RELATÓRIO CROMATOGRAFIA EM CAMADA DELGADA

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UNIVERSIDADE FEDERAL DO PIAUÍ – UFPI 
CENTRO DE CIÊNCIAS DA NATUREZA – CCN 
DEPARTAMENTO DE QUÍMICA 
CURSO: BACHARELADO EM FARMÁCIA 
PROFª: Drª NILZA CAMPOS ANDRADE 
JOSÉ VINICIUS DE ARAUJO GONCALVES 
 
 
 
 
 
 
 
 
CROMATOGRAFIA EM CAMADA DELGADA DE SÍLICA GEL 
(SEPARAÇÃO DE PIGMENTOS DE FOLHAS VERDES) 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
Teresina – PI 
2021 
 
 
JOSÉ VINICIUS DE ARAUJO GONÇALVES 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
CROMATOGRAFIA EM CAMADA DELGADA DE SÍLICA GEL 
(SEPARAÇÃO DE PIGMENTOS DE FOLHAS VERDES) 
 
 
 
 
Relatório elaborado pelo discente 
José Vinícius de Araujo Gonçalves 
do 2° período do curso de Farmácia, 
apresentado a disciplina de Química 
Orgânica Experimental, ministrada 
pela Profª. Drª Nilza Campos 
Andrade para obtenção de nota. 
 
 
 
 
 
 
Teresina – PI 
2021 
 
 
SUMÁRIO 
 
RESUMO............................................................................................................. 
1. INTRODUÇÃO.................................................................................................. 
2. PARTE EXPERIMENTAL.................................................................................. 
3. RESULTADOS E DISCUSSÃO....................................................................... 
4. CONCLUSÃO................................................................................................... 
REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS..................................................................... 
QUESTIONÁRIO.................................................................................................. 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
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RESUMO 
A prática apresentada objetiva a realização do processo de 
cromatografia em camada delgada Sílica Gel em lâmina. O método utilizado 
consistiu na separação de componentes de uma amostra de folhas de 
espinafre mergulhada em uma mistura de éter de petróleo e álcool metílico, 
através da camada de Sílica Gel. Os componentes e a fase estacionária 
interagem em variados níveis, onde pode-se determinar a distância percorrida 
por cada um na lâmina. 
 
1. INTRODUÇÃO 
A técnica da cromatografia consiste na migração diferencial dos 
componentes de uma mistura, tomando-se por base as diferentes interações. 
No caso da cromatografia em camada delgada, ocorre a partir da mistura 
sólido-líquido, caracterizada pela migração da fase móvel (líquida) sobre uma 
camada delgada de adsorvente retido em uma superfície plana chamada de 
fase estacionária (sólida). 
Nesse caso, observa-se a separação dos componentes em faixas 
coloridas, a partir da passagem de éter de petróleo (fase móvel) através de 
uma coluna de vidro preenchida com carbonato de cálcio (fase estacionária), à 
qual se adicionou o extrato. Este é provavelmente o motivo pelo qual a técnica 
é conhecida como cromatografia, podendo levar à errônea ideia de que o 
processo seja dependente da cor. 
O método da cromatografia pode ser utilizado para a identificação de 
compostos, para a purificação de compostos, separando-se as substâncias 
indesejáveis e para a separação dos componentes de uma mistura. No 
experimento será utilizado para a obtenção da separação dos compostos 
vegetais, calculando-se os fatores de retardamento (Rf) a cada mancha a partir 
da separação. 
 
