos que apresentam grupo carbonila que são 
capazes de sofrer oxidação diante de agentes oxidantes em maio alcalino. 
 
C) Explique a fundamentação teórica do Teste de identificação de açúcares redutores com 
o Reativo de Benedict. 
 
Os açucares redutores são carboidratos que apresentam a estrutura de hidroxila em um 
dos carbonos, e esse carbono consegue reagir com diversos íons, principalmente os 
metálicos, e a reação se baseia nessa ligação, a qual a carbonila vai se ligar a um 
reativo que é chamado de Benedict, esse reativo possui íons que ao reagir com a 
carbonila, forma-se um composto que é chamado de óxido cuproso. 
 
D) Comente os resultados observados no experimento relacionando com a identificação de 
açúcares redutores. 
 
A água que foi o controlenegativo não teve nenhuma reação, a cor que ficou no tubo 
da água foi a própria cor do reativo de Benedict. No tubo da sacarose não houve 
reação entre os íons, o que significa que a sacarose não é um açúcar redutor. No tubo 
da glicose houve uma modificação que indica uma redução dos íons o que indica ser 
um açúcar redutor. 
 
 
 
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E) Exemplifique algumas aplicações deste teste na área clínica. É um teste qualitativo ou 
quantitativo? 
 
O teste da reação de Benedict que é possível fazer a identificação de açúcares 
redutores é um teste qualitativo. Na prática clínica é possível utilizar esse teste para 
fazer a identificação de glicose na urina a afim de detectar diabetes, também pode ser 
utilizado como testes em alimentos. 
 
 
E) Conclusão sobre a identificação de açúcares redutores utilizando o Teste de Benedict. 
 
Com o teste de Benedict foi possível fazer a identificação ou não de açucares redutores. 
Esse teste é importante para diversas práticas clínicas conforme citado no decorrer do 
relatório. A cor do reativo de Benedict possui a coloração azul, porém se houver a 
junção da carbonila do açúcar redutor e o íon cúprico irá formar um composto vermelho.