 
 
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2. PARTE EXPERIMENTAL 
 
Materiais e reagentes 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
Procedimento experimental 
a) Preparação do extrato 
 Em um almofariz, colocaram-se 5-10 folhas de espinafre e alguns 
mililitros de uma mistura 2:1 de éter de petróleo e etanol. 
 Em seguida, trituraram-se bem as folhas e obteve-se uma solução 
esverdeada. Com o auxilio de uma pipeta de Pasteur e uma bolinha de 
algodão, filtrou-se o extrato e o transferiu para um funil de separação. 
 Posteriormente, adicionou-se igual volume de água no funil de 
separação, agitando-o cuidadosamente e descartou-se a fase aquosa, 
repetindo o processo. Logo após, transferiu-se a solução para um 
Erlenmeyer e adicionou-se cerca de 1 g de sulfato de sódio anidro. 
 Com uma pipeta de Pasteur, decantou-se a solução de pigmentos do 
sulfato de sódio, transferindo-o para um béquer. 
 
b) Aplicação da amostra em uma placa 
 Utilizou-se um capilar para a aplicação de duas gotas da solução de 
pigmentos sobre uma placa sílica (2,5 x 2,75 cm) a 1,0 cm de uma das 
extremidades. 
 
c) Desenvolvimento do cromatograma 
 Primeiramente, preparou-se uma cuba colocando uma tira de papel de 
filtro de 4 x 5 cm e 10 mL de uma solução de éter de petróleo. 
 Éter de petróleo 
 Etanol 
 Clorofórmio 
 Acetona 
 Sulfato de sódio anidro 
 Folhas de espinafre 
 Funil de separação de 60mL 
 Placas de sílica gel 
 Papel de filtro 
 Proveta de 10mL 
 Cubetas de 100mL 
 Béquer de 50 e 100mL 
 Erlenmeyer de 25mL 
 Placa de Petri 
 Pipeta de Pasteur 
 Pipeta de 5mL 
 Capilares 
 Almofariz e pistilo 
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 A placa foi colocada na cuba, cuidadosamente, evitando que o ponto de 
aplicação da amostra toque no solvente. 
 O solvente, ao atingir cerca de 0,5 cm do topo da placa, foi retirado da 
cuba e marou-se a linha de chegada da fase móvel. Com o auxílio de 
uma régua, calculou-se o fator de retenção. 
 
 
3. RESULTADOS E DISCUSSÕES 
A partir do experimento da cromatografia em camada delgada de Sílica 
Gel, foi-se possível a obtenção da separação de pigmentos da folha de 
espinafre. Compreendendo a fase estacionária em sílica gel e a fase móvel em 
uma solução de éter. 
Em virtude da polaridade das substâncias, pôde-se separar os 
pigmentos carotenos, clorofilas e xantofilas do extrato de folhas de espinafre. 
Isso é determinado a partir da afinidade com a fase estacionária. 
Mesmo que a sílica seja um composto polar, a fase móvel tem um 
caráter mais apolar. Os carotenos, por serem hidrocarbonetos apolares, 
possuem mais afinidade com a fase móvel. Já as xantofilas, devido a presença 
de um grupamento hidroxila, possuem afinidade moderada com a fase 
estacionária, diante da possibilidade da formação de ligação de hidrogênio com 
o etanol. Sendo assim, quanto maior a afinidade e retenção pela fase 
estacionária da substância, maior será a distância do ponto de aplicação da 
amostra. 
A partir da análise do cromatograma, pôde-se notar que os carotenos 
foram os primeiros a serem isolados, por serem pouco polares, seguidos das 
clorofilas a e b e finalmente da xantofila, de maior polaridade. 
A equação utilizada para calcular o fator de retenção para cada 
substância, a partir da análise do cromatograma, é: 
 
 
Rf = ds / dm 
 
 
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No cromatograma do extrato com folhas de espinafre, obtiveram-se os 
seguintes resultados: 
 
 
 
 
 
 Estes dados comprovam o estabelecimento da relação entre os fatores 
de retenção e os pigmentos separados, sabendo que o fator de retenção é 
inversamente proporcional à polaridade da molécula. 
Assim, o Rf 0,2 refere-se à clorofila a, o Rf 0,42 à clorofila b, o Rf 0.84 
refere-se às xantofilas, e o Rf 1.0 aos carotenos. 
 
4. CONCLUSÃO 
Logo, pode-se concluir que a cromatografia em camada delgada de 
Sílica Gel é bastante vantajosa, devido a rapidez, boa resolução e a presença e 
manchas pouco difusas, sendo possível obter maior precisão na medição das 
bandas. 
Também pôde-se constatar que o caroteno é uma substância com pouca 
afinidade pela fase estacionária, resultando em um maior fator de retenção, 
seguido pelas xantofilas, com maior afinidade com a fase estacionária, com o 
segundo maior fator de retenção e por último as clorofilas a e b, sendo a 
clorofila a mais retida que a clorofila b, devido seu menor fator de retenção e 
maior afinidade estacionária. 
 
 
 
 
 
ds substância 1: 1,0 cm Rf 1: 0,2 cm 
ds substância2: 2,3 cm Rf 2: 0,42 cm 
ds substância 3: 4,2 cm Rf 3: 0,84 cm 
ds substância 4: 5,0 cm Rf 4: 1,0 cm 
Dm = 5,0 cm 
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REFERÊNCIA BIBLIOGRÁFICA 
 
BOBBLIO, F. O.; BOBBLIO, P.A. Introdução à química de alimentos. 2. ed. 
São Paulo: Livraria Varela. 1992. 
 
COLLINS, C. H.; BRAGA, G. L.; BONATO, P. S. Introdução a métodos 
cromatográficos. 6. ed, Campinas, Editora da UNICAMP,1995. 
 
COSTA, Andressa da Silva; ALENCAR, Daniele Nataly de; LIMA, Kamilla 
Giovana de Aguiar; VIEIRA, Laynara Vitoria da Silva; NASCIMENTO, Rayara 
Sousa Silva do; COSTA, Wendel Macedo da. CROMATOGRAFIA EM 
CAMADA DELGADA DE SÍLICA EM GEL. 2018. Disponível em: 
https://www.passeidireto.com/arquivo/56591437/6-cromatografia-em-camada-
delgada-de-silica-gel. Acesso em: 10 abr. 2021. 
 
DEGANI, A. L. G., CASS, Q. B.; VIEIRA, P. C. Quimica Nova na Escola, 
1998. 7, 21 
 
ROBERTS, R. M.; GILBERT, J. C.; RODEWALD, L. B. WINGROVE, A. S., 
Modern experimental organic chemistry, 4 ed. Phyladelphia Saunders 
College Publishing, 1985. 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
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QUESTIONÁRIO 
1 - Pesquisar a estrutura das clorofilas a e b, xantofilas e carotenos. 
 
 
 
 
 
 Xantofila Zeaxantina 
 
2 - Qual é o estado físico da fase móvel e da fase estacionária na 
cromatografia em camada delgada? 
Na fase móvel é o estado líquido (éter de petróleo). Na fase estacionária é o 
estado sólido (placa de gel de sílica). 
 
3 - Qual é o mecanismo de separação da cromatografia em camada 
delgada de sílica em gel? 
O mecanismo de adsorção, utiliza um líquido (fase móvel) e um sólido (fase 
estacionária). As forças moleculares promovem a interação dos componentes 
da substância com a fase móvel, unindo as moléculas do líquido com do sólido. 
 
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4 – Com que finalidade a solução de pigmentos é lavada com água? 
Para separar a fase orgânica da inorgânica, ou seja, separando os 
componentes não necessários para o teste, deixando apenas os pigmentos. 
 
5 – Porque o sulfato de sódio anidro é adicionado à solução de 
pigmentos? 
A adição do sulfato de sódio anidro tem efeito retirador de água, retendo 
qualquer água que ainda tenha sobrado da fase anterior (decantação), 
tornando-se um sal hidratado. 
 
6 – Que se entende por fator de retenção (Rf)? 
É a razão entre a distância percorrida pela substância e a distância percorrida 
pela fase móvel, sendo individual para cada composto da amostra.